心力衰竭患者血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2和B型尿鈉肽的表達(dá)

王洪靜 周雪艷

(大慶龍南醫(yī)院老年病科，黑龍江 大慶 163000)

心力衰竭患者血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2和B型尿鈉肽的表達(dá)

王洪靜 周雪艷1

(大慶龍南醫(yī)院老年病科，黑龍江 大慶 163000)

目的 研究聯(lián)合檢測(cè)血清脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)和B型尿鈉肽(BNP)的表達(dá)在心力衰竭診斷中的作用。方法 心力衰竭患者84例，分為對(duì)照組、患病組、治愈組。各組患者分別采血，分離血清，采用ELISA測(cè)定患者血清中Lp-PLA2和BNP的表達(dá)情況。結(jié)果 在心力衰竭患者中，Lp-PLA2和BNP呈現(xiàn)高表達(dá)趨勢(shì)，其中Lp-PLA2在患病組中表達(dá)量高于對(duì)照組和治愈組(P<0.01)，BNP亦高于其余兩組(P<0.01)，治愈組中BNP水平高于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論 Lp-PLA2和BNP在心力衰竭患者中呈高表達(dá)，治愈后Lp-PLA2和BNP表達(dá)量下降。Lp-PLA2和BNP可作為心力衰竭較為特異性的臨床診斷和治療標(biāo)準(zhǔn)。

心力衰竭；脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2；B型尿鈉肽

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)是一種炎癥標(biāo)志物〔1〕，血漿 Lp-PLA2 水平可預(yù)測(cè)缺血性疾病和心力衰竭患者的未來心血管事件。B型尿鈉肽，又稱腦尿鈉肽(BNP)，作為心力衰竭定量標(biāo)志物〔2〕，不僅能反映左室收縮功能障礙，也可反映左室舒張功能障礙、瓣膜功能障礙和右室功能障礙等情況〔3〕。本課題組著重探討心力衰竭患者Lp-PLA2和BNP聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義，為心力衰竭的特異性診斷和治療指征提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象 選擇大慶市龍南醫(yī)院循環(huán)內(nèi)科已確診的心力衰竭患者32例為患病組，本科室已治愈患者32例為治愈組，同時(shí)收集健康人群20例作為對(duì)照組。見表1。各組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)〔4〕：(1)心衰患者多因下列3種原因之一就診：運(yùn)動(dòng)耐量降低、液體潴留以及其他心源性或非心源性疾病，均會(huì)有相應(yīng)癥狀和體征〔5〕。(2)心力衰竭的常規(guī)檢查：①二維超聲心動(dòng)圖及多普勒超聲；②心電圖；③實(shí)驗(yàn)室檢查：全血細(xì)胞計(jì)數(shù)、尿液分析、血生化(包括鈉、鉀、鈣、血尿素氮、肌酐、肝酶和膽紅素、血清鐵/總鐵結(jié)合力)、空腹血糖和糖化血紅蛋白、血脂及甲狀腺功能等；④生物學(xué)標(biāo)志物;⑤X線胸片。(3)心衰的特殊檢查：①心臟核磁共振(CMR);②冠狀動(dòng)脈造影;③核素心室造影及核素心肌灌注和(或)代謝顯像;④負(fù)荷超聲心動(dòng)圖;⑤經(jīng)食管超聲心動(dòng)圖;⑥心肌活檢。

排除標(biāo)準(zhǔn):①繼發(fā)性心力衰竭;②醫(yī)源性心力衰竭;③心力衰竭合并其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者。

表1 各組患者一般情況

1.2 治愈組治療方法 依據(jù)患者的不同狀況進(jìn)行治療：①地高辛，0.125 mg，每日一次；②ACEI+洛汀斯，10 mg，每日一次；③呋塞米(速尿)，10～20 mg，每日一次；④螺內(nèi)酯，20 mg，每日一次；⑤倍他樂克，25 mg，每日兩次。慢性心力衰竭患者①②⑤可長(zhǎng)期服用，如患者水腫消失③④可停用。

1.3 治療效果評(píng)估 ①NYHA心功能分級(jí)〔6〕：評(píng)價(jià)心力衰竭治療后癥狀的變化；②6 min步行試驗(yàn)：評(píng)估運(yùn)動(dòng)耐力和勞力性癥狀的客觀指標(biāo)或評(píng)價(jià)藥物治療效果；③超聲心動(dòng)圖：左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)和各心腔大小可提供客觀評(píng)價(jià)指標(biāo)；④生活質(zhì)量(QOL)評(píng)估〔4〕。治愈標(biāo)準(zhǔn)：患者無活動(dòng)后胸悶、氣短、無夜間陣發(fā)性呼吸困難，可耐受日?；顒?dòng)，BNP標(biāo)準(zhǔn)值范圍內(nèi)(<100 pg/ml)，超聲心動(dòng)圖左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)<50%。

1.4 方法

1.4.1 采樣 各組分別采血，分離血清，-20℃保存待測(cè)。

1.4.2 儀器及試劑 酶標(biāo)儀(Bio-red)，Lp-PLA2和BNP ELISA試劑盒(寶生物)，離心機(jī)(上海譜振)，微量移液器及相關(guān)型號(hào)槍頭(Eppendorff)，搖床(北京中科)。

