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    雙歧桿菌對12種中藥的發(fā)酵與抗菌活性檢測分析

    2017-03-04 18:56:49王惠蕓呂雄
    化工管理 2017年26期
    關(guān)鍵詞:菌液雙歧抗菌

    王惠蕓 呂雄

    (1浙江省天正設(shè)計工程有限公司,浙江杭州300012)

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    雙歧桿菌對12種中藥的發(fā)酵與抗菌活性檢測分析

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    主要總結(jié)了中藥在雙歧桿菌的作用之下抗菌活性發(fā)生的明顯變化,12種中藥包括連翹、淡豆豉、大黃、黃芩、當(dāng)歸、五味子、甘草、黨參、半夏、茯苓、赤芍、白芍。對于這12種中藥進行雙歧桿菌的發(fā)酵處理,使用相應(yīng)的管碟法進行活性檢測和分析。

    雙歧桿菌;12種中藥;發(fā)酵;抗菌活性;檢測分析

    中藥炮制中一個非常重要的方法也是比較常見的方法就是發(fā)酵法,發(fā)酵法主要促進微生物發(fā)揮自身的積極作用,改變被發(fā)酵的中藥的成分和藥性,從而達到提高中藥的藥性并且將副作用有效降低的效果。比較傳統(tǒng)的中藥具有自身的突出特點,主要通過口服用藥,并且為湯劑形式服用。人體吸收口服中藥促使這些中藥發(fā)揮作用,中藥的化學(xué)成分以及相關(guān)抗菌活性受到人體菌的代謝作用的影響較大。一般情況下,中藥通過消化道菌的作用進行轉(zhuǎn)化并且發(fā)揮自身作用,達到治療效果。本文選取了12種中藥基質(zhì),對抗菌的檢測效果進行相互之間的對比,從而了解雙歧桿菌12種中藥的發(fā)酵的抗菌活性的改變情況。

    1 實驗準(zhǔn)備階段

    在實驗的準(zhǔn)備階段,必須對實驗當(dāng)中所需要的儀器以及材料準(zhǔn)備充分。首先,從權(quán)威的中藥同濟堂選購12種中藥,包括連翹、淡豆豉、大黃、黃芩、當(dāng)歸、五味子、甘草、黨參、半夏、茯苓、赤芍、白芍。其次,從相關(guān)的保藏中心選購嬰兒雙歧桿菌,準(zhǔn)備充足的變形桿菌、黃色葡萄球菌以及大腸埃希菌等菌株,并且將這些菌株完好保存。最后,準(zhǔn)備相應(yīng)的試劑以及所需的培養(yǎng)基。

    2 具體的試驗方法以及實驗過程

    2.1 制作并且準(zhǔn)備中藥發(fā)酵液

    首先將12種中藥進行切片并且剪碎處理,分別取5克放到三角瓶中,隨后向瓶裝加入30毫升的自來水,將三角瓶處于121℃的環(huán)境當(dāng)中進行滅菌處理,處理30分鐘便可取出。冷卻之后,在12個三角瓶中分別加入100毫升雙歧桿菌培養(yǎng)液,隨后再加入0.5毫升的經(jīng)過24小時處理的雙歧桿菌菌液。一種中藥不加雙歧桿菌,另一種中藥加雙歧桿菌,對兩種進行對比。

    2.2 樣品的正確處理

    對于12種中藥進行發(fā)酵處理,并且10天以后進行對比,使用濾紙過濾液體,過濾之后的液體進行中藥的抗菌活性檢測。

    2.3 使用管碟法進行抑菌試驗

    第一,制作實驗當(dāng)中所需要的培養(yǎng)基,按照說明書取出42克瓊脂粉,并且在蒸餾水中進行溶解處理,高壓環(huán)境之下20分鐘滅菌處理。并且在合適的條件之下冷卻培養(yǎng)基,在無菌的器皿當(dāng)中注入培養(yǎng)基。這便可以成功地制作MH瓊脂平板培養(yǎng)基。關(guān)于MH肉湯培養(yǎng)基的制作,按照相關(guān)說明書取出21克的肉湯,在蒸餾水中進行溶解處理,隨后同以上方法進行試驗。

    第二,制作準(zhǔn)備菌液,在MH肉湯培養(yǎng)基當(dāng)中接種金黃色葡萄球菌以及大腸桿菌等菌株,處于37℃的環(huán)境當(dāng)中24個小時。再用正確的方法確定濃度情況,使用生理鹽水進行校正處理。

    第三,進行抑菌實驗,應(yīng)該采用管碟法進行實驗,將已經(jīng)準(zhǔn)備好的菌液進行稀釋處理,并將處理后的菌液放置到M H瓊脂平板的中心位置,進行均勻的涂抹。無菌操作條件之下,在培養(yǎng)基上放置牛津杯,并且使牛津杯和培養(yǎng)基之間沒有空隙,在向器皿當(dāng)中加入需要檢測的實驗樣品,用濾紙進行覆蓋處理,隨后進行觀察。實驗結(jié)果應(yīng)該取每次實驗結(jié)果的平均值,如果沒有抑菌圈生成就說明抑菌活性也是不存在的。如果抑菌圈比較小,說明抗菌活性比較弱。

    3 實驗的結(jié)果分析

    通過抑菌相關(guān)結(jié)果明確的表示,雙歧桿菌培養(yǎng)液對變形桿菌具有較弱的抗菌效果,12種中藥通過雙歧桿菌的發(fā)酵作用,使得抗菌活性發(fā)生不同程度的變化。連翹受到雙歧桿菌的改變比較明顯。其他中藥發(fā)酵前以及發(fā)酵之后對于細菌的抑制作用并沒有非常明顯的變化。

    4 結(jié)語

    通過實驗表明,傳統(tǒng)的中藥的給藥途徑多為口服,在中藥發(fā)揮自身作用之前必須停留在胃腸道當(dāng)中一段時間,在此期間中藥可能會與腸道菌發(fā)生作用,在整個過程當(dāng)中腸道菌可能會對中藥產(chǎn)生影響。實驗結(jié)果顯示,雙歧桿菌中藥都能夠在正常情況之下生長,這就說明中藥不會受到其他菌類的影響。中藥和雙歧桿菌共同作用之下,藥物活性會有明顯的提高,造成這種現(xiàn)象的原因為化學(xué)成分對于雙歧桿菌產(chǎn)生作用,也可能是雙歧桿菌抗菌活性產(chǎn)生作用。種種現(xiàn)象都明確的顯示,中藥會在微生物發(fā)酵作用之后產(chǎn)生明顯的變化,中藥所產(chǎn)生的這些變化都可以促進活性化合物的產(chǎn)生和選擇。因此,雙歧桿菌對于不同種類的中藥有著不同程度的發(fā)酵以及抗菌活性的影響。

    [1] 蔡玉華,胥振國.中草藥提取物對雞源雙歧桿菌體外發(fā)酵的影響研究[J].安徽科技學(xué)院學(xué)報,2015(1).

    [2] 舒玲,鄧勁,吳思穎,等.替加環(huán)素體外抗菌活性檢測方法的分析評價[J].華西醫(yī)學(xué),2016(10).

    [3] 趙軍.中藥材黃芩對幽門螺桿菌體外抗菌活性的作用分析[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2017(8).

    [4] 安曉華,薛邦祿,王波.玉米低聚糖對雙歧桿菌增殖與發(fā)酵的影響[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志,2016(3).

    [5] 王猛.香豬源性雙歧桿菌的耐氧馴化及高密度發(fā)酵的研究[D].貴州大學(xué),2016.

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