干露時(shí)長(zhǎng)及溫度對(duì)魁蚶幼貝潛沙行為及呼吸代謝的影響*

劉旭緒， 張秀梅， 覃樂政， 李文濤

(中國(guó)海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，山東 青島 266003)

干露時(shí)長(zhǎng)及溫度對(duì)魁蚶幼貝潛沙行為及呼吸代謝的影響*

劉旭緒， 張秀梅**， 覃樂政， 李文濤

(中國(guó)海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，山東 青島 266003)

為優(yōu)化魁蚶苗種的運(yùn)輸策略，提高在底播增殖過程中苗種的存活率。本實(shí)驗(yàn)于 10、15和20 ℃ 3個(gè)溫度條件下，分別對(duì)魁蚶 (Anadarabroughtonii) 幼貝進(jìn)行不同時(shí)長(zhǎng)(2 、4 、8 、16 和24 h) 的干露，研究了干露條件對(duì)魁蚶幼貝潛沙行為和呼吸代謝的影響。研究顯示，相同干露時(shí)長(zhǎng)內(nèi)，魁蚶幼貝在 15 ℃時(shí)的失水率最高；幼貝的潛沙能力隨干露時(shí)長(zhǎng)的增加和干露溫度的升高呈減弱趨勢(shì)，具體表現(xiàn)為在一定時(shí)間內(nèi)完成潛沙的魁蚶比例減小和完成潛沙的速度減慢。在 10 ℃條件下，干露幼貝再次入水后的潛沙行為恢復(fù)較快，20 ℃時(shí)干露 24 h 后，幼貝基本喪失潛沙能力，在 12 h 的觀察期內(nèi)未出現(xiàn)完成潛沙的個(gè)體。同時(shí)，干露導(dǎo)致魁蚶幼貝出現(xiàn)顯著的氧債和氨氮積累，干露后再次入水的魁蚶幼貝的耗氧率和氨氮排泄率顯著高于對(duì)照組水平。相同干露時(shí)長(zhǎng)內(nèi)，隨著干露溫度的升高，魁蚶耗氧率的峰值顯著增加，耗氧率的波動(dòng)幅度更加劇烈，且在短時(shí)間內(nèi)難以恢復(fù)至對(duì)照組水平。綜合分析認(rèn)為，魁蚶應(yīng)對(duì)干露的能力較弱，在底播苗種運(yùn)輸過程中，相較于 15和 20 ℃，10 ℃的運(yùn)輸溫度更好，同時(shí)運(yùn)輸時(shí)間不宜超過 8 h。

魁蚶；干露；溫度；潛沙行為; 幼貝; 呼吸代謝； 時(shí)長(zhǎng)

魁蚶 (Anadarabroughtonii) 隸屬于軟體動(dòng)物門(Mollusca)雙殼綱 (Bivalvia)蚶目(Arcoida)蚶科 (Arcidae)，分布于日本、朝鮮、菲律賓及中國(guó)?？涝谖覈?guó)北至遼寧，南至廣東沿海均有分布，以黃海北部較多[1]?？廊赓|(zhì)鮮美，經(jīng)濟(jì)價(jià)值很高，然而近年來由于過度捕撈，使得其自然資源遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需求[2]。為了修復(fù)魁蚶的自然資源，各地相繼開展了魁蚶的人工育苗及增殖放流。但增殖放流后魁蚶在放流海區(qū)的存活情況并不理想[3]。在魁蚶增殖放流的環(huán)節(jié)中，其苗種需要經(jīng)歷從中間培育場(chǎng)所轉(zhuǎn)移至放流海域的一段運(yùn)輸過程。通常，魁蚶苗種運(yùn)輸廣泛采用干運(yùn)法，該法操作簡(jiǎn)便，成本較低，但不適合長(zhǎng)距離運(yùn)輸[4]。在干運(yùn)過程中，貝類暴露于空氣中，此時(shí)溫度、濕度以及干露時(shí)長(zhǎng)都會(huì)對(duì)貝類造成影響。

