高脂飲食對(duì)AOM/DSS誘導(dǎo)的小鼠不同周期潰瘍性結(jié)腸炎的影響及白細(xì)胞介素6的改變

周鳳，劉維新，于艷紅，邢俊偉，楊慧珊，李虹，蘭雨桐

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科，沈陽(yáng) 110001；2.寧波市醫(yī)療中心李惠利東部醫(yī)院感染科，浙江 寧波 315000）

高脂飲食對(duì)AOM/DSS誘導(dǎo)的小鼠不同周期潰瘍性結(jié)腸炎的影響及白細(xì)胞介素6的改變

周鳳1，2，劉維新1，于艷紅1，邢俊偉1，楊慧珊1，李虹1，蘭雨桐1

（1.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科，沈陽(yáng) 110001；2.寧波市醫(yī)療中心李惠利東部醫(yī)院感染科，浙江 寧波 315000）

目的 觀察高脂飲食對(duì)氧化偶氮甲烷（AOM）/葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的小鼠不同周期潰瘍性結(jié)腸炎（UC）及其不典型增生的影響以及血液中白細(xì)胞介素6（IL?6）的改變。方法 DSS組、DSS+AOM組、DSS+高脂組、DSS+AOM+高脂組小鼠以DSS水3 d+滅菌水4 d為1個(gè)循環(huán)周期全程交替口服，并設(shè)立正常對(duì)照組，每組12只。前3周每周第1天DSS+AOM組及DSS+AOM+高脂組小鼠腹腔注射AOM（10 mg/kg）。分段處死小鼠，采用疾病活動(dòng)指數(shù)、病理組織學(xué)評(píng)分判斷炎癥程度，ELISA法檢測(cè)血清中IL?6水平。結(jié)果 單純使用DSS可建立UC模型。在第9個(gè)循環(huán)周期末處死的小鼠中，正常對(duì)照組與DSS組無(wú)不典型增生發(fā)生，DSS+高脂組不典型增生率為25%（1/4），而DSS+AOM組為50%（2/4），DSS+AOM+高脂組為75%（3/4），但DSS組與DSS+高脂組、DSS+AOM組與DSS+AOM+高脂組、DSS組與DSS+AOM組、DSS+高脂組與DSS+AOM+高脂組比較，不典型增生率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）。DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組的疾病活動(dòng)指數(shù)、病理組織學(xué)評(píng)分分別大于對(duì)應(yīng)的DSS組和DSS+AOM組（P＜0.05）。DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組血清IL?6水平雖高于對(duì)應(yīng)的DSS組和DSS+AOM組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 高脂飲食可能是UC及其不典型增生的一種致病因素。

高脂飲食；潰瘍性結(jié)腸炎；不典型增生；白細(xì)胞介素6

炎癥性腸病是一種病因尚不明確的慢性腸道炎癥性疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和克羅恩病。炎癥性腸病是結(jié)直腸癌的高危因素之一［1］，長(zhǎng)期反復(fù)的炎癥會(huì)導(dǎo)致結(jié)腸黏膜不典型增生甚至癌變的發(fā)生［2］。有研究［3］表明，UC相關(guān)性結(jié)直腸癌的發(fā)生過(guò)程不再依照“腺瘤→癌變”的經(jīng)典模式，而是遵循炎癥→不典型增生（低度、高度）→癌的演變過(guò)程。白細(xì)胞介素6（interleukin?6，IL?6）是白細(xì)胞介素家族中的多功能細(xì)胞因子，具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答、誘導(dǎo)急性期蛋白及調(diào)節(jié)腫瘤生長(zhǎng)等作用。炎癥性腸病中，維持大腸慢性炎癥的CD4+T細(xì)胞主要依賴IL?6的抗凋亡作用。大量研究［4?6］顯示，IL?6在UC的炎癥發(fā)生及癌變過(guò)程中具有重要作用，它不但能維持炎癥的慢性過(guò)程，還能促進(jìn)異常細(xì)胞的發(fā)生，對(duì)T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞起抗凋亡作用。流行病學(xué)研究［7?8］證實(shí)，高脂飲食可能增加炎癥性腸病和結(jié)直腸癌的發(fā)病率，但尚缺少高脂飲食對(duì)炎癥性腸病向癌癥進(jìn)展影響的研究。OKAYASU等［9］利用致癌劑氧化偶氮甲烷（azoxymethane，AOM）與致炎劑葡聚糖硫酸鈉（dextran sodium sulfate，DSS），在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中首次驗(yàn)證反復(fù)黏膜壞死和再生對(duì)腫瘤形成的促進(jìn)作用，較單純使用AOM或DSS的實(shí)驗(yàn)周期大為縮短。該方法已被逐步優(yōu)化，目前已成為常用的腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌動(dòng)物模型之一。本研究擬通過(guò)建立AOM/DSS誘導(dǎo)的UC及其不典型增生模型，并給予高脂飲食干預(yù)，檢測(cè)IL?6的變化，進(jìn)一步探討高脂飲食對(duì)炎癥及其癌變進(jìn)展的影響，為臨床治療和預(yù)防提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

