短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)2型糖尿病患者外周血MCP-1和NF-κB表達(dá)的影響

楊明明，程霖，許冰，趙體靈

(菏澤市立醫(yī)院內(nèi)分泌科1、檢驗(yàn)科2，山東 菏澤274031)

短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)2型糖尿病患者外周血MCP-1和NF-κB表達(dá)的影響

楊明明1，程霖1，許冰1，趙體靈2

(菏澤市立醫(yī)院內(nèi)分泌科1、檢驗(yàn)科2，山東 菏澤274031)

目的 探討短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)2型糖尿病患者外周血單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)和核因子-κB(NF-κB)表達(dá)的影響。方法 選擇2015年8月至2016年6月在我院確診的86例2型糖尿病患者為研究對(duì)象，按照隨機(jī)數(shù)表法分為觀察組和對(duì)照組，每組43例，觀察組患者給予短期胰島素強(qiáng)化治療，對(duì)照組患者給予鹽酸二甲雙胍口服治療，2周后觀察患者的血糖達(dá)標(biāo)率和胰島β細(xì)胞功能指標(biāo)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)MCP-1和NF-κB表達(dá)。結(jié)果 治療兩周后，觀察組患者的空腹血糖、餐后血糖和餐后2 h血糖分別為(6.27±1.21)mmol/L、(9.17± 1.19)mmol/L、(7.07±1.12)mmol/L，均低于對(duì)照組的(7.41±1.13)mmol/L、(10.88±0.25)mmol/L、(9.91±0.16)mmol/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；觀察組患者的血糖達(dá)標(biāo)率為83.72%，明顯高于對(duì)照組的58.14%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.824，P=0.009)；觀察組患者的胰島素分泌指數(shù)(HOMA-β)為(41.37±3.43)，明顯高于對(duì)照組的（35.17±2.78），胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)為(3.26±0.86)，明顯低于對(duì)照組的(4.93±1.15)，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；觀察組患者的MCP-1和NF-κB分別為(62.28±7.76)ng/L、(6.47±1.96)ng/L，均明顯低于對(duì)照組的(78.67±10.44)ng/L、(9.78± 2.13)ng/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.01)。結(jié)論 短期胰島素強(qiáng)化治療可提高2型糖尿病患者的血糖達(dá)標(biāo)率，改善胰島β細(xì)胞功能，降低MCP-1和NF-κB表達(dá)。

胰島素強(qiáng)化治療；2型糖尿?。灰葝uβ細(xì)胞功能；單核細(xì)胞趨化蛋白-1；核因子-κB

隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展生活方式的改變以及老齡化進(jìn)程的加速，糖尿病的患患者數(shù)和患病率也逐年增加，是危害患者生命健康的慢性非傳染病之一[1]。2型糖尿病是一種自然免疫和慢性炎癥疾病，胰島素抵抗及胰島β細(xì)胞功能改變是其發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制，炎癥因子參與了2型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展[2-3]。臨床治療2型糖尿病主要以控制血糖和保護(hù)胰島細(xì)胞功能為目的。研究表明單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)和核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)在免疫和炎癥等慢性病過(guò)程中起重要的作用[4-5]。本研究通過(guò)觀察2型糖尿病血糖達(dá)標(biāo)率、胰島β功能、MCP-1和NF-κB的變化，探討短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)2型糖尿病患者的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2015年8月至2016年6月診治的86例2型糖尿病患者為研究對(duì)象。所有患者均符合糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)(2010年)[6]，且餐后血漿葡萄糖水平＞11.1 mmol/L，空腹血漿葡萄糖水平＞7.0 mmol/L，糖化血紅蛋白＞9.0%。排除標(biāo)準(zhǔn)：1型及其他特殊類型的糖尿??；心肝腎功能不全；血液病、惡性腫瘤、全身及免疫性疾?。患毙愿腥?、哺乳期或妊娠期患者；糖尿病酮癥酸中毒、糖尿病高滲狀態(tài)等糖尿病急性并發(fā)癥患者；已使用口服降糖藥物或胰島素患者。按照隨機(jī)數(shù)表法將86例患者分為觀察組和對(duì)照組，每組43例。兩組患者的性別、年齡、血糖、高血壓史等臨床資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比較性，見(jiàn)表1。本研究經(jīng)我院醫(yī)院倫理委員會(huì)審批并經(jīng)患者或家屬簽字同意。

