中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)在手足口病診治中的應(yīng)用

陳將南+許文芳+陶葉海+柳紅梅

手足口病是由多種人腸道病毒引起的一種兒童常見傳染病，傳染性強(qiáng)，常出現(xiàn)暴發(fā)或流行，重癥病例病情進(jìn)展迅速，可致死亡或留有后遺癥。Beckman Coulter GEN.S五分類血細(xì)胞分析儀可在規(guī)定時(shí)間內(nèi)分析8 000多個(gè)白細(xì)胞VCS參數(shù)，對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類。其中，V代表細(xì)胞體積，采用電阻抗法測(cè)定細(xì)胞體積大??；C代表射頻傳導(dǎo)性，可測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)差異，了解細(xì)胞內(nèi)部核質(zhì)比例、胞內(nèi)密度和化學(xué)成分差異；S代表激光散射，可測(cè)得細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和細(xì)胞質(zhì)顆粒情況＼[1＼] 。中性粒細(xì)胞VCS參數(shù)是診斷急性細(xì)菌感染的重要指標(biāo)＼[2＼]，現(xiàn)對(duì)手足口病病例外周血中性粒細(xì)胞平均體積（MNV）、平均射頻傳導(dǎo)性（MNC）、平均激光散射（MNS）參數(shù)及各自的分布寬度（MNVSD、MNCSD、MNSSD）和淋巴細(xì)胞平均體積（MLV）、平均射頻傳導(dǎo)（MLC）、平均激光散射（MLS）參數(shù)及各自的分布寬度（MLVSD、MLCSD、MLSSD）進(jìn)行分析研究，為疾病診斷和治療提供參考。

1對(duì)象與方法

1.1對(duì)象

按入院先后，用隨機(jī)數(shù)字法隨機(jī)選取2013年3月1日至10月31日紹興市立醫(yī)院住院手足口病患兒159例，其中普通型131例，男82例，女49例，年齡0～7歲；重型28例，男17例，女11例。排除手足口病伴感染、血液病等患兒。診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《手足口病診療指南（2010年版）》＼[3＼]。健康對(duì)照者選取同時(shí)期健康體檢兒童45例，男25例，女20例，年齡1～7歲，均無明顯感染癥狀。

1.2儀器與試劑

采用Beckman Coulter GEN.S五分類血細(xì)胞分析儀檢測(cè)，試劑為原裝配套試劑，儀器每年定期參加衛(wèi)生部室間質(zhì)量控制評(píng)價(jià)，每天進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制評(píng)價(jià)，確保檢測(cè)時(shí)儀器狀態(tài)穩(wěn)定。

1.3方法

采用EDTAK2抗凝真空管采集全血2 mL，于2 h內(nèi)完成檢測(cè)。記錄每份標(biāo)本中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的VCS參數(shù)及各自的分布寬度。疾病分期界定為急性期：入院后發(fā)熱、皮疹等臨床癥狀明顯；恢復(fù)期：體溫降至正常，臨床癥狀消失。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料用x-±s表示，兩兩比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)果

急性期普通型和重型手足口病組與健康對(duì)照組MNV、MNVSD、MNC、MNS、MLV、MLVSD、MLC、MLCSD、MLS差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。普通型與重型手足口病組各參數(shù)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均>0.05）。

普通型和重型手足口病組急性期與恢復(fù)期MNV、MNVSD 、MNC、MLV、MLC參數(shù)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

恢復(fù)期普通型手足口病組MNV、MNVSD、MNC、MNS、MLV、MLVSD、MLC、MLS與健康對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；重型手足口病組MNVSD、MNC、MNS、MLVSD、MLC、MLS與健康對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表3。