其中溫度作為一個(gè)重要的環(huán)境因子，與貝類的生長(zhǎng)和存活密切相關(guān)[5-6]。任何溫度的變化，都會(huì)在一定程度上導(dǎo)致貝類呼吸代謝、攝食吸收等的改變[2,7]，高溫導(dǎo)致的熱脅迫還會(huì)降低細(xì)胞免疫活性、產(chǎn)生氧化應(yīng)激、破壞酶結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，使得貝類的能量收支平衡被破壞，從而影響貝類的免疫機(jī)能[8-10]，超出貝類承受范圍的熱脅迫最終還會(huì)導(dǎo)致貝類的死亡。干露作為對(duì)貝類的一種極端脅迫，會(huì)使貝類體內(nèi)的水分逐漸喪失[11]。同時(shí)處于空氣中的貝類無(wú)法像在水中一樣順利獲得氧氣，使得機(jī)體的厭氧代謝變?yōu)橹黧w，而類似于乳酸、琥珀酸等厭氧代謝的產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致貝類酸中毒[12-13]，使其免疫功能遭受破壞[14-15]。通常雙殼貝類在遭受干露時(shí)會(huì)通過降低呼吸代謝水平，或通過貝殼開閉等進(jìn)行一定程度的氧氣交換，來減輕干露對(duì)自身的危害[16-20]。然而這種自我調(diào)節(jié)具有一定的局限性，干露過程中溫度過高，或干露時(shí)長(zhǎng)過長(zhǎng)超出貝類的耐受極限后，貝類便會(huì)逐漸死亡[21-24]。

研究表明，貝類遭受干露時(shí)，機(jī)體不可避免地遭受厭氧代謝導(dǎo)致的損傷[12-15]。但這種損傷在一定程度內(nèi)可被修復(fù)[25-26]。當(dāng)貝類經(jīng)歷干露后再次進(jìn)入水體時(shí)，通過有氧代謝來分解體內(nèi)積累的厭氧代謝產(chǎn)物，從而使自身機(jī)能恢復(fù)到干露前水平。而這種恢復(fù)的直觀表現(xiàn)就是貝類再次入水后短期的高耗氧率[27-28]以及潛沙行為的變化等。對(duì)于生活在海底近表層的潛底性生物來說，最大的捕食風(fēng)險(xiǎn)來自于底表層的捕食者[29]，因此，潛沙行為對(duì)于埋棲型貝類具有重要意義[30-32]?？缹俾駰拓愵悾谠鲋撤帕髦兄挥忻绶N具備較強(qiáng)的潛沙能力，才能保證放流個(gè)體的存活與生長(zhǎng)[33]。而苗種運(yùn)輸過程中經(jīng)歷的干露脅迫會(huì)對(duì)底播貝類的生理機(jī)能和潛沙行為造成不同程度的影響，本文研究了不同溫度、不同干露時(shí)長(zhǎng)下魁蚶幼貝呼吸代謝及潛沙行為的變化，以為魁蚶苗種運(yùn)輸和底播增殖技術(shù)的優(yōu)化提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)用魁蚶幼貝采自膠南靈山灣筏式養(yǎng)殖區(qū)。將魁蚶取回后于40 cm × 50 cm × 40 cm循環(huán)水族箱中暫養(yǎng) 5 d。暫養(yǎng)期間每天早晚 2 次(早上 8:00，晚上 18:00 )投喂單細(xì)胞藻。用游標(biāo)卡尺測(cè)量魁蚶的殼長(zhǎng)、殼高、殼寬(精確到 0.01 mm)，并稱量濕重(精確到 0.01 g)。實(shí)驗(yàn)魁蚶的殼長(zhǎng)為 (36.87±0.08) mm，濕重為(12.14±0.10) g。