1.2 治療方法 兩組患者在飲食控制以及運(yùn)動(dòng)療法的基礎(chǔ)上，對(duì)照組患者給予鹽酸二甲雙胍(格華止，規(guī)格0.5 g，中美上海施貴寶制藥有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20150623)口服治療，0.5 g/次，3次/d。觀察組患者給予短期胰島素(甘舒霖R，規(guī)格1 000 IU/10 mL，通化東寶藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20150519)強(qiáng)化治療，餐前及睡前皮下注射，每次0.5 μg/kg。監(jiān)測(cè)餐前0.5 h血糖、三餐后2 h血糖及睡前血糖，以防低血糖的發(fā)生。兩組患者治療兩周后進(jìn)行觀察。

1.3 觀察指標(biāo)與檢測(cè)方法 分別于治療前后觀察患者血糖達(dá)標(biāo)率、胰島β細(xì)胞功能、MCP-1和NF-κB表達(dá)情況。

1.3.1 血糖達(dá)標(biāo)率 空腹12 h后次日晨7:30～8:30取靜脈血，5 mL，25℃，3 000 r/min離心10 min，分離血清液。置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩２捎闷咸烟茄趸阜y(cè)定血糖，以空腹血糖＜7 mmol/L且餐后2 h血糖＜9 mmol/L為達(dá)標(biāo)，血糖達(dá)標(biāo)率(%)=血糖達(dá)標(biāo)患者/患者例數(shù)×100%。

表1 兩組患者的一般資料比較(±s)

表1 兩組患者的一般資料比較(±s)

組別觀察組(n=43)對(duì)照組(n=43) χ2/t值P值男/女(例) 26/17 28/15 0.199 0.655年齡(歲) 52.31±8.42 51.81±7.96 0.283 0.778空腹血糖(mmol/L) 9.41±1.67 9.67±1.58 0.742 0.46餐后血糖(mmol/L) 13.53±2.17 13.82±2.33 0.597 0.552高血壓史[例(%)] 13(30.23) 12(27.91) 0.056 0.812高血脂[例(%)] 14(32.56) 12(27.91) 0.221 0.639 BMI(kg/m2) 23.4±3.2 22.8±3.5 0.83 0.409

1.3.2 胰島β細(xì)胞功能 采用直接化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)胰島素，并計(jì)算胰島素分泌指數(shù)(insulin secretion index，HOMA-β)和胰島素抵抗指數(shù)(insulin resistance index，HOMA-IR)。HOMA-β(%)=20×胰島素水平(mIU/L)/[空腹血糖水平(mmol/L)-3.5)]，HOMA-IR=胰島素水平(mIU/L)×空腹血糖(mmol/L)/22.5。血糖＜3.9 mmol/L為低血糖。

1.3.3 MCP-1和NF-κB表達(dá) 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法檢測(cè)外周血單核細(xì)胞上MCP-1的表達(dá)，試劑盒均購(gòu)于南京建成生物科技有限公司，檢測(cè)儀器為美國(guó)BIO-RAD680型酶標(biāo)儀，并嚴(yán)格按說(shuō)明書操作。采用Western-blotting測(cè)定外周血NF-κB的表達(dá)，以β-actin為內(nèi)參照，光密度比值作為NF-κB相對(duì)表達(dá)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以例(%)表示，應(yīng)用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間或治療前后比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的血糖比較 治療前兩組患者的空腹血糖、餐后血糖和餐后2 h血糖比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療后兩組患者空腹血糖、餐后血糖和餐后2 h血糖均低于治療前，且觀察組患者的空腹血糖、餐后血糖和餐后2 h血糖均低于對(duì)照組，差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)表2。

2.2 兩組患者的血糖達(dá)標(biāo)率比較 治療后觀察組空腹血糖＜7 mmol/L者38例，餐后2 h血糖＜9 mmol/L者39例，空腹血糖＜7 mmol/L且餐后2 h血糖＜9 mmol/L者36例，對(duì)照組空腹血糖＜7 mmol/L者31例，餐后2 h血糖＜9 mmol/L者30例，空腹血糖＜7 mmol/L且餐后2 h血糖＜9 mmol/L者25例；觀察組患者的血糖達(dá)標(biāo)率為83.72%，顯著高于對(duì)照組的58.14%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.824，P=0.009)。

2.3 兩組患者的胰島β細(xì)胞功能比較 治療前兩組患者的HOMA-β和HOMA-IR比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療后兩組患者的HOMA-β高于治療前，HOMA-IR低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組患者HOMA-β明顯高于對(duì)照組，HOMA-IR顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)表3。