3討論

手足口病由腸道病毒引起，常見病毒有柯薩奇A組16型（CoxA16）、腸道病毒71型（EV71）＼[4＼]。多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，尤其是3歲以下幼兒＼[5＼]?；颊吆碗[性感染者均為傳染源，主要通過消化道、呼吸道和密切接觸傳播，少數(shù)重癥病例（尤其是3歲以下者）表現(xiàn)病情進(jìn)展迅速，發(fā)病1～5 d出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫、循環(huán)障礙等，腦干腦炎最為兇險(xiǎn)，極少數(shù)病例病情危重，可致死亡，存活病例可留有后遺癥＼[6＼]。近年來，對(duì)于腸道病毒感染后機(jī)體體液免疫、細(xì)胞免疫功能異常改變的研究報(bào)道較多，而引起外周血中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)的變化報(bào)道較少。本研究對(duì)手足口病患兒全血采用五分類血細(xì)胞分析儀檢測(cè)得到的中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的VCS參數(shù)及分布寬度進(jìn)行分析。

本研究結(jié)果顯示，急性期普通型和重型手足口病患兒的MNV、MNVSD、MLV、MLVSD、MLCSD均高于健康者，說明患兒中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的體積和分布寬度均明顯變大，而MNC、MNS、MLC、MLS均低于健康者，說明細(xì)胞射頻傳導(dǎo)性和激光散射值均變小。當(dāng)病毒感染時(shí)，中性粒細(xì)胞發(fā)生炎性反應(yīng)以及病毒對(duì)中性粒細(xì)胞的毒性作用，使中性粒細(xì)胞發(fā)生空泡變性、退化、中毒顆粒增多等形態(tài)學(xué)的變化，中性粒細(xì)胞大小和分布寬度均變大。在病毒感染時(shí)，T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞等參與免疫應(yīng)答，患兒T淋巴細(xì)胞、T輔助細(xì)胞、T輔助細(xì)胞/抑制性T淋巴細(xì)胞均低于相應(yīng)年齡段正常參考值水平，并隨病程進(jìn)展有逐漸上升趨勢(shì)＼[7＼]，血中IgM升高，IgA和IgG均降低＼[8＼]。病毒感染使淋巴細(xì)胞增生并發(fā)生形態(tài)學(xué)上的變化，表現(xiàn)為胞體變大、胞質(zhì)增多、嗜堿性增加、母細(xì)胞化等＼[9＼]?；純毫馨图?xì)胞形態(tài)呈異型性改變，比例高達(dá)80.2%＼[10＼]，與儀器測(cè)得的MLV、MLC、MNS等變化均相符。無論是急性期還是恢復(fù)期，普通型和重型之間的VCS參數(shù)均無明顯差異，因此無法通過VCS參數(shù)來判斷疾病為普通型還是重型。隨著疾病的進(jìn)展，恢復(fù)期患兒MNV、MNVSD 、MNC、MLV、MLC小于急性期，而MNCSD、MLVSD、MLCSD、MLS、MLSSD與急性期比較無明顯變化；恢復(fù)期MNVSD、MLVSD參數(shù)仍比健康者高，MNC、MNS、MLC、MLS比健康者低；普通型手足口病患兒MNV、MLV在疾病恢復(fù)期均高于健康者，而重型手足口病患兒MNV、MLV在疾病恢復(fù)期已降至健康者水平。說明中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的體積大小和分布寬度隨著病情的恢復(fù)也逐漸恢復(fù)正常，而射頻傳導(dǎo)性并未隨著病情的恢復(fù)而恢復(fù)，表明雖然細(xì)胞體積大小在恢復(fù)，而細(xì)胞內(nèi)部的結(jié)構(gòu)、密度等仍在發(fā)生著病理性改變。

綜上所述，中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞體積參數(shù)（MNV、MLV）及其分布寬度（MNVSD、MLVSD）在手足口病急性期升高，并隨著疾病的發(fā)展，至恢復(fù)期逐漸下降或至正常，可以為疾病的早期診斷和病情轉(zhuǎn)歸判斷提供線索。而射頻傳導(dǎo)性和激光散射值參數(shù)（MNC、MNS、MLC、MLS）在手足口病急性期降低，并隨著疾病的發(fā)展，至恢復(fù)期繼續(xù)下降，說明中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的許多特性變化并沒有隨著病情的轉(zhuǎn)歸而恢復(fù)。本研究?jī)H基于醫(yī)院收住的手足口病患兒與健康組對(duì)照分析，對(duì)于中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞VCS參數(shù)在手足口病患兒總體中的變化以及與其他感染性疾病時(shí)變化的對(duì)照分析尚待進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：20150616）