小兒消化性潰瘍幽門螺桿菌感染的相關危險因素分析

邱慧明 熊 斌

小兒消化性潰瘍幽門螺桿菌感染的相關危險因素分析

邱慧明 熊 斌

小兒消化性潰瘍；幽門螺桿菌；危險因素

幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）與消化性潰瘍、慢性胃炎等疾病密切相關[1]。兒童期是幽門螺桿菌感染的主要階段，一旦感染終身受累[2]。研究[3]顯示，小兒消化性潰瘍與年齡、生活地區(qū)、個人衛(wèi)生、家族患病史等有一定的關系。本研究從個人衛(wèi)生、社會情況（父母文化程度、家庭經(jīng)濟、母乳喂養(yǎng)等）、家族史以及血型等多個方面考察小兒消化性潰瘍的危險因素，從遺傳因素（血型）和環(huán)境因素等兩個方面進行探討，篩選小兒消化性潰瘍的危險因素，以期為臨床治療Hp感染提供理論依據(jù)。

1 臨床資料

選取2013年4月—2015年9月在我院就診的消化性潰瘍患兒148例，經(jīng)內(nèi)鏡檢查發(fā)現(xiàn)十二指腸潰瘍患兒112例，胃潰瘍患兒31例，幽門管潰瘍患兒5例。所有患兒均行小兒電子胃鏡檢查并取活檢組織進行快速尿素酶試驗（RUT）檢測Hp，檢測結(jié)果呈陽性者即可判定為Hp感染陽性，檢查為陰性則為Hp陰性[4]。148例患兒分為Hp陰性組97例，男63例，女34例，年齡3～8歲，平均（5.4±1.2）歲；Hp陽性組51例，男32例，女19例，年齡2～8歲，平均（5.7± 1.1）歲。排除標準：（1）肝腎功能及心功能異?；純海喜⑾来┛谆純?，合并消化性出血患兒；（2）患者在入選前3個月內(nèi)服用過抗菌藥物治療等。兩組性別、年齡方面差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2 研究方法

2.1 臨床相關資料收集 患者入選后采用調(diào)查問卷的形式進行，主要內(nèi)容有：（1）一般資料，主要為性別、年齡、身高、體質(zhì)量以及生活地區(qū)等；（2）相關因素資料，其中主要包括父母文化程度（按照本科及以上、?？啤？埔韵?個等級劃分）、是否為母乳喂養(yǎng)、家庭年收入（按照8萬元以上、6～8萬以及6萬以下3個等級劃分）、個人衛(wèi)生狀況（是否良好，主要考察小兒有無飯前飯后洗手、有無共用刷牙器具、有無共用餐具、有無養(yǎng)寵物等）、家族有胃腸道疾病以及既往病史（慢性胃炎、消化不良）等。

2.2 ABO血型檢測 患兒在清晨空腹采集肘靜脈血5mL，室溫靜置不得超過1h，采用低溫離心機離心15min（3000r/min），收集血清后避光保存在-80℃冰箱中待用，所有標本進行同一批次測定。ABO血型檢測按照衛(wèi)生部出版的《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第2版）進行鑒定。

2.3 紅細胞Lewis血型檢測 采用 Anti-Lea和Anti-Leb對患兒所有血液標本行血清學試驗，Lewis血型分為Le（a+b+）、Le（a+b-）、Le（a-b+）及Le（ab-）四種表型。

2.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包經(jīng)行統(tǒng)計處理，計量資料采用（±s）表示，兩組數(shù)據(jù)之間采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗。Logistic回歸分析影響小兒消化性潰瘍感染幽門螺桿菌的危險因素，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結(jié)果

3.1 消化性潰瘍患兒Hp感染危險因素分析 Hp陽性組年齡、性別、病程和母乳喂養(yǎng)與Hp陰性組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），父母文化程度、個人衛(wèi)生、生活地區(qū)、家庭年收入、家族有胃腸道疾病、既往病史方面與Hp陰性組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