實(shí)驗(yàn)用沙取自青島第一海水浴場(chǎng)。取回實(shí)驗(yàn)室后用次氯酸鈉溶液浸泡 24 h消毒，洗凈后于 100 ℃烘干。取過 100 目篩的細(xì)沙待用。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)施及條件

實(shí)驗(yàn)使用品字型控溫水族箱( 40 cm × 50 cm × 40 cm)，水族箱內(nèi)連續(xù)充氣保持溶解氧在5 mg/L以上。箱內(nèi)使用沙濾天然海水，海水 pH 為 7.6～8.1 ，鹽度 31～34，暫養(yǎng)溫度為 10℃，光照周期為 12 L∶12 D。

實(shí)驗(yàn)中魁蚶的干露在生化培養(yǎng)箱中進(jìn)行。干露過程中，生化培養(yǎng)箱內(nèi)的濕度不低于 85%，同時(shí)用潮濕的紗布覆蓋魁蚶，每隔 2 h 向紗布灑水，以保持紗布的濕潤(rùn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)共分為 10、15和20 ℃ 3個(gè)溫度組。暫養(yǎng)結(jié)束后，開始進(jìn)行魁蚶的溫度馴化，從暫養(yǎng)溫度10℃開始，每天只升高海水溫度 1℃，當(dāng)實(shí)驗(yàn)水溫分別達(dá)到15和20 ℃后，繼續(xù)在相應(yīng)溫度下適應(yīng) 5 d，以使魁蚶更好地調(diào)整其生理狀態(tài)。然后從各溫度組中隨機(jī)選取魁蚶 40 只，在對(duì)應(yīng)的適應(yīng)溫度下分別進(jìn)行 2、4、8、16和24 h 干露。干露結(jié)束后，取 20 只魁蚶在對(duì)應(yīng)的溫度條件下進(jìn)行呼代謝實(shí)驗(yàn)，余下的 20 只魁蚶進(jìn)行潛沙實(shí)驗(yàn)。在呼吸代謝實(shí)驗(yàn)中，利用 YSI 600 水質(zhì)分析儀連續(xù)監(jiān)測(cè)呼吸室內(nèi)海水溶解氧含量的變化，為降低在連續(xù)監(jiān)測(cè)過程中分組實(shí)驗(yàn)可能存在的環(huán)境差異的影響，保證監(jiān)測(cè)過程中魁蚶生理狀態(tài)的一致性，將干露后的 20 只魁蚶同時(shí)放入一個(gè)由錐形瓶改制的容量為5 L的呼吸室，將錐形瓶瓶口用石蠟密封后分別在 10、15和20 ℃恒溫水族箱內(nèi)水浴 4 h，最終得到不同時(shí)段內(nèi) 20只魁蚶的平均耗氧率；同時(shí)在 4 h 的呼吸代謝實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)，從呼吸瓶中抽取 50 mL 水樣，測(cè)定水樣中氨氮的含量。在潛沙實(shí)驗(yàn)中，為消除個(gè)體間的影響，分別將 3 個(gè)溫度環(huán)境中干露后的各 20 只魁蚶以 2 只為一組，放入 10 個(gè)底部敷有 10 cm 厚細(xì)沙的對(duì)應(yīng)溫度的水槽中，觀察 12 h 內(nèi)魁蚶的潛沙行為，記錄每只魁蚶潛沙開始和結(jié)束的時(shí)間，以及 12 h 后完成潛沙的魁蚶個(gè)數(shù)。在開展呼吸代謝和潛沙實(shí)驗(yàn)的同時(shí)，取各溫度組未經(jīng)干露的魁蚶 40 只作為對(duì)照組。

1.4 數(shù)據(jù)計(jì)算

1.4.1 失水率

式中：失水率α為干露時(shí)魁蚶的失水量占魁蚶初始濕重的比；W1為干露前魁蚶的濕重；W2為干露結(jié)束后魁蚶的重量。

1.4.2 耗氧率

式中：RO2為Δt時(shí)間內(nèi)魁蚶的耗氧率；ΔO2為Δt時(shí)間內(nèi)呼吸室水體中溶解氧的變化量；V為呼吸室的體積；W為進(jìn)行呼吸室內(nèi)魁蚶總的濕重。

