無菌注射劑在生產(chǎn)過程中的無菌檢查

顧少薇

（哈藥集團三精制藥有限公司 黑龍江 哈爾濱 150000）

摘 要：近些年來，各大媒體相繼報道了因為注射劑污染造成的輸液污染導致了患者出現(xiàn)敗血癥甚至嚴重的出現(xiàn)死亡等事件，這些事件的報道使醫(yī)學界和社會各界對于注射劑的安全無菌給予了大量的關注，在生產(chǎn)過程中的滅菌殺菌也得到了各個注射劑生產(chǎn)廠商的關注和重視。其實注射劑細菌感染主要過程是藥物中的微生物通過人體的機體作用導致的人體出現(xiàn)過敏、中毒、身體特征發(fā)生改變等嚴重的可能會危及生命。本文從無菌注射劑在生產(chǎn)過程中的問題以及在生產(chǎn)過程中各種無菌方法的驗證檢查來表現(xiàn)微生物感染在人類有機體中的運作，同事提出無菌注射劑在生產(chǎn)中應該注意的問題和對策建議。本文本著不斷地完善我國注射劑的質(zhì)量，為我國人民的健康負責的目的來進行研究，希望本文的研究成果能夠?qū)Ρ拘袠I(yè)中的有關學者有一定的借鑒意義，同時對注射劑的生產(chǎn)廠家有一定的現(xiàn)實指導意義。

關鍵詞：無菌注射劑；生產(chǎn)過程；無菌檢查

前言：無菌首先需要做的一件事就是滅菌，而滅菌在傳統(tǒng)意義上來說是指能夠在一定空間和時間內(nèi)把環(huán)境中所存貨的所有微生物殺死就是滅菌。經(jīng)過近現(xiàn)代的發(fā)展，我們的滅菌工藝其實已經(jīng)發(fā)展的較為完善。無菌檢查則是建立在滅菌基礎上的一種檢測活動，現(xiàn)在每個國家都已經(jīng)發(fā)展出自己體系下的無菌檢查法。從滅菌的理論實驗上看，滅菌的規(guī)律是遵循著數(shù)學意義上的對數(shù)原則的，從這個角度出發(fā)，就以為著其實每一次的滅菌都是不完全的滅菌，無論我們使用什么樣的物理或者化學的方法，我們都不能保證所有的微生物已經(jīng)在滅菌試驗后不存在了； 從理論數(shù)量的角度來看，我們可以看到，盡管各國的在此方面的發(fā)展繁榮，無菌檢查依然存在著很多爭議，在研究過程中，我們需要充分的了解無菌檢查法對于檢查效度和信度方面的局限性。

1.無菌注射劑在生產(chǎn)過程中的無菌檢查的方法

1.1薄膜過濾法

薄膜過濾法在抑制真菌和抑制細菌的效果在世界各國的藥典中的操作步驟大概是差不多的，都是有對照組和實驗組通過在不同殺菌條件下進行對比，檢驗注射液的無菌性。薄膜過濾法主要是通過鹽酸地卡因和普魯卡因這兩種注射液來進行實驗研究，為了防止實驗偏離普遍性，實驗人員在進行實驗時每種注射液的批號各取20瓶，同一批號的這20瓶供試品通過集菌儀抽濾集菌，最后將霉菌培養(yǎng)基、液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基各120ml分別通過集菌儀抽到各自集菌器內(nèi)，放置霉菌培養(yǎng)箱、隔水式恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，通過控制室內(nèi)恒定的溫度來保證環(huán)境的客觀性，在這種規(guī)定的溫度下，實驗員逐日觀察并記錄是否有細菌生長。通過觀察得出結(jié)論，我們可以知道通過薄膜過濾法進行的滅菌從理論上來講是非常成功的，我們通過實驗觀察兩周之后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中并沒有明顯的細菌生長，對照管中陽性檢查為（+），符合規(guī)定，所以薄膜過濾法是一種很好的無菌檢查辦法。需要注意的是在使用不同的濾膜時，首先要分清樣品的特性，有的樣品是親水性的，有的樣品是親脂性的，親水性的樣品應該選用硝酸纖維素濾膜，親脂性的則選用醋酸纖維素濾膜；抗生素類的樣品則可以考慮采用對抗生素本身不具有破壞性的一些濾膜。

