補(bǔ)體反應(yīng)基因-32在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義

謝英娜

補(bǔ)體反應(yīng)基因-32在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)及臨床意義

謝英娜

目的 探討補(bǔ)體反應(yīng)基因-32（RGC-32）在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)情況，并分析其臨床意義。方法 選取2012年12月至2015年12月沈陽(yáng)市第九人民醫(yī)院收治的結(jié)腸癌患者80例為研究對(duì)象，癌組織標(biāo)本均采用免疫組化SP法檢測(cè)RGC-32表達(dá)，觀(guān)察不同腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及不同TNM分期RGC-32的陽(yáng)性表達(dá)情況。結(jié)果 高中分化者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率均低于低分化者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率均低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 RGC-32可作為結(jié)腸癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)指標(biāo)及靶向治療新突破。

補(bǔ)體反應(yīng)基因-32；結(jié)腸癌；分化程度；病理檢查

【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2017.01.050

結(jié)腸癌是目前臨床上最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤之一，本病發(fā)病隱匿，臨床癥狀不明顯，一旦發(fā)病多數(shù)處于中晚期，故本病病死率較高，且發(fā)病后患者的生命質(zhì)量相對(duì)較差[1]。既往研究證實(shí)[2-4]，結(jié)腸癌的發(fā)病與多種致癌基因存在一定的相關(guān)性，其中補(bǔ)體反應(yīng)基因-32（RGC-32）作為補(bǔ)體激活相關(guān)基因，表達(dá)于多種實(shí)體惡性腫瘤中[5]。在結(jié)腸癌發(fā)病過(guò)程中，RGC-32主要通過(guò)促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞增殖、遷移與血管生成而發(fā)病。然而，RGC-32在結(jié)腸癌發(fā)病中的具體機(jī)制目前尚未完全闡明，尤其是其促進(jìn)惡性腫瘤發(fā)展的分子機(jī)制有待進(jìn)一步研究[6]。為更好地闡明RGC-32基因與結(jié)腸癌之間的相關(guān)性，本研究采用免疫組化檢測(cè)RGC-32在結(jié)腸癌中的表達(dá)情況，以分析RGC-32與結(jié)腸癌發(fā)生及發(fā)展的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年12月至2015年12月沈陽(yáng)市第九人民醫(yī)院收治的結(jié)腸癌患者80例為研究對(duì)象，均經(jīng)病理組織活檢確診，且預(yù)計(jì)生存時(shí)間在3個(gè)月以上，均接受手術(shù)治療并留取術(shù)中標(biāo)本送病理檢查，排除合并全身多處轉(zhuǎn)移、嚴(yán)重心、肺功能障礙、嚴(yán)重肝腎功能障礙、凝血功能障礙、精神疾病者、預(yù)計(jì)生存時(shí)間1個(gè)月以?xún)?nèi)者及拒絕參加本研究者；所有患者均簽署了知情同意書(shū)，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。其中男25例，女15例，年齡35～60歲，平均（45.2±2.6）歲；分化程度：高中分化40例，低分化40例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例；TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期40例，Ⅲ+Ⅳ期40例。

1.2 方法 所有患者標(biāo)本均采用免疫組化SP法進(jìn)行檢測(cè)，且均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，試劑盒購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)公司，其中兔抗人RGC-32多抗（濃度1:100）購(gòu)自Santa Cruz公司，設(shè)立RGC-32強(qiáng)陽(yáng)性者為陽(yáng)性對(duì)照組，使用PBS緩沖液者為陰性組。通過(guò)雙盲法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并選取每張病理切片中的5個(gè)高倍視野，由具有5年以上病理診斷經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師觀(guān)察。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 無(wú)染色為0分，淺黃色染色為1分，棕黃色染色為2分，棕褐色染色為3分。如未見(jiàn)細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中有棕黃色顆粒者為無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞，標(biāo)記為0分；細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中棕黃色顆粒＜10％者標(biāo)記為1分；細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中棕黃色顆粒10％～50％者為2分；細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核中棕黃色顆粒＞50％者為3分。以上兩者的乘積＞2分則視為RGC-32陽(yáng)性，否則評(píng)定為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同腫瘤分化程度RGC-32陽(yáng)性情況比較 高中分化患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率均低于低分化患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 不同腫瘤分化程度RGC-32陽(yáng)性情況比較

