電針對人膝骨關節(jié)炎關節(jié)液中TGF-β1表達的影響

熊林波 白 潔 劉 雙

（綿陽市中心醫(yī)院康復醫(yī)學科，四川綿陽 646000）

骨關節(jié)炎（Osteoarthritis，OA），曾被命名為肥大性骨節(jié)炎，萎縮性關節(jié)炎，骨關節(jié)病等，后隨著認識的加深又稱其為退化性關節(jié)炎[1]。引起OA的因素一般認為跟年齡，性別，遺傳，發(fā)育，代謝以及一些創(chuàng)傷有關。老年人群中發(fā)病較多，女性多于男性[2]。OA主要累及滑膜關節(jié)，臨床以膝關節(jié)OA多見。細胞因子作為生理活動的直接參與者和調控者自然成為了研究的熱點，轉化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）就是其中備受關注的細胞因子之一。本實驗通過對比治療前后關節(jié)液中TGF-β1濃度變化探討電針對膝關節(jié)OA的治療機制，結果如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

40名患者均來自本院康復針灸門診，其中男17例，女23例，年齡44～68歲，病程最短5個月，最長8年，平均3.2年。采用隨機數(shù)字表發(fā)分為對照組及電針治療組。

1.2 診斷標準

參照1995年美國風濕病協(xié)會骨關節(jié)炎診斷標準：（1）近1月大多數(shù)時間有膝關節(jié)疼痛；（2）X攝片有骨贅形成；（3）關節(jié)液檢查符合骨關節(jié)炎；（4）年齡≥38歲；（5）晨僵≤ 30 min；（6）有骨摩擦音。具備（1）（2）或（1）（3）（5）（6）或（1）（4）（5）（6）即可診斷為骨關節(jié)炎。

1.3 納入標準

符合上述骨關節(jié)炎診斷標準，患者最近3月內未進行過膝關節(jié)針灸治療及其他針對OA的對癥治療。

1.4 排除標準

（1）合并有感染或發(fā)熱的患者；（2）關節(jié)明顯畸形或出現(xiàn)關節(jié)強直的患者；（3）合并其他關節(jié)疾病或關節(jié)損傷的患者；（4）合并嚴重心腦血管疾病患者；（5）年齡＞70歲，病程＞10年；（6）不能耐受針灸及治療依從性差者；（7）精神異常者。

2 方法

2.1 關節(jié)液抽取

兩組患者均在入選后即抽取關節(jié)灌洗液。抽出的關節(jié)灌洗液分別注入EP管，編號對應，于-70℃冰凍保存待測。

2.2 電針治療

電針治療組取“梁丘”、“內膝眼”、“血海”、“犢鼻”、“阿是穴”進針后，連上電針儀，選擇4 Hz疏波，20 Hz密波，脈沖寬度0.5 ms，1次/d，每次20 min，連續(xù)治療10天。除此之外不行其他治療。對照組不行任何治療，僅作為療效對照。10 d治療后，再次行關節(jié)液沖洗液的抽取。

2.3 TGF-β1的檢測

本實驗采用雙抗夾心ABC-ELISA法檢測關節(jié)液中的TGF-β1濃度。具體實驗步驟按照試劑盒說明標準ELISA進行，檢測記錄吸光值（OD值）

2.4 計算結果

所有OD值減除去空白值后再計算結果。以標準品2 000、1 000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/mL 為橫 坐標，OD值為縱坐標，畫出標準曲線。再根據(jù)所測樣品的OD值在標準曲線上查出相應TGF-β1濃度。所得數(shù)據(jù)進行組間t檢驗。

2.5 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，用SPSS 17.0對治療前后兩組患者膝關節(jié)液中TGF-β1濃度數(shù)據(jù)進行t檢驗。

3 結果

對治療后兩組數(shù)據(jù)進行t檢驗差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），各組治療前后數(shù)據(jù)進行t檢驗分析，對照組治療前后TGF-β1含量差異無統(tǒng)計學意義（t=0.86，P＞0.05）。電針治療組治療前后TGF-β1含量差異有統(tǒng)計學意義（t=22.70，P＜ 0.05），見表1。

表 1 兩組患者膝關節(jié)液中TGF-β1濃度比較（x±s）

4 討論與結論

4.1 骨關節(jié)炎

OA是機械性和生物性因素相互作用，使關節(jié)軟骨細胞、細胞外基質和軟骨下骨合成與降解的正常進行失去平衡的結果，病理學上則主要表現(xiàn)為滑膜的炎癥，軟組織的纖維化，軟骨的侵蝕以及軟骨下骨硬化，骨贅形成等[3]。引起OA的因素太多，其中涉及到許多細胞類型，細胞外基質，細胞因子，信號通路，基因表達的改變，比如受體配體途徑：TGF-β1，WNT3a等；信號肽分子：轉化生長因子-β信號蛋白（Smads），β-catenin，HIF-2a等；酶類：基質金屬蛋白酶13（MMP13），ADAMTS4/5等[4]。有研究指出關節(jié)軟骨細胞是OA發(fā)病的主要細胞介質，這也是導致OA關節(jié)軟骨退化明顯而滑膜炎癥相對局限的主要原因[5]。

4.2 電針治療對膝關節(jié)OA的作用

從生理學上來看，電針通過低頻脈沖電流刺激穴位，使肌肉一收一縮，起到泵的作用，從而改善局部血液循環(huán)，有利于滲出液的吸收，有利于關節(jié)面軟骨的修復[6]。本實驗采用的是G9805-C型低頻電子脈沖治療儀，參數(shù)選擇4 Hz疏波，20 Hz密波，脈沖寬度0.5 ms，每天治療一次，每次20 min，總共治療10 d。這也是目前臨床電針治療各種疼痛性疾病常采用的方案之一。

4.3 TGF-β1表達的變化

TGF-β1是一種同源二聚體蛋白，分子量約為25 kD，有耐熱，抗酸，堿的特性。在OA關節(jié)中，滑膜的襯里細胞分泌的TGF-β1比其他部位要多[7]，在骨贅中，TGF-β1則過度表達[8]。在生理狀態(tài)下，TGF-β1的表達很少，在OA中TGF-β1則過度表達。造成TGF-β1過度表達的原因很多，一方面是軟骨損傷的生理需求增加，另一方面是OA中的一些炎性細胞因子能刺激TGF-β1過度表達。有實驗就證實IL-1β能通過激活與TGF-β1基因啟動子連接的AP-4，AP-1而使TGF-β1過度表達[9]。

本實驗在治療前對照組和電針組的TGF-β1表達無差異，治療后對照組TGF-β1的表達與治療前相比未出現(xiàn)明顯變化（P＞0.05）。電針組治療后，與本組治療前及對照組比較均有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），說明電針確實能降低膝OA關節(jié)液中TGF-β1的異常表達，達到了治療目的。

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