2.4 兩組患者的MCP-1和NF-κB比較 治療前兩組患者M(jìn)CP-1和NF-κB比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療后兩組患者的MCP-1和NF-κB均低于治療前，且觀察組患者的MCP-1和NF-κB明顯低于對(duì)照組，差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見(jiàn)表4。

表2 兩組患者的血糖比較（±s，mmol/L）

表2 兩組患者的血糖比較（±s，mmol/L）

注：與同組治療前比較，aP＜0.05。

組別觀察組(n=43)對(duì)照組(n=43) t值P值治療后7.07±1.12a9.91±0.16a16.461 0.000空腹血糖 餐后血糖 餐后2 h血糖治療前9.41±1.67 9.67±1.58 0.742 0.460治療后6.27±1.21a7.41±1.13a4.515 0.000治療前13.53±2.17 13.82±2.33 0.597 0.552治療后9.17±1.19a10.88±0.25a9.222 0.000治療前11.25±2.15 11.28±2.17 0.064 0.949

表3 兩組患者的胰島β細(xì)胞功能比較(±s)

表3 兩組患者的胰島β細(xì)胞功能比較(±s)

注：與同組治療前比較，aP＜0.05。

組別HOMA-βHOMA-IR觀察組(n=43)對(duì)照組(n=43) t值P值治療前21.14±2.71 20.86±2.82 -0.470 0.640治療后41.37±3.43a35.17±2.78a-9.357 0.000治療前44.32±10.62 45.12±10.84 0.346 0.730治療后33.26±6.02a37.89±6.84a3.332 0.001

表4 兩組患者的MCP-1和NF-κB比較(±s)

表4 兩組患者的MCP-1和NF-κB比較(±s)

注：與同組治療前比較，aP＜0.05。

組別MCP-1(ng/L)NF-κB(ng/L)治療前 治療后 治療后 治療前觀察組(n=43)對(duì)照組(n=43) t值P值95.37±22.17 94.84±22.29 -0.111 0.912 62.28±14.76a78.67±10.44a5.945 0.000 62.28±14.76a78.67±10.44a5.945 0.000 17.87±3.26 18.11±3.35 0.337 0.737

3 討論

2型糖尿病患者的胰島素生理效能降低，容易引起血糖升高，導(dǎo)致患者胰島β細(xì)胞不可逆損害[7]。對(duì)血糖有效控制，不僅可以預(yù)防和延緩糖尿病視網(wǎng)膜病變，而且還能夠降低神經(jīng)病變的并發(fā)率，常規(guī)臨床治療為階梯式治療方式，最終才會(huì)選擇胰島素進(jìn)行治療[8]。雖然2013版糖尿病診療指南推薦二甲雙弧為一線治療藥物，但是研究發(fā)現(xiàn)，短期胰島素強(qiáng)化治療可降低血糖毒性，加速胰島β細(xì)胞功能的快速恢復(fù)[9]。MCP-1為細(xì)胞趨化因子，屬于一種炎癥細(xì)胞因子，對(duì)單核細(xì)胞趨化蛋白具有特異性，可與NF-κB核因子DNA高度結(jié)合而激活基因轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。NF-κB具有調(diào)節(jié)炎癥轉(zhuǎn)錄因子的功能，正常狀態(tài)下，胞漿內(nèi)與NF-κB抑制蛋白結(jié)合呈非活化狀態(tài)，一旦被激活，可誘導(dǎo)TNF-α、IL-6、細(xì)胞粘附分子等，調(diào)控基因的表達(dá)，參與糖尿病發(fā)生和發(fā)展[10-11]。因此，本研究探討短期胰島素強(qiáng)化治療對(duì)2型糖尿病患者外周血單核細(xì)胞上單核細(xì)胞趨化蛋白-1和核因子-κB表達(dá)的影響，為臨床治療提供理論依據(jù)。