選用雄性6周齡Balb/c小鼠60只，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，恒溫（23±2）℃，恒濕50%±10%，晝夜循環(huán)。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

分子量為36 000～50 000的DSS，購(gòu)自美國(guó)MP?BIO公司；AOM（A5486?25MG），購(gòu)自美國(guó)Sigma公司；小鼠IL?6 ELISA試劑盒，購(gòu)自北京方程生物科技有限公司。高脂飼料：豬油（21%）、膽固醇（0.15%）、基礎(chǔ)飼料（78.85%），購(gòu)自北京科奧協(xié)力飼料有限公司。其余材料均為實(shí)驗(yàn)室自備。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 造模及分組：配制DSS飲用水，將分子量為36 000～50 000的DSS溶于滅菌水中，配置成3%的DSS溶液。隨機(jī)將小鼠平均分為5組，分別為正常對(duì)照組和4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組12只。實(shí)驗(yàn)組包括正常飲食的DSS組（DSS誘導(dǎo)UC）、DSS+AOM組（AOM/ DSS聯(lián)合誘導(dǎo)UC癌變）以及高脂飲食的DSS+高脂組、DSS+AOM+高脂組。正常對(duì)照組予以滅菌水自由飲用，不作任何處理。除正常對(duì)照組外，4個(gè)實(shí)驗(yàn)組均以自由飲用3%的DSS水3 d+自由飲用滅菌水4 d為1個(gè)循環(huán)周期，重復(fù)9個(gè)周期。DSS+AOM組及DSS+AOM+高脂組小鼠在前3個(gè)循環(huán)周期的每周第1天，腹腔注射AOM（10 mg/kg）。

1.3.2 標(biāo)本采集：于第1、3、5、7個(gè)循環(huán)周期末各組處死2只小鼠，第9個(gè)循環(huán)周期末處死各組剩余小鼠。處死前采用摘眼球法取血，放于EP管中。將每只小鼠整段結(jié)腸取出，沿縱軸切開(kāi)，用生理鹽水沖凈后明確炎癥部位，截取1cm組織固定于10%甲醛溶液中，常規(guī)石蠟包埋、制作組織切片、常規(guī)HE染色后封片，光鏡下觀察結(jié)腸組織病理改變的情況。采用ELISA法檢測(cè)各組小鼠血清中IL?6的水平。

1.3.3 疾病活動(dòng)指數(shù)的評(píng)估：每日記錄小鼠的體質(zhì)量、大便性狀和便血情況。評(píng)分方法［10］：體質(zhì)量無(wú)下降，大便性狀、顏色正常各計(jì)0分；體質(zhì)量下降＜5%，大便松散、顏色正常各計(jì)1分；體質(zhì)量下降5%～＜10%，大便松散、黑便各計(jì)2分；體質(zhì)量下降10%～＜15%，大便稀便、黑便各計(jì)3分；體質(zhì)量下降≥15%，大便稀便、肉眼血便各計(jì)4分。計(jì)算總評(píng)分，作為每只小鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)，以評(píng)估疾病活動(dòng)情況。

1.3.4 不同喂養(yǎng)方式下小鼠體質(zhì)量差值比較：記錄小鼠的體質(zhì)量，計(jì)算第1、3、5、7、9循環(huán)周期末小鼠體質(zhì)量與初始體質(zhì)量的差值，采用方差分析方法比較各組體質(zhì)量變化是否相同。

