聚合酶鏈反應(yīng)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用和進(jìn)展

朱恒燕

（中國(guó)解放軍第八十八醫(yī)院，山東 泰安 271000）

聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域新興的一種檢測(cè)技術(shù)，通過(guò)體外DNA模擬技術(shù)來(lái)模擬體內(nèi)DNA，實(shí)現(xiàn)對(duì)相應(yīng)DNA的復(fù)制，經(jīng)過(guò)變性、延伸及多次循環(huán)后，可較大倍數(shù)的增加DNA片段數(shù)量，對(duì)截取的DNA作相應(yīng)的技術(shù)檢測(cè)，大體包括：多態(tài)檢測(cè)、基因重組分析及其序列檢測(cè)等方面，是對(duì)DNA分子進(jìn)行檢測(cè)的最為有效的方法之一，此種方式較為敏捷、迅速、可靠性大。但是傳統(tǒng)的PCR技術(shù)也時(shí)常出現(xiàn)一些問(wèn)題，例如：出現(xiàn)少許非擴(kuò)增性異物、引物聚體等，若是常規(guī)的PCR技術(shù)還會(huì)出現(xiàn)浪費(fèi)成本的情況，在技術(shù)感染的部分容易發(fā)生感染的情形，致使檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差[1]。為了改善PCR技術(shù)，專家學(xué)者一直在不斷探索，在原有技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，已經(jīng)探究出多種PCR技術(shù)檢驗(yàn)?zāi)Ｊ?，定量PCR、熒光檢測(cè)PCR及實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR層出不窮，PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域正在不斷拓展，在遺傳學(xué)檢驗(yàn)、生物學(xué)檢驗(yàn)及基因檢測(cè)方面都具有極大的應(yīng)用價(jià)值。

1 PCR在寄生蟲(chóng)檢驗(yàn)中的應(yīng)用和進(jìn)展

瘧原蟲(chóng)是引起瘧疾的一種重要病原體，若發(fā)生瘧疾將會(huì)產(chǎn)生顫抖、發(fā)熱、大量出汗等癥狀，傳統(tǒng)的檢測(cè)方式是通過(guò)涂抹薄血片來(lái)進(jìn)行定量檢驗(yàn)，這種方式將會(huì)耗費(fèi)大量的人力物力，并且檢驗(yàn)的結(jié)果容易出現(xiàn)偏差，因此，此種檢驗(yàn)方式并未得到廣泛應(yīng)用。隨著專家學(xué)者的不斷探索，發(fā)現(xiàn)了一種對(duì)惡性瘧原蟲(chóng)檢驗(yàn)的方法，通過(guò)PCR可以進(jìn)行檢測(cè)，并且這種方式快速、簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確率較高，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其應(yīng)用價(jià)值極高，適合廣泛的推廣應(yīng)用[2]。一些專家選取樣本進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)PCR技術(shù)的敏感度、準(zhǔn)確度比傳統(tǒng)檢驗(yàn)技術(shù)高出多倍。

若人們不甚食入了帶有華支睪吸蟲(chóng)囊蚴的海鮮，將會(huì)引發(fā)華支睪吸蟲(chóng)病的發(fā)生，傳統(tǒng)方式進(jìn)行檢測(cè)此種疾病時(shí)，經(jīng)常會(huì)發(fā)生誤診的情況，因?yàn)檫@種寄生蟲(chóng)的體積較小，不易檢驗(yàn)。許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)此種疾病的檢驗(yàn)方式進(jìn)行多次探討，發(fā)現(xiàn)這種寄生蟲(chóng)的抗原位置較為復(fù)雜，不同于常規(guī)的寄生蟲(chóng)，容易發(fā)生交叉變異的情況，因此，要積極地尋找靈敏度較強(qiáng)的檢測(cè)方法。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的探索，專家發(fā)現(xiàn)熒光PCR技術(shù)能夠檢測(cè)此種寄生蟲(chóng)的位置，能夠有效提高檢測(cè)此種疾病的準(zhǔn)確率。