2.2 是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RGC-32陽(yáng)性情況比較 存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率均低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的RGC-32陽(yáng)性情況比較

2.3 不同TNM分期RGC-32陽(yáng)性情況比較 TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 不同TNM分期RGC-32陽(yáng)性情況比較

3 討論

城市男性結(jié)腸癌的發(fā)病率更高，在全球范圍內(nèi)每年約新增100萬(wàn)結(jié)腸癌患者，其中約50％的患者死亡。目前，結(jié)腸癌的基本病因尚未闡明[7]。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌發(fā)病可能與攝入高脂肪、高熱量食物有關(guān)[8]。早期結(jié)腸癌主要以手術(shù)治療為主，晚期結(jié)腸癌多以化療、放療、生物療法等綜合保守治療為主。導(dǎo)致結(jié)腸癌患者死亡的最關(guān)鍵原因是腫瘤轉(zhuǎn)移，故如何做到早診斷、早治療是提高其臨床療效的關(guān)鍵[9]。近年，關(guān)于RGC-32與惡性腫瘤的相關(guān)性逐漸成為腫瘤研究的重點(diǎn)及熱點(diǎn)，越來(lái)越多的基礎(chǔ)研究提示，RGC-32是一種多腫瘤相關(guān)性原癌基因，其體內(nèi)表達(dá)與多種實(shí)體腫瘤發(fā)病存在相關(guān)性[10]。RGC-32陽(yáng)性對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖起到雙重效應(yīng)，其在正常表達(dá)時(shí)具有一定抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，一旦發(fā)生異常表達(dá)則會(huì)顯著促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)，進(jìn)而激活腫瘤細(xì)胞無(wú)序增殖與分化，其在惡性腫瘤的發(fā)生繁殖中具有十分重要的作用[11]。

既往研究證實(shí)，RGC-32在結(jié)腸、前列腺、膀胱及乳腺的惡性腫瘤中均存在顯著陽(yáng)性表達(dá)[12]。Guo等[13]采用RNA逆轉(zhuǎn)錄技術(shù)于體外行肺癌細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，RGC-32陽(yáng)性肺癌細(xì)胞的分化及增殖速度顯著加快，侵襲性增強(qiáng)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)此類(lèi)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期分化停滯，細(xì)胞凋亡顯著增加，故證實(shí)RGC-32可參與肺癌的發(fā)生及發(fā)展，進(jìn)而為肺癌的臨床治療提供新的思路。RGC-32在乳頭狀瘤及導(dǎo)管上皮不典型增生等乳腺癌的癌前病變組織中呈明顯陽(yáng)性表達(dá)，且在乳腺乳頭狀瘤及導(dǎo)管上皮不典型增生患者中表達(dá)水平顯著高于正常乳腺組織，尤其在晚期乳腺癌惡性腫瘤細(xì)胞中，RGC-32的表達(dá)水平顯著高于癌前病變組織及早期乳腺癌惡性腫瘤細(xì)胞，故認(rèn)為RGC-32與乳腺癌的發(fā)病存在相關(guān)性。盡管RGC-32在多種惡性腫瘤細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá)，且在腫瘤的發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮極其重要的作用，但目前對(duì)于結(jié)腸癌與RGC-32之間的相關(guān)性研究較少。

本研究發(fā)現(xiàn)，高中分化者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率均低于低分化者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率均低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；TNM分期Ⅰ+Ⅱ期患者RGC-32乘積積分及RGC-32陽(yáng)性率低于TNM分期Ⅲ+Ⅳ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述結(jié)果均提示RGC-32在結(jié)腸癌中的表達(dá)水平是影響腫瘤分化程度、TNM分期及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要影響因素，RGC-32表達(dá)陽(yáng)性者，其腫瘤分化程度相對(duì)較低、容易出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移且腫瘤分期一般較晚，與Guo等[13]的研究結(jié)果相似。因此，RGC-32可以作為結(jié)腸癌患者預(yù)后的預(yù)測(cè)指標(biāo)及靶向治療新突破。

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