1.3.5 病理組織學(xué)損傷評(píng)分：在光鏡下觀察結(jié)腸組織切片。評(píng)分方法［10］：無(wú)潰瘍、無(wú)炎癥、無(wú)肉芽腫、無(wú)纖維化、無(wú)病變各計(jì)0分；小潰瘍＜3 mm、輕度炎癥、有肉芽腫、病變局限于黏膜下層各計(jì)1分；大潰瘍≥3 mm、重度炎癥、病變深度達(dá)肌層、重度纖維化各計(jì)2分。合計(jì)總分，評(píng)估組織損傷情況。癌變標(biāo)準(zhǔn)［11］包括不典型增生和癌變。

1.3.6 ELISA法檢測(cè)血清IL?6水平：選取第1、5、7、9循環(huán)周期末小鼠，采用摘眼球法取血，存于-80℃冰箱，待ELISA檢測(cè)時(shí)解凍分離血清血漿，選用血清。嚴(yán)格參照ELISA試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)以x±s表示。各樣本均數(shù)的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)。多個(gè)樣本表達(dá)率的比較及多重比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況及疾病活動(dòng)指數(shù)

4個(gè)實(shí)驗(yàn)組小鼠在第1個(gè)循環(huán)周期癥狀不明顯。第3個(gè)循環(huán)周期開(kāi)始后第3天小鼠出現(xiàn)精神萎靡、懶動(dòng)等癥狀，DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組小鼠體毛凌亂明顯，大便次數(shù)增多、質(zhì)稀，出現(xiàn)黑便，改正常飲水第2天癥狀改善，大便松散，仍有黑便，體質(zhì)量下降。第5個(gè)循環(huán)周期開(kāi)始后第3天4個(gè)實(shí)驗(yàn)組每組分別有3～6只小鼠出現(xiàn)大便顏色變深、黑便或血便，改正常飲水后第3天血便消失，但仍有黑便，DSS+AOM+高脂組有1只小鼠稀便。第7個(gè)循環(huán)周期開(kāi)始后第2天4個(gè)實(shí)驗(yàn)組小鼠出現(xiàn)稀便、黑便，第3天出現(xiàn)血便，改正常飲水后第3天血便消失，有稀便、黑便，DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組尤為明顯。第9個(gè)循環(huán)周期開(kāi)始后第2天4個(gè)實(shí)驗(yàn)組所有小鼠均出現(xiàn)稀便，部分小鼠有肉眼血便，第3天全部可見(jiàn)肉眼血便，改正常飲水第4天部分小鼠仍有腹瀉及便血癥狀，DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組較明顯。正常對(duì)照組小鼠精神、活動(dòng)、食量、大便性狀正常，體毛柔順?？傮w可見(jiàn)，DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組的疾病活動(dòng)指數(shù)大于對(duì)應(yīng)的DSS組和DSS+AOM組（P＜0.05），但DSS+AOM組與DSS組、DSS+AOM+高脂組與DSS+高脂組比較，疾病活動(dòng)指數(shù)的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的疾病活動(dòng)指數(shù)均大于正常對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 不同喂養(yǎng)方式下小鼠體質(zhì)量差值

表1 第1、3、5、7、9循環(huán)周期末各組小鼠疾病活動(dòng)指數(shù)Tab.1 Disease activity index of 5 groups of mice at the end of 1，3，5，7，and 9 cycles

4個(gè)實(shí)驗(yàn)組中9個(gè)循環(huán)周期小鼠體質(zhì)量差值變化總體呈緩慢增長(zhǎng)或不增長(zhǎng)趨勢(shì)，期間有體質(zhì)量下降。起初DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)高于對(duì)應(yīng)的DSS組和DSS+AOM組，第3個(gè)循環(huán)周期末開(kāi)始，DSS+高脂組和DSS+AOM+高脂組小鼠體質(zhì)量下降，在第5、9個(gè)循環(huán)周期末，DSS+高脂組、DSS+AOM+高脂組體質(zhì)量差值分別小于DSS組、DSS+AOM組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；第5個(gè)循環(huán)周期開(kāi)始，DSS+AOM組、DSS+AOM+高脂組體質(zhì)量增長(zhǎng)分別小于DSS組及DSS+高脂組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 光鏡下結(jié)腸病理組織學(xué)評(píng)估

表2 第1、3、5、7、9循環(huán)周期末各組小鼠實(shí)驗(yàn)前后體質(zhì)量差值（g）Tab.2 Body weight growth of 5 groups of mice at the end of 1，3，5，7，and 9 cycles（g）

