GC-MS/MS對白酒中17鄰苯二甲酸酯類的快速檢測分析

楊昌彪，馬凱，昝宏強(qiáng)，吳新文，張清海

（1.貴州省分析測試研究院，貴州貴陽550002；2.貴州醫(yī)科大學(xué)食品安全學(xué)院，貴州貴陽550025）

GC-MS/MS對白酒中17鄰苯二甲酸酯類的快速檢測分析

楊昌彪1，馬凱1，昝宏強(qiáng)1，吳新文1，張清海2

（1.貴州省分析測試研究院，貴州貴陽550002；2.貴州醫(yī)科大學(xué)食品安全學(xué)院，貴州貴陽550025）

建立了GC-MS/MS對白酒中17種鄰苯二甲酸酯類的快速分析方法。樣品經(jīng)正己烷提取、離心、靜置分層，取上清液進(jìn)行分析。采用PTV程序升溫進(jìn)樣程序，結(jié)合15m長的毛細(xì)管柱，15m in內(nèi)對樣品進(jìn)行有效的分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～6.3%，回收率為82%～117%，檢出限為0.04～1μg/kg（DINP為40μg/kg），此方法快速、穩(wěn)定，適合批量樣品的檢測分析。

GC-MS/MS；白酒；鄰苯二甲酸酯類

鄰苯二甲酸酯（PAEs）是一類能起到軟化作用的增塑劑，可增大產(chǎn)品的可塑性和柔韌性，是一種人工合成的有機(jī)化合物，作為一類全球性的環(huán)境污染物廣泛存在于水、土、空氣及生物體內(nèi)，該類化合物與我們的日常生活密切相關(guān)，可通過飲水、進(jìn)食、皮膚接觸（化妝品）和呼吸進(jìn)入人體，對人群健康產(chǎn)生不同程度的危害[1]。研究表明，PAEs具有雌激素的特征及抗雄激素生物效應(yīng)[2]，進(jìn)入人體后會導(dǎo)致人體內(nèi)分泌失調(diào)，引發(fā)惡性腫瘤并容易造成畸形、癌變和突變[3-4]。PAEs被公眾所關(guān)注開始于臺灣的增塑劑事件，此次塑化劑風(fēng)波在臺灣引起軒然大波，被稱為臺灣版的“三聚氰胺事件”。中國衛(wèi)生部于2011年6月1日緊急發(fā)布公告，將塑化劑鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)列入食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單。

白酒在發(fā)酵及蒸餾過程中不產(chǎn)生塑化劑，其主要來源于塑膠容器、管道、密封材料和包裝材料等的遷移帶入酒中，且塑化劑易溶于有機(jī)溶劑，白酒中乙醇濃度大，會溶解塑料制品中的塑化劑成分而污染白酒。目前，對白酒塑化劑的檢測主要參考GB/T 21911—2008《食品中鄰苯二甲酸酯的測定》，無針對白酒的檢測標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)于鄰苯二甲酸酯類的檢測方法主要有GC法、GC-MS法、HPLC法、LC/MSMS法等[5-8]，本研究以國標(biāo)檢測為基礎(chǔ)，結(jié)合GC-MS/MS建立一套快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)好的塑化劑檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

白酒樣品：市售若干品牌白酒。

試劑：正己烷，農(nóng)殘級；17種塑化劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，DR。

儀器設(shè)備：TSQ Quantum XLS氣相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀(賽默飛世爾科技，美國)；旋渦混合器(XW-80A)，常州諾基儀器有限公司；離心機(jī)(H-1850R)，長沙湘儀離心機(jī)儀器公司；毛細(xì)管柱：TG-SQC，15m×0.25mm× 0.25μm。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 氣相條件

進(jìn)樣口，采用PTV程序升溫：70℃保持0.2 m in，14.5℃/s升到200℃，保持1m in，8℃/s升到230℃，保持1m in。

柱溫箱：80℃保持1m in，以25℃/m in升至200℃，再以20℃/m in升至245℃，保持7m in；流速：1m L/m in。

1.2.2 質(zhì)譜條件

質(zhì)譜條件：EI源，離子源溫度230℃；發(fā)射電流：50μA；連接管溫度250℃；溶劑延遲3m in，采用EZ-SRM監(jiān)測分析，通過優(yōu)化后監(jiān)測離子對見表1。