1.4.3 排氨率

1.4.4 潛沙耗時(shí)與完成潛沙時(shí)間

t=t2-t1。

實(shí)驗(yàn)過程中，以魁蚶進(jìn)入水中落在沙表面為計(jì)時(shí)零點(diǎn)t0，記錄各個(gè)魁蚶的潛沙開始時(shí)間t1和潛沙結(jié)束時(shí)間t2。潛沙開始的標(biāo)志是魁蚶雙殼張開，腹足伸入沙中；潛沙結(jié)束的標(biāo)志是魁蚶殼的后緣完全沒入沙中。潛沙耗時(shí)t為魁蚶在潛沙過程中花費(fèi)的時(shí)間，代表魁蚶潛沙時(shí)的速度；完成潛沙時(shí)間即從魁蚶入水至潛沙結(jié)束的時(shí)間t2。

1.4.5 潛沙率

潛沙實(shí)驗(yàn)持續(xù) 12 h 后，記錄完成潛沙的魁蚶個(gè)數(shù)，計(jì)算各處理組魁蚶的潛沙率。

1.5 數(shù)據(jù)分析

采用 SPSS 17.0 軟件處理數(shù)據(jù)。其中實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組間，以及實(shí)驗(yàn)組之間采用單因素方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，P<0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同干露條件下魁蚶的失水率

在 10～15 ℃條件下，隨干露時(shí)長(zhǎng)的增加，魁蚶的失水率呈顯著增加趨勢(shì)。干露 24 h 后魁蚶的失水率均顯著高于干露 2、4 和 8 h 組。而在 20℃條件下，只有干露 8 和 24 h 后魁蚶的失水率顯著高于 2 h 組，其它各組之間失水率差異不顯著。除 24 h 組之外，2、4、8和16 h 干露組均為溫度 15℃時(shí)魁蚶的失水率最高。16和24 h 干露組，20℃條件下魁蚶的失水率最低(見圖 1)。

(圖中大寫字母表示相同干露時(shí)長(zhǎng)下不同溫度組的組間差異(P<0.05)，圖中小寫字母表示相同干露溫度下不同干露時(shí)長(zhǎng)組的組間差異(P<0.05)。The different capital letters denote significant differences between the groups exposed to the same interval, but the different temperatures. The different lowercase letters denote significant differences between the groups exposed to the same temperature, but the different intervals.)

圖1 不同溫度和干露時(shí)長(zhǎng)下魁蚶的失水率
Fig.1 The water lost rate ofAnadarabroughtoniiduring exposure to air under different temperature and time interval

2.2 不同干露條件下魁蚶再次入水后的潛沙率

12 h 潛沙實(shí)驗(yàn)后，各組都觀察到了未能完成潛沙的個(gè)體。未能完成潛沙的魁蚶分為2類：一類魁蚶只是雙殼開啟，未見腹足伸出等潛沙行為；另一類魁蚶腹足開始掘沙，但是貝殼只有部分埋入沙中。10 ℃組和 15 ℃組隨干露時(shí)長(zhǎng)的增加，12 h 內(nèi)完成潛沙行為的魁蚶個(gè)體數(shù)呈下降趨勢(shì)；20 ℃組在 12 h 內(nèi)完成潛沙行為的個(gè)體數(shù)呈先減少后緩慢增多的趨勢(shì)。對(duì)照組以及 2 h干露組在 10 ℃條件下的潛沙率最高，而當(dāng)干露時(shí)長(zhǎng)達(dá)到 8和 16 h 時(shí)， 20 ℃組的潛沙率最高。干露 24 h 后，15 ℃組的潛沙率高于 10 ℃組，而 20 ℃組在 12 h 內(nèi)未出現(xiàn)潛沙個(gè)體(見圖2)。