3.2 消化性潰瘍Hp感染血型檢驗分析 Hp陽性組ABO血型、Lewis血型與Hp陰性組比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其中O型患兒感染Hp的例數(shù)明顯高于其他血型（χ2=9.09，P=0.034），紅細胞Lewis分型中Le（a+b+）感染Hp的患兒例數(shù)明顯高于其他各血型（χ2=11.23，P=0.021），見表2。

3.3 非條件多因素Logistic回歸分析 根據(jù)單因素分析結(jié)果，進一步采用多因素Logistic回歸模型分析，以小兒消化性潰瘍幽門螺桿菌感染為因變量（陽性為1，陰性為0），以父母文化程度、個人衛(wèi)生、家庭年收入、生活地區(qū)、家族有胃腸道疾病、既往病史、O型血、Le（a+b+）血型等為自變量。結(jié)果顯示，父母文化程度、個人衛(wèi)生、生活地區(qū)、家族有胃腸道疾病、既往病史、血型為O型、Lewis血型為Le（a+ b+）血型均為小兒消化性潰瘍幽門螺桿菌陽性的危險因素（P＜0.05）。見表3。

表1 消化性潰瘍患兒Hp感染的單因素分析（例）

表2 消化性潰瘍患兒血型檢驗分析

表3 消化性潰瘍患兒HP感染非條件多因素Logistic回歸分析

4 討論

消化性潰瘍主要包括十二指腸潰瘍和胃潰瘍[5]。近年來，隨著內(nèi)鏡技術的不斷進步，小兒消化性潰瘍越來越容易被檢測診斷，其發(fā)生的比例也在不斷上升[6]。Hp感染是消化性潰瘍的重要致病原因，可以導致胃腺癌、胃黏膜相關組織淋巴瘤等的發(fā)生，兒童感染Hp后除了導致慢性胃炎、消化性潰瘍以外，還可以導致兒童生長發(fā)育遲緩、特發(fā)性的血小板減少性紫癜等[7]。流行病學調(diào)查顯示，兒童處在Hp感染的高發(fā)階段。世界胃腸病學相關組織指出，兒童感染Hp的可能性在50%左右。在我國10歲以前兒童Hp感染率在10.5%～46.5%在，不同地區(qū)、不同年齡段兒童Hp感染率不相同[8-9]。本研究顯示，148例消化性潰瘍患兒中有51例感染Hp，感染率為34.46%。流行病學顯示，兒童感染Hp與年齡、父母是否感染以及家庭的經(jīng)濟衛(wèi)生狀況有關。通過本研究顯示，小兒消化性潰瘍Hp感染與父母文化程度、個人衛(wèi)生、家庭年收入、生活地區(qū)、家族有胃腸道疾病以及既往病史有相關性，這與劉彥琦等[10]的研究部分一致。本研究顯示，父母的文化程度越高小兒消化性潰瘍Hp感染率越低，其原因可能在于知識層面越高對于小兒的教育可能越全面；生活在城鎮(zhèn)Hp感染率低于農(nóng)村，其原因可能在于農(nóng)村兒童在個人衛(wèi)生、家庭年收入以及父母給予的關注度方面均低于城鎮(zhèn)兒童；家庭年收入在8萬元以上者Hp感染率明顯低于家庭年收入低于6萬元者，考慮與父母的文化程度、是否居住在城鎮(zhèn)等有一定的關聯(lián)。而家族有胃腸道疾病、既往病史可能是誘發(fā)小兒消化性潰瘍的原因，也是導致小兒感染Hp最直接的原因，也是出現(xiàn)家庭內(nèi)聚集現(xiàn)象產(chǎn)生的直接關鍵原因[11]，因為大部分家族胃腸道疾病、既往病史與幽門螺桿菌有關。