1.3 前處理方法

準(zhǔn)確量取5.00 g（精確到0.01 g）白酒樣品10m L于具玻璃磨口塞的刻度玻璃管中，加入2.0m L正己烷，劇烈來回振蕩30 s，旋渦30 s，超聲5m in，4000 r/min的高速離心機(jī)中離心3m in，靜置5m in，取上清液直接裝瓶上機(jī)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 GC-MS總離子流圖

在1.2條件下，17種PAEs的GC-MS總離子流圖見圖1。

表1 不同化合物采集離子對信息

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品17種PAEs總離子流圖

在此實(shí)驗(yàn)條件下，最后目標(biāo)物DNP出峰時(shí)間為13.41m in，再平衡1m in左右，15m in內(nèi)就能分析1個(gè)樣品，相對國標(biāo)26m in而言縮短了近10m in，可以有效的提高樣品分析速度。從圖1可以看出，雖然DINP和DNOP有重疊，但不影響目標(biāo)物的分析，因?yàn)椴杉碾x子不一樣，所以提取離子圖后可以明顯的區(qū)分出二者，DINP提取離子后呈典型的五指峰狀，容易與DNOP區(qū)分開。

2.2 樣品分析質(zhì)譜圖（見圖2）

從圖2可以明顯看出，第1張為空白試劑空白質(zhì)譜圖，第2張為白酒樣品圖，第3張為樣品加標(biāo)圖。空白試劑圖通過二級制品掃描后，存在一定的峰干擾，但響應(yīng)強(qiáng)度很低，強(qiáng)度為1.13×103，通過校正后不足以影響定量結(jié)果。通過加標(biāo)樣和樣品對比，可以看出在6.17m in、6.57m in和9.25m in處有目標(biāo)物檢出，整體而言樣品較干凈，為其定性定量的準(zhǔn)確性提供了一定的基礎(chǔ)。

2.3 方法的線性范圍及檢出限

以正己烷為溶劑，分別配制17種鄰苯類混標(biāo)濃度為0.10μg/m L、0.25μg/m L、0.50μg/m L、1.00μg/m L、2.00μg/m L (DINP的濃度為1.00μg/m L、2.00μg/m L、4.00μg/m L、6μg/m L、8.00μg/m L)的混標(biāo)溶液，建立各標(biāo)準(zhǔn)曲線，不同化合物的曲線回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表2。同時(shí)按3倍信噪比（S/N）計(jì)算方法的檢出限。

2.4 方法精密度和回收率

準(zhǔn)確稱取5.00 g白酒樣，添加0.40 mg/kg(DINP= 2.00mg/kg)濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，平行測定6次，結(jié)果見表2。

從表2可看出，17種鄰苯二甲酸酯類的相關(guān)系數(shù)均在0.992～0.999之間，測定結(jié)果RSD值范圍為2.1%～6.3%，說明線性良好，穩(wěn)定性好。方法不同指標(biāo)的回收率范圍在82%～117%，提取率高，滿足日常檢測需求。方法檢出限因DINP作為五指峰響應(yīng)較差，為40μg/kg外，其他的均在0.04～1μg/kg間，響應(yīng)強(qiáng)度高，靈敏度好，相對于國標(biāo)不含油脂的檢出限為0.0mg/kg而言，響應(yīng)值提高了數(shù)倍。

圖2 樣品總離子流圖

表2 17種PAEs的回歸方程、相關(guān)系數(shù)，重現(xiàn)性、回收率及檢出限

表3 不同白酒PAEs測定含量

2.5 市售白酒樣品PAEs檢測分析

對市售10個(gè)不同來源的白酒進(jìn)行了17種PAEs的檢測分析，結(jié)果見表3。由表3可知，除了DMP、DEP、DIBP、DBP、DMEP、DEEP和DEHP共7種鄰苯類有檢出外，其余的均未檢出。根據(jù)《衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于通報(bào)食品及食品添加劑鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)最大殘留量的函》中規(guī)定，DBP、DEHP和DINP的最大殘留量分別為0.3mg/kg、1.5mg/kg、9.0mg/kg。但從表3可以看出，DBP最大檢出值為2.63mg/kg,超出了限量值的近8倍，DEHP的最大檢出值為2.62mg/kg，也超出了限量值的近2倍。而其他指標(biāo)如DMP、DEP、DMEP、DEEP和DIBP也有檢出，其中DIBP含有較高含量值，達(dá)1.96mg/kg，但無相關(guān)文件或標(biāo)準(zhǔn)對此類指標(biāo)進(jìn)行明確的范圍規(guī)定。DEP、DBP、DIBP和DEHP檢出率較高，基本上都有不等含量的檢出。造成PAEs超標(biāo)和帶進(jìn)白酒中的原因可能是多樣的，有些企業(yè)可能由于成本的問題未來得及更新生產(chǎn)工藝、儲藏及轉(zhuǎn)移過程中涉及到的塑料制品，同時(shí)除了工藝外如原料、水等因?yàn)榄h(huán)境的污染也會部分遷移帶入酒中。所以在白酒生產(chǎn)過程中必須嚴(yán)格控制每一環(huán)節(jié)以保證白酒中塑化劑的質(zhì)量合格。