2.3 不同干露條件下魁蚶再次入水后的潛沙耗時(shí)

隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加，各溫度組魁蚶的潛沙耗時(shí)呈現(xiàn)增加趨勢(shì)，但組間差異不顯著。在 10 ℃ 條件下，魁蚶潛沙耗時(shí)的中位數(shù)隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)，各干露組的潛沙時(shí)間顯著高于對(duì)照組，且干露達(dá)到 16 h 后，潛沙耗時(shí)達(dá)到最大值。15 ℃ 條件下干露 24 h的魁蚶潛沙耗時(shí)最長(zhǎng)，且顯著高于對(duì)照組和 2 h 干露組的魁蚶。超過 4 h 的干露后，20 ℃ 條件下干露 8和 16 h 的魁蚶潛沙耗時(shí)顯著高于對(duì)照組，且在 24 h 干露后幼貝活力大幅下降，12 h 內(nèi)無(wú)潛沙個(gè)體出現(xiàn)(見圖3)。

圖2 不同溫度和干露時(shí)長(zhǎng)下魁蚶的潛沙率Fig.2 The burrowing rate of Anadara broughtonii after exposure to air under different temperature and time interval

(盒子由第一四分位數(shù)(25 %)、中位數(shù)和第三四分位數(shù)(75 %)組成，線的兩端分別代表最大值和最小值。圖中小寫字母表示相同干露溫度下不同干露時(shí)長(zhǎng)組的組間差異(P<0.05)。The different lowercase letters denote significant differences between the groups exposed to the same temperature, but the different intervals.)

圖3 不同溫度和干露時(shí)長(zhǎng)下魁蚶潛沙耗時(shí)的箱線圖
Fig.3 The box plots of the burrowing time ofAnadarabroughtoniiafter exposure to air under different temperature and time interval

2.4 12 h 內(nèi)魁蚶完成潛沙時(shí)間與干露的關(guān)系

在潛沙實(shí)驗(yàn)中觀察到各干露組的魁蚶再次入水后并未在短時(shí)間內(nèi)開始潛沙，不同個(gè)體完成潛沙的時(shí)間差異較大。在同一溫度條件下，隨著干露時(shí)長(zhǎng)逐漸增加，干露后 12 h 內(nèi)具有潛沙行為的個(gè)體逐步減少。當(dāng)干露溫度較低時(shí)，具有潛沙行為的個(gè)體能夠在較短時(shí)間內(nèi)完成潛沙。例如： 10 ℃條件下，各干露組魁蚶在 12 h 內(nèi)完成潛沙的時(shí)間較為集中，絕大部分在入水后前 3 h 內(nèi)完成潛沙。而在 15 和 20 ℃ 時(shí)，各干露組魁蚶在 12 h 內(nèi)完成潛沙的時(shí)間較為分散。隨著干露溫度的升高，入水后的恢復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)，開始潛沙的時(shí)間滯后，導(dǎo)致完成潛沙時(shí)間呈現(xiàn)增加趨勢(shì)。在3個(gè)溫度條件下，魁蚶完成潛沙時(shí)間的中位數(shù)隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加也呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢(shì)(見圖4)。

(盒子由第一四分位數(shù)(25 %)、中位數(shù)和第三四分位數(shù)(75 %)組成，線的兩端分別代表最大值和最小值。圖中小寫字母表示相同干露溫度下不同干露時(shí)長(zhǎng)組的組間差異(P<0.05)。The different lowercase letters denote significant differences between the groups exposed to the same temperature, but the different intervals.)

