胃腺癌組織中肌成束蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達及意義

于鵬杰 戈 銳 王煥麗 張成武 燕 速 馬玉濱

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海 西寧 810000)

胃腺癌組織中肌成束蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達及意義

于鵬杰 戈 銳 王煥麗1張成武 燕 速 馬玉濱

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海 西寧 810000)

目的 檢測胃腺癌中肌成束蛋白(Fascin)和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9的表達，分析其臨床意義。方法 85例胃腺癌患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為觀察組，正常胃黏膜組織32例作為對照組，應(yīng)用免疫組化方法檢測二組中Fascin和MMP-9的表達。結(jié)果 觀察組中Fascin和MMP-9的陽性率明顯高于對照組。觀察組中Fascin和MMP-9的表達與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和浸潤深度密切相關(guān)。觀察組中Fascin的表達與腫瘤的最大徑密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示Fascin和MMP-9呈正相關(guān)。結(jié)論 胃腺癌中Fascin和MMP-9高表達可以促進腫瘤的形成和進展，二者具有一定的協(xié)同作用。

胃腺癌；肌成束蛋白；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；免疫組化

胃癌病變涉及飲食因素及遺傳因素等，可以發(fā)生在胃的任何部位，絕大部分是胃腺癌，其病變與基因和蛋白的表達失調(diào)有關(guān)〔1〕。肌成束蛋白(Fascin)是一種細(xì)胞骨架蛋白，研究認(rèn)為其高表達與腫瘤的形成和進展有關(guān)〔2,3〕。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9是與轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白，可以降解細(xì)胞外基質(zhì)成分和基底膜，使轉(zhuǎn)移的屏障破壞，促使腫瘤遷移〔4,5〕。本文對胃腺癌患者術(shù)后留取的腫瘤組織進行Fascin和MMP-9蛋白的檢測，分析其臨床意義。

1 材料和方法

1.1 臨床資料 2014年5月至2015年12月我院經(jīng)病理學(xué)確診、并行根治手術(shù)的胃腺癌患者作為觀察組，共85例，其中男45例，女40例，年齡35～86歲，平均61.8歲。納入均符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，術(shù)前均未行放、化療。選擇上述患者術(shù)后標(biāo)本中距腫物邊緣>3 cm的正常胃黏膜組織32例作為對照組，其中男16例，女16例，年齡37～82歲，平均58.8歲。兩組一般臨床資料無明顯差異，具有可比性。

1.2 兩組中Fascin和MMP-9表達的檢測 兩組術(shù)后標(biāo)本均應(yīng)用甲醛溶液固定，石蠟包埋，切取4 μm切片后置于膠片上進行Fascin和MMP-9的檢測。Fascin和MMP-9的檢測應(yīng)用免疫組化二步法，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。

1.3 Fascin和MMP-9結(jié)果的判斷 Fascin和MMP-9陽性部位是細(xì)胞質(zhì)，以染成棕黃色為陽性。選擇上皮細(xì)胞分布集中的熱點區(qū)進行計數(shù)，共選擇3個高倍視野區(qū)域，計算陽性率，取平均值，以陽性率<10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組中Fascin和MMP-9陽性率的比較 兩組中Fascin和MMP-9的陽性率差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

2.2 觀察組不同臨床病理特征中Fascin和MMP-9表達的差別 觀察組中Fascin和MMP-9的表達與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和浸潤深度密切相關(guān)。觀察組中Fascin的表達與腫瘤的最大徑密切相關(guān)。見表2。

2.3 觀察組Fascin和MMP-9表達的相關(guān)性 Fascin和MMP-9表達有正相關(guān)性(r=0.51,P<0.05)。

表1 兩組中Fascin和MMP-9陽性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床病理特征中Fascin和 MMP-9表達的差別〔n(%)〕

3 討 論

Fascin最早由Bryan和Kane從海膽卵母細(xì)胞的提取物中發(fā)現(xiàn)并提純，人的Fascin基因位于染色體的7p22，其編碼的蛋白分子量為55 kD，參與F肌動蛋白的特異性結(jié)合，具有高度保守性〔6,7〕。也有研究認(rèn)為Fascin蛋白含有4個β三葉草結(jié)構(gòu)域，每個三葉草結(jié)構(gòu)域中還含有6個雙鏈β發(fā)夾結(jié)構(gòu)，目前的研究認(rèn)為Fascin在細(xì)胞運動、黏附及細(xì)胞間信息交流中有重要的作用〔8,9〕。楊強等〔10〕應(yīng)用免疫組化方法檢測Fascin在結(jié)直腸腺瘤和腺癌中的表達，認(rèn)為Fascin蛋白是結(jié)直腸癌發(fā)生的一個遲發(fā)性的事件，在惡性腫瘤中高表達，且參與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。MMPs是一組在結(jié)構(gòu)上具有較高同源性、能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的內(nèi)肽酶的總稱，MMP-9是家族中的重要成員，與MMP-2同屬于明膠酶類，也稱為明膠酶B〔11,12〕。MMP-9主要來源于巨噬細(xì)胞、惡性腫瘤細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和滋養(yǎng)細(xì)胞等〔13〕。MMP-9具有催化效率高、對底物的專一性、無明顯的催化副反應(yīng)的作用〔14〕。MMP-9的作用主要有三個環(huán)節(jié)：①轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)；③酶原活化；③活化后的調(diào)節(jié)。以上作用可以引起細(xì)胞外基質(zhì)的有效降解，使細(xì)胞轉(zhuǎn)移的屏障消失，促進腫瘤的轉(zhuǎn)移和播散〔15,16〕。

本實驗結(jié)果中提示Fascin和MMP-9高表達是胃癌形成的促進因素。研究認(rèn)為Fascin高表達時會出現(xiàn)細(xì)胞膜表面突起的增多，使細(xì)胞分化程度的下降，細(xì)胞增殖旺盛、肌動蛋白骨架重建和細(xì)胞的運動性增強，使腫瘤組織在三維的基質(zhì)中的侵襲能力提高2～5倍〔10〕。也有研究認(rèn)為Fascin主要通過參與細(xì)胞突起的形成來促進腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移〔17,18〕。本文結(jié)果提示Fascin和MMP-9高表達可以促進腫瘤的淋巴道播散和侵襲性生長。Fascin高表達是促進腫瘤生長的重要因素，F(xiàn)ascin高表達是腫瘤細(xì)胞活動性增高的表現(xiàn)。Fascin在腫瘤進展中的作用可能與多種蛋白的調(diào)節(jié)有關(guān)，如對細(xì)胞黏附蛋白的調(diào)節(jié)。Fascin可以引起黏附蛋白E-cadherin表達的下降或丟失，此時細(xì)胞間的連接緊密度下降，細(xì)胞易于離開原發(fā)灶，形成播散〔19〕。本文結(jié)果提示Fascin和MMP-9具有一定的協(xié)同作用，這是Fascin促進轉(zhuǎn)移的一種調(diào)節(jié)方式。劉俊等〔20〕也在肝門膽管癌中發(fā)現(xiàn)Fascin和MMP-9高表達及協(xié)同作用，認(rèn)為Fascin和MMP-9共同表達于癌細(xì)胞的胞質(zhì)中，F(xiàn)ascin的表達上調(diào)可以激活MMP-9，而當(dāng)MMP-9激活后引起細(xì)胞基底的降解，促使腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移〔21〕。

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〔2015-12-07修回〕

(編輯 杜 娟)

于鵬杰(1980-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

R735

A

1005-9202(2017)04-0899-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.051

1 青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科一病區(qū)