4個(gè)實(shí)驗(yàn)組在第1個(gè)循環(huán)周期末處死的小鼠中結(jié)腸組織輕度水腫，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)不明顯；第3個(gè)循環(huán)周期末處死的小鼠中結(jié)腸組織明顯充血水腫，部分黏膜上皮損傷脫落，伴有不同程度的腺體結(jié)構(gòu)消失；第5個(gè)循環(huán)周期末處死的小鼠中發(fā)現(xiàn)小潰瘍病灶，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)多在黏膜下層，固有腺體萎縮；第7個(gè)循環(huán)周期末可見(jiàn)多發(fā)小潰瘍?cè)?，黏膜壞死、糜爛，炎癥細(xì)胞較前增多，黏膜下層可見(jiàn)淋巴結(jié)節(jié)，伴有纖維化出現(xiàn)。第9個(gè)循環(huán)周期末DSS+AOM組、DSS+高脂組及DSS+AOM+高脂組有不典型增生的表現(xiàn)，如細(xì)胞核大深染、核型不規(guī)則、核分裂像增多、核質(zhì)比例增多等。DSS組未見(jiàn)不典型增生表現(xiàn)。正常對(duì)照組小鼠結(jié)腸黏膜上皮完整，腺體排列規(guī)整，無(wú)充血水腫及糜爛潰瘍。第7個(gè)循環(huán)周期末，病理組織學(xué)評(píng)分DSS組小于DSS+AOM組、DSS組小于DSS+高脂組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；第9個(gè)循環(huán)周期末，病理組織學(xué)評(píng)分DSS組小于DSS+ AOM組、DSS+高脂組小于DSS+AOM+高脂組、DSS組小于DSS+高脂組、DSS+AOM組小于DSS+AOM+高脂組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。4個(gè)實(shí)驗(yàn)組病理組織學(xué)評(píng)分均大于正常對(duì)照組（P＜0.05）。見(jiàn)表3。第9個(gè)循環(huán)周期末處死的小鼠中，正常對(duì)照組與DSS組無(wú)不典型增生發(fā)生，DSS+高脂組不典型增生率為25%（1/4），DSS+AOM組為50%（2/4），DSS+AOM+高脂組為75%（3/4），DSS+AOM+高脂組小鼠結(jié)直腸不典型增生率大于正常對(duì)照組（P＜0.05），但DSS組與DSS+高脂組、DSS+AOM組與DSS+AOM+高脂組、DSS組與DSS+AOM組、DSS+高脂組與DSS+AOM+高脂組比較，不典型增生率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）。第9個(gè)循環(huán)周期末各組小鼠結(jié)腸病理圖片見(jiàn)圖1。

2.4 ELISA法檢測(cè)血清IL?6水平

表3 第1、3、5、7、9循環(huán)周期末各組小鼠病理組織學(xué)評(píng)分Tab.3 Pathohistological index of 5 groups of mice at the end of 1，3，5，7，and 9 cycles

圖1 第9個(gè)循環(huán)周期末各組小鼠結(jié)腸病理圖片F(xiàn)ig.1 Pathological pictures of colon of 5 groups of mice at the end of 9 cycles

4個(gè)實(shí)驗(yàn)組中血清IL?6水平隨循環(huán)周期的增加而逐漸升高，明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。DSS+高脂組、DSS+AOM+高脂組小鼠血清IL?6水平大于對(duì)應(yīng)的DSS組、DSS+AOM組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在第9個(gè)循環(huán)周期末，小鼠血清IL?6水平DSS組小于DSS+AOM組、DSS+高脂組小于DSS+AOM+高脂組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

近年來(lái)，隨著生活方式及飲食習(xí)慣的改變，UC的發(fā)病率在世界各地呈逐漸增高趨勢(shì)，且與結(jié)直腸癌的發(fā)病關(guān)系密切。有研究［12］發(fā)現(xiàn)，UC相關(guān)性結(jié)直腸癌僅占所有結(jié)直腸癌的1%～2%，但在導(dǎo)致UC患者死亡的因素中占了15%，可認(rèn)為UC癌變是造成UC患者死亡的主要原因之一。其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確，目前認(rèn)為生活環(huán)境、飲食習(xí)慣、免疫系統(tǒng)、遺傳等多因素的改變均可能在UC癌變過(guò)程中發(fā)揮重要的作用［13］。