圖4 不同溫度和干露時(shí)長(zhǎng)下魁蚶完成潛沙的箱線圖
Fig.4 The box plots of the time ofAnadarabroughtoniiburrowed into sand after exposure to air under different temperature and time interval

2.5 不同干露條件下魁蚶再次入水后的排氨率

2.6 不同干露條件下魁蚶再次入水后的耗氧率

通過計(jì)算魁蚶經(jīng)過干露再次入水后每 0.5 h 內(nèi)的平均耗氧率，得出魁蚶再次入水后4 h 內(nèi)耗氧率的變化趨勢(shì)(見圖 6)。對(duì)照組的耗氧率在各溫度條件下的波動(dòng)均最小。在 10、15和 20 ℃條件下，對(duì)照組耗氧率的變化范圍分別為 3.15～6.77、5.50～14.27、5.52～10.31 μg/(g·h)。除 15和 20 ℃下干露 2 h 組，其它各處理組魁蚶在入水后 0.5 h 內(nèi)的耗氧率均未超出對(duì)照組水平，但隨后耗氧率呈現(xiàn)較大的起伏變化。當(dāng)干露溫度為 10 ℃時(shí)，魁蚶再次入水后耗氧率的最大峰值出現(xiàn)在 24 h 干露組，為 17.33 μg/(g·h)；在 4 h 的恢復(fù)過程中，耗氧率的變幅范圍為 0.36～17.33 μg/(g·h)；干露溫度為 15 ℃時(shí)，耗氧率最大峰值出現(xiàn)在 2 h 干露組，為 25.01 μg/(g·h)，耗氧率的變幅范圍為 0～25.01 μg/(g·h)；干露溫度為 20℃時(shí)，耗氧率最大峰值也出現(xiàn)在 2 h 干露組，為 33.52 μg/(g·h)，耗氧率的變幅范圍在 1.02～33.52 μg/(g·h)。由此可見，隨干露溫度的升高，相同干露時(shí)長(zhǎng)下，魁蚶再次入水后耗氧率的峰值升高，耗氧率的波動(dòng)幅度更加劇烈。

圖5 干露后魁蚶的排氨率Fig.5 The ammonia excretion rate of Anadara broughtonii after exposure to air

3 討論

研究發(fā)現(xiàn)，隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加，魁蚶幼貝失水率增加。但在 20 ℃條件下，隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加，平均失水率在干露超過 8 h 后不再增加。這可能與實(shí)驗(yàn)中觀察到干露時(shí)魁蚶的開殼行為有關(guān)，魁蚶在干露后先開殼，經(jīng)過一段時(shí)間后雙殼又逐漸緊閉?？赡苁菫榱朔乐贵w內(nèi)水分的進(jìn)一步散失。Seaman[34]在對(duì)牡蠣 (Crassostreagigas) 進(jìn)行活體保存時(shí)發(fā)現(xiàn)，通過對(duì)處于干露中的牡蠣不間斷噴淋海水，在 20 周后牡蠣成體和稚貝的存活率分別為 52% 和 80%。說明貝類在開殼獲取氧氣進(jìn)行呼吸的同時(shí)，體內(nèi)水分的保持也是其存活的重要條件。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在 10 ℃條件下干露 2 h 后魁蚶的失水率最低，且與該溫度條件下干露 4 和 8 h 后的失水率無(wú)顯著差異。分析認(rèn)為, 10 ℃時(shí)由于溫度較低，外套腔內(nèi)水分散失速度較慢。15 ℃條件下，各干露組魁蚶的平均失水率均高于 20 ℃。推測(cè)20 ℃條件下，魁蚶受高溫脅迫較強(qiáng)，干露時(shí)的閉殼時(shí)間較長(zhǎng)，從而阻止了水分的散失。

圖6 不同溫度和干露時(shí)長(zhǎng)下魁蚶再入水后的耗氧率Fig.6 Rates of oxygen consumption by Anadara broughtonii after exposure to air at different temperatures

