高效液相色譜—串聯(lián)質譜法在葡萄中的吡效隆和赤霉素測定中的應用

□ 周 萌 北京市海淀區(qū)疾病預防控制中心

高效液相色譜—串聯(lián)質譜法在葡萄中的吡效隆和赤霉素測定中的應用

□ 周 萌 北京市海淀區(qū)疾病預防控制中心

分析在對葡萄進行 效隆、赤霉素的測定中，將高效液相色譜—串聯(lián)質譜法應用所取得的效果，希望能為食品安全的鑒定提供幫助。將樣品體積為4︰1的乙 和濃度為0．5%的甲酸水溶液進行混合，混合后對混合溶劑進行提取，通過SPE小柱進行凈化，之后通過AGILENT SB-C18色譜柱分離，其流速為每分鐘0．3 mL，最后應用高效液相色譜—串聯(lián)質譜法展開檢測。檢測結果顯示：在良好的檢測條件之下，兩種化合物的檢測范圍為2．0～100 μg/L，其內線性關系好，（相關系數＞0．999）。其中， 效隆檢出限為0．5 μg/L，定量限為2．0 μg/L，回收率為91．9%～95．4%；相對標準差為4．0%～7．2%；而赤霉素檢出限為0．3 μg/L，定量限為1．0 μg/L，回收率為90．5%～94．3%；相對標準差為3．1%～7．0%，達到了檢測所需的要求。在對葡萄進行 效隆、赤霉素的測定之中，高效液相色譜—串聯(lián)質譜法能夠取得較佳的臨床檢驗效果，可應用于食品的檢測中。

葡萄； 效??；高效液相色譜；赤霉素

吡效隆、赤霉素是一種植物生長調節(jié)劑，最常見于農業(yè)生產之中，使用之后能夠使得果品變得膨大[1]?，F今很多的研究，更加側重于研究赤霉素、吡效隆的機理以及使用，但是卻少見吡效隆和赤霉素在果蔬殘留中的相關檢測[2]。本文分析在對葡萄進行吡效隆、赤霉素的測定之中，將高效液相色譜—串聯(lián)質譜法應用所取得的效果，作出的研究如下。

1 檢驗

1.1 儀器設備以及實驗試劑

本次實驗選用了高分離度快速液相色譜系統(tǒng)（型號為：AGLIENT RLC1200）、METTLER TOLEDO 公司生產的電子天平、IKA公司生產的渦旋混合器、安捷倫科技公司生產的三重串聯(lián)四極桿質譜儀（型號為：6410B）、內切式均漿機、離心機、超聲波儀器以及OA公司生產的氮吹儀等設備。而實驗試劑中，選用了德國公司生產的濃度超過98%的吡效隆和赤霉素，乙腈、甲酸、甲酸銨以及甲醇均為美國天地試劑公司生產的色譜純，費羅門公司生產的SPE小柱，葡萄樣品購于農貿市場。

1.2 配置溶液

取10 mg的吡效隆和赤霉素，吡效隆通過乙腈進行溶解，其定容為100 mL。赤霉素通過體積為1︰1、濃度為0.1%的甲酸水溶液—乙腈進行溶解，其定容為100 mL，標準儲備液為100 mg/L。通過體積為4︰1、濃度為0.1%的甲酸水溶液—乙腈 進行逐級稀釋，配合成100.0、20.0、10.0、50.0、5.0 μg/L以及2.0 μg/L的混合溶液。

1.3 對樣品進行處理

將100 g葡萄樣品通過果汁機進行破碎，破碎后取5 g的樣品，將5 g樣品加入5 mL的（體積為4︰1，濃度為0.1%）甲酸水溶液—乙腈之中，進行1 min的勻漿，通過超聲進行8 min的提取，之后在10 000 r/min的條件下進行5 min的離心，取5 mL的上清液。通過5 mL的乙腈將SPE小柱進行活化，然后在取5 mL濃度為0.1%的甲酸水溶液進行平衡。將5 mL的上清液過SPE小柱，通過5 mL濃度為0.1%的甲酸水溶液進行淋洗之后將其抽干。之后通過5 mL的乙腈進行洗脫，于40 ℃以下的環(huán)境中，通過N2將洗脫液吹干，將1 mL的初始流動相進行0.5 min的超聲溶解，最后經過過濾后等待檢測。

1.4 條件分析

色譜條件分析：AGILENT SB-C18色譜柱流動相A和流動相B分別為：濃度為0.5%的甲酸水溶液和甲醇。臺階體度的進行洗脫，0～2 min，20%B；3～6 min，90%B。每分鐘0.3 mL的流速，40 ℃的柱溫以及5 μL的進樣量。

質譜條件分析：在MRM模式之下通過ESI源，4 000 V的毛細管電壓，350 ℃的干燥氣溫度，10 L/min的干燥氣流量，275.9 KPa的霧化壓力。

2 結果

檢測結果顯示：在良好的檢測條件之下，兩種化合物的檢測范圍為2.0～100 μg/L，其內線性關系好，（相關系數>0.999）。其中，吡效隆檢出限為0.5 μg/L，定量限為2.0 μg/L，回收率為91.9%～95.4%；相對標準差為4.0%～7.2%；而赤霉素檢出限為0.3 μg/L，定量限為1.0 μg/L，回收率為90.5%～94.3%；相對標準差為3.1%～7.0%，達到了檢測所需的要求。

3 結論

高效液相色譜—串聯(lián)質譜法能夠在赤霉素以及吡效隆的檢測之中，能夠取得較佳的臨床檢驗效果。不僅能夠檢測出其殘留量并進行色譜條件和質譜條件的優(yōu)化，還具有檢出限低、具有快速、定性等特征，能夠滿足實驗檢測的需求[3]。在本次檢測結果中，吡效隆檢出限為0.5 μg/L，定量限為2.0 μg/L，回收率為91.9%～95.4%；相對標準差為4.0%～7.2%；而赤霉素檢出限為0.3 μg/L，定量限為1.0 μg/L，回收率為90.5%～94.3%；相對標準差為3.1%～7.0%，達到了檢測所需的要求。言之，在對葡萄進行吡效隆、赤霉素的測定中，高效液相色譜—串聯(lián)質譜法能夠取得較佳的臨床檢驗效果。

[1]梁志剛．QuEChERS-高效液相色譜-串聯(lián)質譜法快速測定蘋果中赤霉素的殘留量[J]．現代農業(yè)科技，2016，10(8)：265-266．

[2]胡秀卿，朱亞紅，張昌朋，等．超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法分析 氧菌在葡萄果實和園地土壤中的消解動態(tài)[J]．果樹學報，2016，13(05)：624-628．

[3]蔣黎艷，趙其陽，龔蕾，等．超高效液相色譜串聯(lián)質譜法快速檢測柑中的5種鏈格 霉毒素[J]．分析化學，2015，27(12)：1851-1858．