3 結(jié)論

通過PTV進(jìn)樣程序升溫，結(jié)合15m毛細(xì)管柱，建立了15 m in內(nèi)快速檢測分析白酒中的17種PAEs的GCMS/MS分析法。同時(shí)經(jīng)二級質(zhì)譜分析，極大的提高了儀器的靈敏度、排除假陽性的干擾，從而使檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確，此方法快速、穩(wěn)定，適合批量樣品的檢測分析。

[1]劉慧杰,舒為群.鄰苯二甲酸酯類化合物的毒理學(xué)效應(yīng)及對人群健康的危害[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,26(19)：1778-1781.

[2]劉紅河,黃曉群,王暉,等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定食品中鄰苯二甲酸酯[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2008,35(1)：119-121.

[3]徐勇.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定食品及包裝材料中16種塑化劑[J].食品安全導(dǎo)刊,2013(1/2)：40.

[4]GUO BY,WEN B,SHAN X Q,etal.Separation and determination of phthalatesbymicellarelectrokinetic chromatography[J].Jchromatography:A,2005,1095(1/2)：189-192.

[5]李艷松,陳鐵英,黃寶臨,等.食品中16種鄰苯二甲酸酯類化合物的氣相色譜測定方法[J].食品與機(jī)械,2012,28(1)：105-107.

[6]應(yīng)全紅,王霓,白德奎,等.白酒中塑化劑GC-MS檢測方法的研究[J].中國釀造,2013(11)：136-138.

[7]施雅梅,徐敦明,周昱,等.QuEChERS/高效液相色譜測定食品中17種鄰苯二甲酸酯[J].分析測試學(xué)報(bào),2011(12)：1372-1376.

[8]劉紅河,黃曉群,王暉,等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定食品中鄰苯二甲酸酯[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2008(1)：119-121.

Rapid Detection of 17 K indsof PAEs in Baijiu by GC-MS/MS

YANGChangbiao1,MA Kai1,ZAN Hongqiang1,WU Xinwen1and ZHANGQinghai2
（1.Guizhou Academy of Testing and Analysis,Guiyang,Guizhou 550002;2.Collegeof Food Safety, Guizhou M edical University,Guiyang,Guizhou 550025,China）

Amethod for rapid detection of 17 kinds phthalateesters in Baijiu by GC-MS/MShad been developed.Liquor samples were extracted w ith n-hexane,after centrifugation and still stratification,supernatant liquid was obtained for subsequent analysis.PTV temperature-rising and sample-injecting program was adopted,and 15m capillary column was used for sample analysis within 15m in.The experimental results suggested that,the relative standard deviations were in the range of 2.1%to 6.3%,the recoveries were in the range of 82%to 117%,and the detection limits were0.04～1μg/kg（DINPwas40μg/kg).Such method was suitable for batch sample analysis due to its rapid and stable detection.

GC-MSMS;Baijiu;phthalate esters(PAEs)

TS262.3；TS261.7；TS261.4

A

1001-9286（2017）02-0124-04

10.13746/j.njkj.2016348

貴陽市科技計(jì)劃項(xiàng)目（筑科合同[2013103]45號）；貴州科學(xué)院基金（黔科院J合字[2016]1號）。

2016-11-23

楊昌彪（1984-），男，碩士，工程師，研究方向：食品安全檢測與分析，E-mail：cb-yang@1gzata.cn。

張清海（1982-），男，博士，教授，研究方向：食品檢測與分析技術(shù)，E-mail：zhqh8@163.com。

優(yōu)先數(shù)字出版時(shí)間：2017-01-13；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20170113.1412.002.htm l。