本研究發(fā)現(xiàn)，治療2周后，兩組患者空腹血糖、餐后血糖和餐后2 h血糖均降低，且觀察組患者低于對(duì)照組，觀察組患者的血糖達(dá)標(biāo)率為83.72%，顯著高于對(duì)照組的58.14%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明短期胰島素強(qiáng)化治療可降低患者血糖，提高血糖達(dá)標(biāo)率。HOMA-β反映了患者胰島β細(xì)胞改善程度，患者機(jī)體胰島素抵抗的水平用HOMA-IR反映。胰島素是最強(qiáng)、最持久的降糖藥物，可有效地控制血糖水平，提高胰島素的敏感性，快速消除高血糖毒性，減輕患者胰島β細(xì)胞“負(fù)擔(dān)”，干擾甚至消除“高血糖-β細(xì)胞分泌-β細(xì)胞衰竭-高血糖”惡性循環(huán)，達(dá)到治療2型糖尿病的目的[12-13]。研究結(jié)果表明，治療后兩組患者的HOMA-β升高而HOMA-IR降低，且觀察組患者的HOMA-β顯著高于對(duì)照組，而HOMA-IR明顯低于對(duì)照組。說(shuō)明短期胰島素強(qiáng)化可改善2型糖尿病患者胰島β細(xì)胞功能[14]。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，治療后兩組患者的MCP-1和NF-κB均降低，觀察組患者的MCP-1和NF-κB明顯低于對(duì)照組，說(shuō)明短期胰島素強(qiáng)化治療可減輕2型糖尿病患者炎癥反應(yīng)。胰島素可以抑制炎癥因子的產(chǎn)生和釋放，對(duì)2型糖尿病的炎癥反應(yīng)具有抑制作用，可減輕糖尿病患者體內(nèi)增強(qiáng)的氧化應(yīng)激，胰島素強(qiáng)化治療可降低血hsCRP、MCP-1等炎癥因子水平，降低促炎癥因子及依賴促炎癥因子的NF-κB激活，上調(diào)MCP-1表達(dá)[15]。

綜上所述，短期胰島素強(qiáng)化治療2型糖尿病患者，可降低空腹血糖、餐后血糖和餐后2 h血糖水平，良好的控制血糖，提高HOMA-β指標(biāo)，降低HOMA-IR，有效改善胰島β細(xì)胞功能，降低外周血單核細(xì)胞MCP-1和N-κB表達(dá)，減輕體內(nèi)的炎癥反應(yīng)。

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Effects of short-term intensive insulin therapy on expression of MCP-1 and NF-κB in peripheral blood frompatients with type 2 diabetes.

YANG Ming-ming1,CHENG Lin1,XU Bing1,ZHAO Ti-ling2.Department of Endocrinology1,Department of Clinical Laboratory2,Heze Municipal Hospital,Heze 274031,Shandong,CHINA

ObjectiveTo study the effects of short-term intensive insulin therapy on expression of monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1)and nuclear factor-κB(NF-κB)in peripheral blood from patients with type 2 diabet-ic.MethodsEighty-six patients with type 2 diabetes in our hospital from August 2015 to June 2016 were selected as the research subjects.They were divided into observation group and control group according to the random number table method,with 43 patients in each group.The observation group patients were given short-term intensive insulin treatment,and the control group patients were treated with metformin hydrochloride.After 2 weeks of treatment,the blood sugar compliance rate and index of beta cell function were observed,and the expression of MCP-1 and NF-κB were detected by flow cytometry.ResultsAfter 2 weeks of treatment,the fasting blood glucose(FBG),postprandial blood glucose(PBG)and 2-hour postprandial blood glucose in observation group were respectively(6.27±1.21)mmol/L,(9.17± 1.19)mmol/L,(7.07±1.12)mmol/L,which were significantly lower than those in control group of(7.41±1.13)mmol/L, (10.88±0.25)mmol/L,(9.91±0.16)mmol/L,and the differences were statistically significant(P＜0.01).The blood sugar compliance rate in observation group was 83.72%,which was significantly higher than 58.14%in control group,and the difference was statistically significant(c2=6.824,P=0.009).The insulin secretion index(HOMA-β)in observation group was(41.37±3.43),which was significantly higher than that in the control group of(35.17±2.78),and the insulin resistance index(HOMA-IR)was(3.26±0.86),which was significantly lower than that in control group of(4.93±1.15),P＜0.01.The levels of MCP-1 and NF-κB in the observation group were respectively(62.28±7.76)ng/L,(6.47±1.96)ng/L, which were significantly lower than(78.67±10.44)ng/L,(9.78±2.13)ng/L in the control group,and the differences were statistically significant(P≤0.01).ConclusionShort-term intensive insulin therapy can improve the blood glucose compliance rate and beta cell function,with reduced expression of MCP-1 and NF-κB.

Intensive insulin therapy;Type 2 diabetes;Pancreatic beta cell function;Monocyte chemoattractant protein-1(MCP-1);Nuclear factor-κB(NF-κB)

R587.1

A

1003—6350（2017）02—0242—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.02.024

2016-06-29)

楊明明。E-mail：pyyetr@163.com