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，干露后魁蚶幼貝的潛沙能力隨干露時(shí)長(zhǎng)的增加而逐漸減弱，具體表現(xiàn)在完成潛沙的個(gè)體數(shù)量減少和完成潛沙的速度減慢，如 10 ℃條件下，干露 16 h的魁蚶潛沙耗時(shí)較之前組明顯升高。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，魁蚶幼貝的潛沙能力隨著干露溫度的升高呈減弱趨勢(shì)，具體表現(xiàn)在 10 ℃條件下干露的魁蚶再次入水后完成潛沙更迅速，主要集中在前 3 h 內(nèi)完成潛沙，而 15和20 ℃ 干露組的魁蚶再次入水后完成潛沙過程費(fèi)時(shí)更長(zhǎng)。分析認(rèn)為，隨干露時(shí)長(zhǎng)的增加厭氧代謝產(chǎn)物在貝類體內(nèi)累積，導(dǎo)致其生理活性降低[25,28,35]；同時(shí)，高溫使貝類代謝水平升高，厭氧代謝產(chǎn)物的積累量也隨之增加，從而使再次入水后的恢復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)。Marsden等[27]發(fā)現(xiàn)，新西蘭貽貝 (Pernacanaliculus) 干露時(shí)的溫度越高，有氧代謝降低的幅度越大。本實(shí)驗(yàn)觀察到，10 ℃條件下，魁蚶幼貝干露后的潛沙行為恢復(fù)較快，有利于再次入水后躲避敵害生物的捕食[36]。但 20 ℃ 時(shí)，干露 8 和 16 h 魁蚶幼貝的潛沙率較其它 2 個(gè)溫度組高，推測(cè)是高溫干露時(shí)的閉殼阻止了幼貝水分的喪失，減少了干露對(duì)其活力的影響；但閉殼能夠提供的保護(hù)作用有限，20 ℃ 時(shí)干露 24 h 后，幼貝基本失去了潛沙能力，再次入水后 12 h 觀察期內(nèi)未出現(xiàn)完成潛沙的個(gè)體。實(shí)驗(yàn)還觀察到，魁蚶完成潛沙時(shí)間的中位數(shù)隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，分析是由于幼貝個(gè)體差異所致。一些體質(zhì)較弱的個(gè)體在較短時(shí)間干露后可以完成潛沙，但耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng)；而隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加體質(zhì)較弱的個(gè)體再次入水后無(wú)法完成潛沙行為，而體質(zhì)健壯的個(gè)體仍能夠在較短時(shí)間內(nèi)完成潛沙。因完成潛沙時(shí)間的計(jì)算只統(tǒng)計(jì)了成功潛沙的魁蚶個(gè)體，從而導(dǎo)致隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增長(zhǎng)，幼貝完成潛沙時(shí)間先升后降。

通過檢測(cè)干露魁蚶再次入水后的耗氧率和排氨率，發(fā)現(xiàn)干露給其帶來了顯著的氧債和氨氮積累。表現(xiàn)為魁蚶幼貝在恢復(fù)期的耗氧率和氨氮排泄率顯著高于對(duì)照組水平。貝類的呼吸代謝水平在一定范圍內(nèi)隨溫度的上升而升高[37-38]。本實(shí)驗(yàn)中，隨干露溫度的升高，相同干露時(shí)長(zhǎng)下，魁蚶再次入水后耗氧率的峰值升高，耗氧率的波動(dòng)幅度更加劇烈。然而各處理組耗氧率的峰值大小和出現(xiàn)時(shí)間并無(wú)明顯規(guī)律。Widdows 等也發(fā)現(xiàn)干露后的氧債與干露時(shí)產(chǎn)生的厭氧代謝產(chǎn)物并非完全對(duì)應(yīng)。各處理組魁蚶的耗氧率在 4 h 觀察期內(nèi)并未恢復(fù)到對(duì)照組水平。然而大西洋棱紋貽貝 (Geukensiademissa) 在遭受 3和 12 h 的干露后，其耗氧率可以分別在 30 min 和 2 h 后恢復(fù)正常[28]。分析認(rèn)為，一些生長(zhǎng)于潮間帶的貝類由于漲落潮變化，會(huì)使其周期性的暴露于空氣中，已經(jīng)較好的適應(yīng)了干露過程[39]，并能夠在干露后迅速恢復(fù)[40]。而魁蚶主要分布于潮下帶和淺海[41]，應(yīng)對(duì)干露的能力較弱，干露時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)給魁蚶再次入水后的呼吸代謝、潛沙行為等帶來較大影響。