1.2直接接種法

直接接種方法的原理就是檢驗通過環(huán)境的改變，注射液在環(huán)境改變中陽性菌不生長或者幾乎不生長，我們就可以把其看作是一個合格的滅菌操作。這種檢查方法主要是把定量的樣品放進培養(yǎng)基中進行觀察得出實驗結(jié)論。為了實驗的方便性和后期比較的直觀性我們還是用鹽酸地卡因注射液和鹽酸普魯卡因注射液來進行實驗，分別取這兩種注射劑20瓶，把同一個批號的樣品試劑用無菌注射器直接取樣，分別放入不同的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基按照《中國藥典》的要求，一般是選用硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基管和霉菌培養(yǎng)基管這兩種培養(yǎng)基基液，同時也需要作陽性的對照，這樣通過兩周的時間進行培養(yǎng)、觀察、記錄，我們得出結(jié)論，在兩種培養(yǎng)基中都沒有明顯的細菌生長，這說明了其無菌生產(chǎn)合格。在一些細節(jié)方面，關于這個方法的操作過程，不同的流派有不同的觀點，CHP認為消除樣品的抑菌性可以采用稀釋來完成，它規(guī)定了樣品和培養(yǎng)基之間的確定比例；BP則認為要用改變環(huán)境的方法來消除樣品的抑菌性。不管怎么說，他們的方法都通過了眾多實驗的研究，都有自身的立足的根據(jù)，在具體的實驗中采取什么方法應該按照具體的試劑具體問題具體分析。

1.3兩種方法的應用比較討論

通過上述兩種方法的實驗研究，我們可以看出這兩種方法都具有較高的科學性，實驗的成功性是母庸置疑的，但是兩種方法各有利弊，直接取樣法節(jié)約資源只需要一點少量的試劑，但是這種方法很容易受到外界環(huán)境的干擾，它對實驗人員和實驗步驟有較高的要求。薄膜過濾則相對直接取樣法來說花費更多的試劑，但是能夠一定程度上減少環(huán)境對實驗的影響，操作較為簡單，對實驗人員的要求較低，較容易完成。而且薄膜過濾法對于儀器的要求也十分簡單，同時也能夠大大的增強實驗的可靠性，近些年來也得到了眾多學者的信賴。薄膜過濾法的另外一個缺點就是集菌儀的價格昂貴，很少有科研機構或者研究者能夠支付其巨大的儀器費用，直接取樣法在這個方面就顯得非常經(jīng)濟實惠，也是眾多條件有限的學者們的首選之一。

2.關于如何在無菌注射劑生產(chǎn)過程中進行有效的無菌檢查的建議

2.1不斷提高研究的深度和實驗人員的專業(yè)素養(yǎng)

滅菌工藝是一種十分專業(yè)工藝，需要在滅菌之前對整個工藝進行深入的研究和充分的了解，在一些需要控制含量的地方不斷的加以深入的研究，掌握不同的劑量杜宇實驗產(chǎn)生的差異和變化，掌握哪些因素會影響試劑的改變，在控制環(huán)境的時候需要做到的具體步驟，例如室內(nèi)溫度和濕度的控制應該如何實現(xiàn)，每種不同性質(zhì)的試劑采取的處理方法是不一樣的等等問題的研究都是非常必要的，這需要專業(yè)人員經(jīng)過長時間的訓練和操作才能形成的經(jīng)驗和知識素養(yǎng)。

2.2制定出標準型的規(guī)范是必要的

實驗的操作規(guī)范是我們進行一項可靠的實驗的基本保證，但是由于國內(nèi)外的標準不統(tǒng)一，很多學科上的建設不夠完善，導致試驗過程中還是有很多規(guī)范的標準是難以統(tǒng)一，這對于學術進行國際間的交流的影響是深遠的，這也造成了很多國家學術之間的隔閡，這種隔閡應該是現(xiàn)代我們的研究應該規(guī)避的方面，由此可見，出臺一項通行的標準是具有跨時代的意義的。在無菌檢查發(fā)方面的標準各國也是有不同的標準，合格與不合格的標準難以統(tǒng)一直接就導致了很多人鉆了空子，損害了人民群眾的根本利益。

2.3相關器皿的滅菌操作也是必要的

采用無菌制造工藝，與產(chǎn)品直接接觸的容器、橡塞、與配制和灌裝相關的儲罐、管路、緩沖罐、灌裝用具等均應滅菌，這項過過程能夠充分地保證了實驗的可靠性和科學性，能夠方式其他污染源對于實驗的破壞，所以說這一點也是非常重要的，但是往往在很多實驗中沒有得到實驗人員的充分重視，導致了實驗的失敗?？諝獾膬艋彩菓摰玫街匾暤囊粋€方面，空氣是微生物直接賴以生存的一種很重要的因素，women實驗中對于環(huán)境的控制其實就是對于空氣中各個因素之間的控制。

3.結(jié)語

總而言之，無菌注射劑的安全范疇已經(jīng)是社會各界關注的重點，相信在這樣的關注下，我們的無菌注射劑的質(zhì)量將會大大提高，得到人民群眾的廣泛的信任。兩種較為常見的檢查無菌注射劑的方法現(xiàn)在已經(jīng)十分成熟，但是依然要看到其不足之處，希望在將來能夠進行有效的修改。

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