此外，自身原因也是Hp感染的另一重要原因。全球約有半數(shù)以上人群感染Hp，但是只有20%左右出現(xiàn)消化性疾病，這主要與患者自身體質(zhì)、幽門螺桿菌毒力基因多態(tài)性等有一定的關系[12]。血型是人類的遺傳標志，其具有較為穩(wěn)定的遺傳性質(zhì)，諸多疾病的發(fā)生除了與環(huán)境因素有關，也與血型有關[13]。早有研究[14]顯示，ABO血型與胃十二指腸潰瘍的發(fā)生有關。本研究顯示，Hp感染陽性組O型患兒感染比例明顯高于其他各血型組，且差異具有統(tǒng)計學意義，非條件多因素Logistic回歸分析進一步證實O型血為小兒消化性潰瘍的獨立危險因素。Lewis血型是存在于唾液與血漿中可溶性抗原，紅細胞獲得Lewis血型抗原主要是通過血漿吸附有關Lewis物質(zhì)到紅細胞上，有關的血型抗原主要有Lea和Leb，分為Le（a+b-）、Le（a-b-）、Le（a-b+）及Le（a+b+）四種表型，有報道指出Lewis血型抗原與Hp的黏附、定植以及炎癥反應等有著密切的關系[15-16]。本研究顯示，Hp陽性組Le（a+b+）表型患兒例數(shù)明顯高于其他各表型，Logistic回歸分析進一步證實Le（a+ b+）表型為小兒消化性潰瘍Hp感染的獨立危險因素。

兒童是感染Hp的高危人群，一旦感染可能會導致終身受累，尤其是消化性潰瘍患兒被發(fā)現(xiàn)Hp感染后，更易出現(xiàn)慢性胃炎、消化道潰瘍并出血甚至癌病，因此需要早診斷以便及時治療。因此，小兒消化性潰瘍Hp感染除了家庭經(jīng)濟狀況、個人衛(wèi)生、生活地區(qū)、家族有胃腸道疾病、既往病史等有關外，還與患兒自身血型有關，其中ABO血型中O型、Lewis血型中Le（a+b+）表型為小兒消化性潰瘍高危因素。

［1］O'Ryan ML，Lucero Y，Rabello M，et al.Persistent and Transient Helicobacter pylori Infections in Early Childhood［J］. Clin Infect Dis，2015，61（2）：211-218.

［2］Biernat MM，Gosciniak G，Iwańczak B.Prevalence of Helicobacter pylori cagA，vacA，iceA，babA2 genotypes in Polish children and adolescents with gastroduodenal disease［J］. Postepy Hig Med Dosw，2014，68：1015-1021.

［3］李芳學.小兒幽門螺桿菌感染伴消化性潰瘍的臨床治療方法對比分析［J］.中國婦幼保健，2012，27（28）：4487-4488.

［4］蔡華波，李永柏，趙曉東.兒童幽門螺桿菌感染與過敏性紫癜致病相關性［J］.中國實用兒科雜志，2013，28（2）：102-105.

［5］薛彥萍.消化性潰瘍患者幽門螺桿菌感染狀況及影響因素分析［J］.河南醫(yī)學研究，2015，24（1）：98-99.

［6］Hernández C，Serrano C，Einisman H，et al.Peptic ulcer disease in Helicobacter pylori-infected children：clinical findings and mucosal immune response［J］.J Pediatr Gastroenterol Nutr，2014，59（6）：773-778.

［7］Alexandra Nunes，Raquel Roch，F(xiàn)ilipa F.Vale，et al.Genome Sequencing of 10 Helicobacter pylori Pediatric Strains from Patients with Nonulcer Dyspepsia and Peptic Ulcer Disease［J］.Genome Announcements，2015，3（1）：e01488-14.

［8］Guo S，He L，Zhang J，et al.Antibiotic resistance of Helicobacter pylori in children and macrolide-resistant genotypesinHelicobacterpylori［J］.ZhonghuaYiXueZaZhi，2014，94（8）：563-566.

［9］Zeng M，Mao XH，Li JX，et al.Efficacy，safety，and immunogenicity of an oral recombinant Helicobacter pylori vaccine in children in China：a randomised，double-blind，placebo-controlled，phase 3 trial［J］.Lancet，2015，6736（15）：6 0310-60315.

［10］劉彥琦，趙愛珍，蘇炳忠，等.學齡兒童幽門螺桿菌感染狀況調(diào)查及其危險因素分析［J］.中國兒童保健雜志，2014，22（4）：432-434.

［11］金菊花，陶然．健康兒童幽門螺桿菌感染現(xiàn)狀的調(diào)查［J］.中華醫(yī)院感染學雜志，2013，23（13）：3188-3192.