1.4.3 qRT-PCR法檢測(cè)血液樣本中Lp-PLA2和BNP的含量 處理患者血液樣本，提取總RNA并進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到cDNA樣本，PCR法檢測(cè)mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

1.4.4 ELISA法檢測(cè)血液樣本中Lp-PLA2和BNP蛋白含量 依據(jù)試劑盒說明操作，具體步驟：洗版2次，加入100 μl標(biāo)準(zhǔn)品和樣本，一抗孵育2 h，洗版4次，二抗孵育1 h，洗版4次，閉光加入反應(yīng)液，加入終止液終止反應(yīng)，于450 nm處檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS15.0軟件進(jìn)行χ2及t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 各組血液樣本中Lp-PLA2和BNP mRNA的含量 患病組患者血液樣本中Lp-PLA2和BNP mRNA相對(duì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P<0.05，P<0.01)。治愈組患者血液樣本中Lp-PLA2和BNP mRNA含量較患病組明顯下降(P<0.05)。見圖1。

2.2 各組患者血清中Lp-PLA2和BNP的蛋白表達(dá)水平 患病組Lp-PLA2和BNP表達(dá)高于對(duì)照組(P<0.01)。治愈組Lp-PLA2和BNP的高表達(dá)有所回落，其中BNP差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

與對(duì)照組比較:1)P<0.05，2)P<0.01圖1 各組血清Lp-PLA2和BNP mRNA相對(duì)表達(dá)量

組別nLp-PLA2(μg/ml)BNP(pg/ml)對(duì)照組20164.25±10.4694.63±9.53患病組32243.45±14.632)163.45±19.532)治愈組32173.66±15.42134.36±12.531)

與對(duì)照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01

3 討 論

心力衰竭是由于心臟結(jié)構(gòu)或功能異常，導(dǎo)致心室充盈或射血能力受損的一組復(fù)雜臨床綜合征，主要臨床表現(xiàn)為呼吸困難和乏力(活動(dòng)耐量受限)以及液體 潴留(肺淤血和外周水腫)。心力衰竭為各種心臟疾病的嚴(yán)重和終末階段，是當(dāng)今最重要的心血管病之一〔7〕。

Lp-PLA2與心功能相關(guān)，對(duì)心功能的預(yù)測(cè)價(jià)值獨(dú)立于冠心病之外〔8〕，隨著相關(guān)疾病嚴(yán)重程度上升，Lp-PLA2和BNP升高、LVEF下降，提示心肌損傷及心功能受損時(shí)BNP上升、LVEF下降，同時(shí)血液中Lp-PLA2的釋放量增多，隨心功能損傷加重而升高〔9〕。

本研究結(jié)果提示，心力衰竭的發(fā)病及治療情況與Lp-PLA2和BNP密切相關(guān)，心力衰竭患者Lp-PLA2和BNP呈高表達(dá)狀態(tài)，心力衰竭治愈后Lp-PLA2和BNP表達(dá)回落。Lp-PLA2和BNP的聯(lián)合表達(dá)情況可以作為診斷和治療心力衰竭的重要的、較特異性的指標(biāo)，為臨床的診斷和治療提供了新的依據(jù)和參考。

1 杜 迎.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、B型鈉尿肽的檢測(cè)在冠心病預(yù)后預(yù)測(cè)中的意義〔J〕.醫(yī)藥論壇雜志，2012；3(1)：63-6.

2 葛詠梅，張立江.血漿BNP檢測(cè)在慢性心衰診斷及治療中的應(yīng)用〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2009；11：74-8.

3 韋 虎，漆波，王德榮，等.B-型鈉尿肽對(duì)診斷中國(guó)心衰患者的系統(tǒng)評(píng)價(jià)〔J〕.西部醫(yī)學(xué)，2010；6，46-7.

4 中國(guó)心力衰竭診斷和治療指南2014〔J〕.中華心血管病雜志，2014；2：98-122.

5 Jessup M，Abraham WT，Casey DE，etal.2009 focused update：ACCF/AHA guidelines for the diagnosis and management of heart failure in adults：a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines：developed in collaboration with the International Society for Heart and Lung Transplantation〔J〕.Circulation，2009；119：1977-2016.

6 Anand IS，F(xiàn)lorea VG，F(xiàn)isher L.Surrogate end points in heart failure〔J〕.J Am Coll Cardiol，2002；39：1414-21.

7 邢作英，王永霞，朱明軍.慢性心力衰竭流行病學(xué)研究現(xiàn)狀及其病因〔J〕.中華實(shí)用診斷與治療雜志，2012；10：77-9.

8 Suzuki T，Solomon C，Jenny NS，etal.Lipoprotein-associated phospholipase A(2) and risk of congestive heart failure in older adults：the Cardiovasucular Heath Study 〔J〕.Circ Heart Fail，2009；2(5)：429-36.

9 鄭永紅，鹿秀霞，陳德偉.脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2與冠狀動(dòng)脈病變程度及心功能變化的關(guān)系〔J〕.中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2015；18(20)：2398-401.

〔2016-01-24修回〕

(編輯 郭 菁)

國(guó)家自然科學(xué)基金(81570360)

周雪艷(1961-)，女，主任醫(yī)師，主要從事動(dòng)脈粥樣硬化及冠心病發(fā)病機(jī)制研究。

王洪靜(1977-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事心力衰竭的診斷和治療研究。

R392.7

A

1005-9202(2017)04-0847-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.027

1 吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院心內(nèi)科