高脂飲食與結(jié)腸炎、結(jié)直腸癌的發(fā)病密切相關(guān)。研究［14］證明高脂飲食可能增加小鼠UC的患病率，徐德魁等［15］發(fā)現(xiàn)結(jié)腸炎小鼠給予高脂飲食后結(jié)腸局部炎癥加重，表明高脂飲食可能是UC的一個(gè)致病因素。其機(jī)制可能為脂類(lèi)在消化道代謝分解的產(chǎn)物，如次級(jí)膽酸、硫化氫等，損害腸道微環(huán)境，誘發(fā)結(jié)腸黏膜炎癥。炎癥的不斷累積可導(dǎo)致不典型增生的發(fā)生，甚至發(fā)生癌變。高脂飲食是肥胖的主要原因，而肥胖被大多數(shù)研究者認(rèn)為是一種“低度炎癥狀態(tài)”。肥胖相關(guān)的炎癥在癌癥發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用［16］。目前缺少高脂飲食對(duì)UC癌變的相關(guān)實(shí)驗(yàn)及臨床研究。

表4 第1、5、7、9循環(huán)周期末各組小鼠血清IL?6水平（pg/mL）Tab.4 Level of serum IL?6 at the end of 1，5，7，and 9 cycles（pg/mL）

IL?6是一種多效能細(xì)胞因子，其與受體結(jié)合形成IL?6/IL?6R/gpl30復(fù)合物進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活子3活化，進(jìn)而發(fā)揮其生物學(xué)功能。它的主要生物學(xué)作用包括調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和造血系統(tǒng)、誘導(dǎo)急性期蛋白及調(diào)節(jié)腫瘤生長(zhǎng)等。炎癥性腸病中，不論是克羅恩病還是UC，維持大腸慢性炎癥的CD4+T細(xì)胞主要依賴IL?6的抗凋亡作用，IL?6是炎癥性腸病發(fā)展過(guò)程中的一種核心細(xì)胞因子。在炎癥性腸病逐漸進(jìn)展并最終發(fā)生腫瘤的演變過(guò)程中，IL?6不僅協(xié)同幫助腫瘤因子，促進(jìn)異常細(xì)胞的發(fā)生，還對(duì)T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞有抗凋亡作用［17］。有研究［18］證實(shí)，阻滯抗體介導(dǎo)的IL?6信號(hào)傳遞，可延遲化學(xué)致癌物質(zhì)誘導(dǎo)的UC相關(guān)性結(jié)直腸癌形成。

UC是一個(gè)反復(fù)發(fā)作的疾病，發(fā)作期及緩解期長(zhǎng)短不一，反復(fù)發(fā)作的炎癥導(dǎo)致腸道黏膜不典型增生，甚至發(fā)生癌變，在臨床上收集多個(gè)周期病例難度大，主要的研究手段是建立相應(yīng)的動(dòng)物模型。本研究采用DSS誘導(dǎo)建立不同周期的UC小鼠模型，加用AOM聯(lián)合建立UC不典型增生及癌變模型，結(jié)果顯示單純使用DSS可建立UC小鼠模型。第9個(gè)循環(huán)周期末處死的小鼠中，DSS組無(wú)不典型增生發(fā)生，DSS+高脂組不典型增生率為25%，而加用AOM的DSS+AOM組不典型增生率為50%，DSS+AOM+高脂組不典型增生率為75%。由于樣本量太小，DSS組與DSS+高脂組、DSS+AOM組與DSS+AOM+高脂組、DSS組與DSS+AOM組、DSS+高脂組與DSS+AOM+高脂組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），各組均無(wú)癌變發(fā)生，考慮可能為誘導(dǎo)周期太短，可增加實(shí)驗(yàn)周期來(lái)完善進(jìn)一步研究。DSS+高脂組、DSS+ AOM+高脂組的小鼠病理組織學(xué)評(píng)分、疾病活動(dòng)指數(shù)高于對(duì)應(yīng)正常飲食的DSS組、DSS+AOM組小鼠（P＜0.05），DSS組與DSS+AOM組、DSS+高脂組及DSS+AOM+高脂組比較，病理組織學(xué)評(píng)分的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而且隨著循環(huán)周期的增多，高脂飲食的DSS+高脂組、DSS+AOM+高脂組的小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)小于正常飲食的DSS組、DSS+AOM組小鼠（P＜0.05），DSS+AOM組、DSS+AOM+高脂組小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)分別小于DSS組及DSS+高脂組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這說(shuō)明高脂飲食、AOM可加重小鼠結(jié)腸炎癥，誘導(dǎo)不典型增生的發(fā)生，并影響著小鼠的正常生長(zhǎng)。4個(gè)實(shí)驗(yàn)組的血清IL?6水平逐漸升高，明顯高于正常對(duì)照組（P＜0.05），DSS+高脂組、DSS+AOM+高脂組的IL?6水平比對(duì)應(yīng)的DSS組、DSS+AOM組增高，但是差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可能與高脂負(fù)荷量不足有關(guān)。在第9個(gè)循環(huán)周期末，DSS組與DSS+AOM組、DSS+高脂組與DSS+AOM+高脂組血清IL?6水平的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。高脂飲食可能可加重UC，增加其不典型增生的發(fā)生率，為其治療和預(yù)防提供了臨床參考。