［12］ Wiktor Laszewicz，F(xiàn)ranciszek Iwan'czak，BarbaraIwan' czak，et al.Seroprevalence of Helicobacter pylori infection in Polish children and adults depending on socioeconomic status and living conditions［J］.Advances in Medical Sciences，2014，59（1）：147-150.

［13］劉彥娥，國建真，田力.幽門螺桿菌相關性消化道潰瘍合并出血的危險因素Logistic回歸分析［J］.海南醫(yī)學院學報，2012，18（12）：1718-1720.

［14］Mandana Rafeey，Reza Ghotaslou，Morteza Milani，et al.Association between Helicobacter pylori，cagA，and vacA Status and Clinical Presentation in Iranian Children［J］.Iran J Pediatr，2013，23（5）：551-556.

［15］羅艷，王瑞彤.消化性潰瘍與血型、幽門螺桿菌感染和Lewis表型分布的相關性研究［J］.海南醫(yī)學，2015，26（1）：22-24.

［16］AnthonyP，Moran.Relevance of fucosylation and Lewis antigen exPression in the baeterial gastroduodenal Pathogen Helieobaeter Pylori［J］.Carhohydr Res，2008，343（12）：1952-1965.

（收稿：2016-06-10 修回：2016-08-01）

表1 加樣回收率結(jié)果

2.8 穩(wěn)定性試驗 取同一供試品溶液，按“2.1色譜條件”，在0、1、2、4、6、12h分別進樣，結(jié)果雷公藤甲素的峰面積RSD為0.25%（n=6），表明12h內(nèi)供試品相對穩(wěn)定。

2.9 樣品含量測定 取3批樣品，依法制備供試品溶液，并按擬訂方法進樣測定。結(jié)果3批樣品中雷公藤甲素平均含量為3.95mg/mL，其中批號160305雷公藤甲素含量4.02mg/mL，批號160306含量3.92mg/mL，批號160307含量3.90mg/mL。

3 討論

在相關文獻的基礎上[3-4]，我們選用甲醇-水系統(tǒng)作為流動相，發(fā)現(xiàn)甲醇和水的比例（40%～80%）對雜質(zhì)和主峰的分離度有很大的影響。當甲醇的比例較低時，雖然雷公藤甲素的出峰時間較晚，可以與輔料引起的雜峰分開，但是峰形較寬且拖尾；而當甲醇的比例提高到80%的時候，雷公藤甲素的保留時間過短，與輔料中的雜質(zhì)峰無法分開。同時，pH對雷公藤甲素的峰形影響較大，當pH調(diào)節(jié)到4.1時，發(fā)現(xiàn)可以明顯減少拖尾現(xiàn)象，并能改善峰的對稱性。

由于雷公藤甲素溶解分散在油相及表面活性劑中，我們選擇超聲破乳法盡可能提取雷公藤甲素，同時我們發(fā)現(xiàn)超聲（200w，50kHz）30min可以有效提取雷公藤甲素，而加樣回收率結(jié)果說明這一方法較為適合提取雷公藤甲素。

參考文獻

［1］Zhou ZL，Yang YX，Ding J，et al.Triptolide：structural modifications，structure-activity relationships，bioactivities，clinical development and mechanisms［J］.Nat Prod Rep，2012，29（4）：457-475.

［2］Sprunk A，Strachan CJ，Graf A.Rational formulation development and in vitro assessment of SMEDDS for oral delivery of poorly water soluble drugs［J］.Eur J Pharm Sci，2012，46（5）：508-515.

［3］薛王景，賈曉斌，譚曉斌，等.雷公藤甲素表觀油水分配系數(shù)的測定及其對吸收預測的研究［J］.中國藥學雜志，2009，44（20）：1560-1563.

［4］錢勇，費文靜，諸晨，等.高效液相色譜法測定雷公藤滴丸中雷公藤甲素的含量［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2015，30（11）：4115-4116.

（收稿：2016-07-06 修回：2016-08-12）

浙江省湖州市中心醫(yī)院兒科（湖州 313000）

熊斌，E-mail：823295895@qq.com