2 PCR技術(shù)在病毒檢驗(yàn)中的應(yīng)用和進(jìn)展

乙腦病毒是較為常見(jiàn)的病毒之一，經(jīng)常是由于蚊蟲(chóng)的叮咬，而迅速滲入人體，進(jìn)而引發(fā)乙型腦膜炎的發(fā)生。通常利用ELISA技術(shù)來(lái)檢測(cè)此種病毒，并且檢驗(yàn)效果較高，但是一些患者，產(chǎn)生IgM特異性的時(shí)間較晚，對(duì)此種檢驗(yàn)方法產(chǎn)生排斥現(xiàn)象，故血清檢測(cè)仍有較大的片面性，并非適合所有的患者。一些患者提取樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)通過(guò)RTPCR技術(shù)在12小時(shí)內(nèi)就可以完成對(duì)此種病毒的檢測(cè)，并且檢驗(yàn)的方法較為簡(jiǎn)單，節(jié)省時(shí)間，與此同時(shí)，這種檢驗(yàn)方式的準(zhǔn)確性較高、可靠性較強(qiáng)，適合乙腦病毒的檢驗(yàn)，目前，PCR技術(shù)已在此種領(lǐng)域進(jìn)行廣泛應(yīng)用，通過(guò)熒光PCR技術(shù)的動(dòng)態(tài)檢測(cè)，更能夠準(zhǔn)確定位核酸體外的位置，應(yīng)用前景極為廣泛[3]。

在實(shí)驗(yàn)探究時(shí)，經(jīng)常采用ELISA技術(shù)來(lái)檢測(cè)乙肝病毒，但是這種傳統(tǒng)的檢測(cè)方法準(zhǔn)確率較低，經(jīng)常出現(xiàn)假陽(yáng)性的特征，致使檢驗(yàn)出現(xiàn)錯(cuò)誤，影響專家學(xué)者的判斷。然而新興的FQ-PCR技術(shù)能夠彌補(bǔ)ELISA技術(shù)的不足，檢驗(yàn)的靈敏度極高，檢驗(yàn)的環(huán)節(jié)較少，成本較低，方法并不復(fù)雜，深受專家學(xué)者的青睞，值得廣泛應(yīng)用。

3 PCR技術(shù)在細(xì)菌檢驗(yàn)中的應(yīng)用和進(jìn)展

細(xì)菌的種類較多，引發(fā)的傳染病種類也較多。腸道若感染了霍亂弧菌將會(huì)引發(fā)腸道感染病，會(huì)使患者出現(xiàn)較為強(qiáng)烈的反應(yīng)，例如：嘔吐、脫水甚至死亡，應(yīng)引起人們的注意。傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方式包括血清檢測(cè)、動(dòng)物細(xì)菌培養(yǎng)、分離等，隨著長(zhǎng)時(shí)間的探索，對(duì)霍亂弧菌有了更為廣泛的認(rèn)識(shí)，發(fā)現(xiàn)可以采用分子生物的方式進(jìn)行檢測(cè)，專家通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了一種新興的PCR技術(shù)，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)的準(zhǔn)確性較高、靈敏度較大，并且比傳統(tǒng)技術(shù)更易操作，在臨床醫(yī)學(xué)上值得廣泛應(yīng)用[4]。

實(shí)驗(yàn)室通常是應(yīng)用常規(guī)的微生物檢測(cè)方式來(lái)檢測(cè)結(jié)核桿菌，需要培養(yǎng)此種細(xì)菌，等待其分裂再進(jìn)行測(cè)定，耗費(fèi)的時(shí)間較長(zhǎng)，若想要快速檢測(cè)，此種方式并不合適。若應(yīng)用PCR技術(shù)則能彌補(bǔ)這個(gè)劣勢(shì)，使用此種方式，DNA能夠在體外進(jìn)行自動(dòng)排序，5小時(shí)之內(nèi)就能完成對(duì)結(jié)核桿菌的檢測(cè)，PCR技術(shù)便捷、迅速，經(jīng)常運(yùn)用于臨床醫(yī)學(xué)的檢測(cè)。

[1] 鮑盛杰,李海雁.聚合酶鏈反應(yīng)檢驗(yàn)法在陰道炎患者陰道細(xì)菌檢查中的應(yīng)用價(jià)值[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué),2016(11):65-66.

[2] 許麗霞,黃劍芳,劉集鴻.細(xì)菌培養(yǎng)與聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)在細(xì)菌性痢疾檢測(cè)中的應(yīng)用分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床.2015(12):85-87.

[3] 龔弘局,金家貴,程 曦.聚合酶鏈反應(yīng)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用和進(jìn)展[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2015(11):88-91.

[4] 劉 智.聚合酶鏈反應(yīng)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用和進(jìn)展[J].生物技術(shù)世界.2016(04):55-57.