綜上所述，高脂飲食可以加重AOM/DSS誘導(dǎo)的小鼠UC及其不典型增生。IL?6水平在DSS+AOM+高脂組、DSS+AOM組最高，其次是DSS+高脂組、DSS組，在正常對(duì)照組最低。高脂飲食可能是UC及其不典型增生的一種致病因素。

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（編輯 陳 姜）

Effects of High Fat Diet on Ulcerative Colitis in Different Periods Induced by AOM/DSS and the Changes of Interleukin?6 Level in Mice

ZHOU Feng1，2，LIU Weixin1，YU Yanhong1，XING Junwei1，YANG Huishan1，LI Hong1，LAN Yutong1
（1.Department of Digestive Diseases，The First Hospital，China Medical University，Shenyang 110001，China；2.Department of Infectious Diseases，Ningbo Medical Center Lihuili Eastern Hospital，Ningbo 315000，China）

Objective To observe the effects of high fat diet on ulcerative colitis（UC）and atypical hyperplasia in different periods induced by azoxymethane（AOM）/dextran sodium sulfate（DSS）and the changes of interleukin?6（IL?6）level in blood.Methods The mice in DSS，DSS+ AOM，DSS+high fat diet，and DSS+AOM+high fat diet groups were given DSS for 3 days and sterilization water for 4 days as one cycle for 9 cycles，and the mice in normal control group were given sterilization water（n=12 in each group）.The mice in DSS+AOM and DSS+AOM+high fat diet groups received intraperitoneal injection of AOM（10 mg/kg）in the every first day of the first 3 cycles.The mice in each group were sacrificed at different time points，and the disease activity index and pathohistological index were used to determine the degree of inflammation.ELISA method was used for the detection of serum IL?6 level.Results Simple administration of DSS could induce UC in the mouse model.After 9 circles of treatment，atypical hyperplasia was not found in normal control and DSS groups，and the rate of atypical hyperplasia was 25%（1/4）in DSS+high fat diet group，50%（2/4）in DSS+AOM group，and 75%（3/4）in DSS+AOM+high fat diet group.However，there were no significant differences in the rate of atypical hyperplasia between DSS and DSS+AOM groups，DSS+high fat diet and DSS+AOM+high fat diet groups，DSS and DSS+high fat diet groups，and DSS+AOM and DSS+AOM+high fat diet groups（allP＞0.05）.The histopathological score and the disease activity index in DSS+high fat diet and DSS+AOM+high fat diet groups were higher than those in DSS and DSS+AOM groups（P＜0.05）.The IL?6 level in DSS+ high fat diet and DSS+AOM+high fat diet groups was higher than that in DSS and DSS+AOM groups，but the difference was not statistically signifi?cant（P＞0.05）.Conclusion High fat diet may be one of the stimulating factors of UC and atypical hyperplasia.

high fat diet；ulcerative colitis；atypical hyperplasia；interleukin?6

R574.62

A

0258-4646（2017）03-0232-06

10.12007/j.issn.0258?4646.2017.03.010

沈陽(yáng)市科技計(jì)劃（F13?316?1?40）

周鳳（1991-），女，醫(yī)師，碩士.

劉維新，E-mail：weixinliu@yahoo.com

2016-07-05

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