研究結(jié)果表明，失水率、潛沙率、潛沙耗時(shí)、12 h 內(nèi)完成潛沙的時(shí)間以及排氨率等指標(biāo)與干露的溫度和時(shí)長(zhǎng)顯著相關(guān)。隨著干露時(shí)長(zhǎng)的增加，魁蚶的失水率增加，能夠完成潛沙的個(gè)體比例降低，個(gè)體潛沙花費(fèi)的時(shí)間增長(zhǎng)，氧債和氨氮積累增加。10 ℃條件下干露組的魁蚶較其它2個(gè)溫度組具有更好的活力，干露時(shí)長(zhǎng)達(dá)到 16 h 后，個(gè)體完成潛沙的耗時(shí)有明顯增加、完成潛沙的個(gè)體數(shù)減少。因此，在魁蚶苗種運(yùn)輸過程中，需要在保持運(yùn)輸環(huán)境濕潤(rùn)的前提下盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，以 2 h 最佳，不宜超過 8 h。在運(yùn)輸過程中適當(dāng)?shù)慕禍赜欣隍烂缭诜帕骱蟮幕謴?fù)，如放流海域溫度較高時(shí)，蚶苗在放流前需要一定的溫度馴化過程。

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責(zé)任編輯 朱寶象

Effects of Air Exposure Duration and Temperature on Burrowing Behavior and Respiratory Metabolism of Juvenile Anadara broughtonii

LIU Xu-Xu, ZHANG Xiu-Mei, QIN Le-Zheng, LI Wen-Tao

(College of Fisheries, Ocean University of China, Qingdao 266003, China)

In order to optimize the juvenileAnadarabroughtoniitransportation, and improve the survival of juvenile clams after bottom sowing, the influences of air exposure on the burrowing behavior and respiratory metabolism of juvenileA.broughtoniiat different temperatures and time intervals were examined. The juvenile clams were exposed to air for 2 h, 4 h, 8 h, 12 h and 24 h at 10 ℃, 15 ℃ and 20 ℃, respectively. The results showed that at the same exposure duration, water loss rate ofA.broughtoniiwas the highest at 15 ℃. Burrowing ability of the juvenile clams such as the proportion of burrowing clams and burrowing speed decreased with both air exposure duration and temperature increase. At 10 ℃, the burrowing ability of juvenile clams recovered rapidly after re-immersed in water. While at 20 ℃, after a 24 h air exposure, no clam completed burrowing, showing the loss of burrowing ability. During the air exposure, an oxygen debt and accumulation of ammonia excretion were observed. The oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of the juveniles in all treatment groups were significantly higher than those of the control group when re-immersed in water. At the same air exposure duration, the peak oxygen consumption rate significantly increased with temperature with more intense fluctuations and longer time to recover to control levels after re-immersed. We concluded that juvenileA.broughtoniiis susceptible to air exposure. In the process of transportation, the temperature 10 ℃ is better than 15 ℃ and 20 ℃, and the transportation duration should be less than 8 hours.

Anadarabroughtonii; air exposure; temperature; burrowing behavior； juvenile; respratory metabolism; time intervals

海洋公益性行業(yè)科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目( 201305043；201405010)資助 Supported by National Marine Public Welfare Research Project ( 201305043； 201405010 )

2016-05-12 ；

2016-07-20

劉旭緒(1989-)，男，博士生，研究方向：主要從事資源增殖學(xué)研究。E-mail: why-lxx@163.com

** 通訊作者：E-mail: gaozhang@ouc.edu.cn

S917.4

A

1672-5174(2017)03-019-08

10.16441/j.cnki.hdxb.20160219

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