高效液相色譜分類及工作原理

張旦亞 楊吉興(浙江龍盛化工研究有限公司，浙江紹興312300)

高效液相色譜分類及工作原理

張旦亞 楊吉興(浙江龍盛化工研究有限公司，浙江紹興312300)

隨著我國(guó)科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，我國(guó)高效液相色譜也隨之得到了一定的發(fā)展。色譜法就是利用混合物中的各組分在流動(dòng)相與固定相中分配系數(shù)的不同，進(jìn)行連續(xù)反復(fù)多次的分配，從而形成差速運(yùn)動(dòng)，達(dá)到分離的效果。高效液相色譜法是一種新型的分離分析技術(shù)。文本主要介紹了高效液相色譜法的分類及工作原理。

高效液相色譜；分類；工作原理；分配色譜法

高效液相色譜法是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，通過高壓輸液系統(tǒng)，把不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。高效液相色譜已經(jīng)有將近三十的發(fā)展歷史，在色譜原理研究、儀器水平、離子分離分析方面有了很大的進(jìn)步。文本主要介紹了高效液相色譜分類及工作原理。

1 高效液相色譜概念界定及分類

1.1 高效液相色譜概念界定

高效液相色譜——高效液相色法，它是一種與經(jīng)典液相色譜完全不同的，一種基于儀器方法的高效能的分離方法。高效液相色譜十一局氣相色譜理論發(fā)展起來的新技術(shù)。它被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)藥物、環(huán)境保護(hù)、食品加工、農(nóng)業(yè)種植等方面。但是，由于高效液相色譜法是一種新型的高效能分離技術(shù)，在應(yīng)用上還不是很成熟，仍然處于發(fā)展階段。高效液相色譜的儀器配置包括：色譜泵及控制器、色譜柱、檢測(cè)器、進(jìn)樣器、數(shù)據(jù)處理及控制。它采用高壓輸液泵，高效微粒固定相和高靈敏度檢測(cè)器進(jìn)行分析。它的主要特點(diǎn)是：快速、高效、靈敏度強(qiáng)、樣品回收利用比較簡(jiǎn)單。

1.2 高效液相色譜分類

高效液相色譜主要分為以下幾類，第一類，液-液分配色譜法，在液-液分配色譜中，流動(dòng)相與固定相都是液體，它可以適用于所有保養(yǎng)品的分離分析；第二類，液-固吸附色譜，它把固體吸附劑作為固定相。液-固吸附色譜的本質(zhì)就是依據(jù)所測(cè)樣品在固定固定相上的吸附作用的不同進(jìn)行分離；第三類，離子交換色譜法，通過離子交換原理和液相色譜相結(jié)合對(duì)溶液中的陽離子和陰離子進(jìn)行測(cè)定；第四類，離子對(duì)色譜，它被廣泛應(yīng)用于強(qiáng)極性有機(jī)堿和有機(jī)酸的分離分析；第五類，離子色譜法；第六類，空間排阻色譜法，它主要適用于比較大的分子的分離。文本主要對(duì)幾種常見的常見高效液相色譜進(jìn)行全面分析介紹，常見的常見高效液相色譜有分配色譜法、吸附色譜法、離子交換色譜法和凝膠色譜法。

2 幾種比較常見的高效液相色譜工作原理

2.1 分配色譜法

分配色譜法是常見高效液相色譜種應(yīng)用最為廣泛的一種分離分析方法。它的工作原理是，通過兩種完全不相溶的液相，也就是使固定相與流動(dòng)相按照它們各自的溶解度進(jìn)行分配。分配色譜法又分為液-液色譜與鍵合相色譜。液-液色譜通過物理吸附的原理把液相固定相涂抹于所測(cè)物品表面。而鍵合相色譜則是根據(jù)化學(xué)反應(yīng)使有機(jī)分子鍵合在所測(cè)物品或者是硅膠表面上。在分配色譜中，需要依據(jù)溶質(zhì)、固定相和流動(dòng)相之間分子的分離作用力對(duì)流動(dòng)相和固定相進(jìn)行選擇。

2.2 吸附色譜法

吸附色譜法又叫液固色譜，顧名思義也就是把固體吸附劑作為固定相。這類固體吸附劑大部分都是一些孔比較多的固體顆粒物，由于這些固體顆粒物表面有很多小孔，所以便于吸附。吸附色譜的工作原理是依據(jù)所測(cè)物品在固定相上的作用不同進(jìn)行分離分析。一般會(huì)選用氧化鋁、聚酰胺、硅膠等具有吸附活性的化學(xué)物品作為固體吸附劑。吸附色譜的顯著特點(diǎn)就是操作簡(jiǎn)單，比較適用于分離一些溶解在非極性溶劑中并且具有中等相對(duì)分子質(zhì)量是非離子性的物品分離，比如幾何異構(gòu)體。

2.3 離子交換色譜法

離子交換色譜就是通過被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上的離子交換勢(shì)不相同導(dǎo)致組分分離。比較常見的離子交換劑有，纖維素、合成樹脂及硅膠。硅膠不但可以適用于分配色譜，還可以使用離子交換色譜。離子交換色譜工作原理是通過分離離子化合物、有機(jī)堿和有機(jī)酸等可以電離的化合物和離子基團(tuán)容易相互作用的化合物，進(jìn)行分離。

2.4 凝膠色譜法

凝膠色譜法還可以稱為尺寸排斥色譜，其工作原理是根據(jù)所測(cè)物品分子尺寸大小和形狀的不同進(jìn)行分離。凝膠色譜之所以又叫尺寸排斥色譜，是因?yàn)槟z空穴的大小是與所測(cè)物品被分離分子的大小大致相吻合的。如果分子太大就會(huì)被阻擋在空穴外面，被排斥在外面。而小分子就會(huì)進(jìn)入空穴。一般我們會(huì)選用瓊脂糖凝膠作為填充材料。同時(shí)，流動(dòng)相也有選擇功能，它可以根據(jù)載體和所測(cè)物品的本質(zhì)特點(diǎn)決定是選用水或者有機(jī)溶劑。除此之外，凝膠色譜的分辨力很高，一般情況下不會(huì)發(fā)生變性，所以一般會(huì)被用來分離分子量比較高的化合物。

3 結(jié)語

高效液相色譜雖然幾經(jīng)有了三十年的發(fā)展歷史，但是在發(fā)展的還不算完善，在一定程度上仍然存在一定的缺陷。本文詳細(xì)分析介紹了高效液相色譜的分類以及工作原理，希望可以加深人們對(duì)高效液相色譜的人是與理解，讓高效液相色譜更好的為人類服務(wù)。高效液相色譜的發(fā)展任重而道遠(yuǎn)，我們必須不斷的實(shí)踐，在實(shí)踐中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，不斷優(yōu)化改造高效液相色譜法。讓科學(xué)技術(shù)帶動(dòng)我國(guó)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展。所以，對(duì)高效液相色譜的分析與研究對(duì)我國(guó)各方面的發(fā)展都有積極的意義。

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