微生物檢驗(yàn)結(jié)果的主要影響因素及質(zhì)量控制策略研究

唐穎蕾

摘 要：探究微生物檢驗(yàn)結(jié)果的主要影響因素及質(zhì)量控制策略。方法：取4株念珠菌，沙保式固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，選擇不同的PH、接種密度、葡萄糖濃度和溫度，探究檢驗(yàn)結(jié)果影響因素及控制策略。結(jié)果：pH在5-6時(shí)，念珠菌生長(zhǎng)情況最佳，接種密度方面，在3.3×108生長(zhǎng)狀況最佳，在3.5mg/L以內(nèi)的環(huán)境下，葡萄糖濃度對(duì)念珠菌的生長(zhǎng)并無(wú)影響。高溫可以促進(jìn)白色念珠菌向著菌絲方向發(fā)展，而較低的溫度則向著酵母的形態(tài)發(fā)展。結(jié)論：微生物檢驗(yàn)結(jié)果影響因素主要包括pH、接種密度以及溫度。且人員因素、操作規(guī)范性因素及標(biāo)本因素對(duì)結(jié)果具有直接的影響，需要結(jié)合實(shí)際情況，制定針對(duì)性的質(zhì)量控制策略。

關(guān)鍵詞：質(zhì)量控制 影響因素 檢驗(yàn) 微生物 結(jié)果

引 言

臨床診斷感染性疾病最為有效且準(zhǔn)確的方式之一則為微生物檢驗(yàn)，此方式為臨床診治感染性疾病提供了科學(xué)性依據(jù)，但因病原微生物存在多個(gè)種類，且體積較小，檢查程度復(fù)雜且繁瑣，加之各檢驗(yàn)工作人員工作素質(zhì)和責(zé)任心參差不齊，檢驗(yàn)過(guò)程中，操作不夠規(guī)范，無(wú)法確保標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量等因素，均會(huì)導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生誤差，較大程度地影響到微生物檢驗(yàn)結(jié)果和質(zhì)量。為更好地將微生物檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性提高，為診治感染性疾病提供有效依據(jù)。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

（1）取4株念珠菌，來(lái)源于患者的尿液、糞便、陰道拭子以及痰液。（2）培養(yǎng)基選擇沙保式固體培養(yǎng)基。配方為0.3g葡萄糖、10mL的吐溫80/15g大米、2.5mL的0.5%的洗衣粉。（3）接種液選擇白金耳菌落，37oC下培養(yǎng)24h，加入3mL無(wú)菌蒸餾水。

1.2研究方法

（1）pH影響，運(yùn)用酸度計(jì)調(diào)整PH，分別調(diào)整到3、3.5、4.5、5.5、6.5、7和7.5，高壓滅菌接種培養(yǎng)20h。（2）接種密度影響。濃度調(diào)整到108芽生孢子/mL，取10μL懸液，分別接種30μL（3.3×108）、50μL（3.3×108）、100μL（3.3×108）、200μL（3.3×108）和400μL（3.3×108）。（3）葡萄糖濃度影響。選擇葡萄糖調(diào)節(jié)濃度，分別設(shè)計(jì)為0.3g、0.5g、1g、1.5g、2g、2.5g、3g和3.5g。（3）溫度的影響。分別放置在37oC和27oC培養(yǎng)20h。

2結(jié)果

（1）pH在5-6時(shí)，念珠菌生長(zhǎng)情況最佳，且pH在3.0-7.5時(shí)，生長(zhǎng)情況呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)。（2）接種密度方面，在3.3×108生長(zhǎng)狀況最佳，而隨著密度的不斷增加，生長(zhǎng)情況逐漸降低。（3）在葡萄糖濃度方面，在3.5mg/L以內(nèi)的環(huán)境下，葡萄糖濃度對(duì)念珠菌的生長(zhǎng)并無(wú)影響。（4）在溫度的影響下，高溫可以促進(jìn)白色念珠菌向著菌絲方向發(fā)展，而較低的溫度則向著酵母的形態(tài)發(fā)展。

3討論

3.1影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果的主要因素

（1）人員因素。微生物檢驗(yàn)工作要求操作人員具備較高專業(yè)技術(shù)水平，檢驗(yàn)人員需要根據(jù)形態(tài)學(xué)、生理學(xué)反應(yīng)，檢驗(yàn)每一個(gè)微生物標(biāo)本。就目前來(lái)看，我國(guó)大部分醫(yī)院均引進(jìn)了全自動(dòng)、半自動(dòng)化儀器，但是還有一些微生物檢驗(yàn)人員在微生物檢驗(yàn)過(guò)程中，由于自身缺乏操作經(jīng)驗(yàn)、專業(yè)知識(shí)以及判斷能力，對(duì)微生物檢驗(yàn)結(jié)果的精準(zhǔn)性造成一定影響。

（2）操作不規(guī)范。與生化檢驗(yàn)比較，微生物檢驗(yàn)工作需要檢驗(yàn)人員對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行準(zhǔn)確判斷，以便開展下一步檢驗(yàn)工作，所以微生物檢驗(yàn)人員的操否規(guī)范，對(duì)于微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有著直接影響。檢驗(yàn)人員在進(jìn)行常規(guī)檢驗(yàn)工作時(shí)，如果出現(xiàn)操作不合理狀況，會(huì)對(duì)分析環(huán)節(jié)的準(zhǔn)確性造成嚴(yán)重影響，如藥敏試驗(yàn)、鑒定、染色、細(xì)菌培養(yǎng)以及接種等。

（3）標(biāo)本因素。主要包括：①標(biāo)本運(yùn)送過(guò)程中，是否在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成送檢工作，若是超過(guò)規(guī)定時(shí)間，極易造成標(biāo)本污染；②采集血液標(biāo)本的處理是否合理，處理?xiàng)l件是否過(guò)于劇烈或者是否溫和等，這些因素都會(huì)對(duì)血漿測(cè)定值造成影響；③對(duì)于細(xì)菌血標(biāo)本的采集，是否在受檢者使用抗生素之前；④微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集是否規(guī)范化，其采集量、盛裝容器、采集部位、采集時(shí)間、抗凝劑使用等是否合理。

（4）其他因素。主要包括：①培養(yǎng)基的選取是否與相關(guān)要求相符；②微生物檢驗(yàn)方案是否符合相關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)；③實(shí)驗(yàn)室條件是否與相關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)相符。

3.2微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制的主要方法

（1）保證無(wú)菌間和無(wú)菌操作臺(tái)的環(huán)境衛(wèi)生狀況。檢驗(yàn)所使用的設(shè)備，需每日進(jìn)行清潔，其清潔范圍還包含傳遞窗、緩沖間、無(wú)菌間等，每日完成清潔后，需把傳遞窗、緩沖間、無(wú)菌間的紫外燈打開半小時(shí)，給予殺菌處理。無(wú)菌間無(wú)需擺放和微生物檢驗(yàn)操作無(wú)關(guān)系的設(shè)備和物品，操作中需及時(shí)處理廢棄物、樣品等，且操作臺(tái)需時(shí)刻保持整潔。

（2）監(jiān)控減壓環(huán)境，規(guī)范檢驗(yàn)操作流程。為了確保生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的安全性，需要對(duì)其進(jìn)行24小時(shí)監(jiān)控，避免不相關(guān)人員進(jìn)入而對(duì)樣本造成影響。并且，檢驗(yàn)人員在進(jìn)行生物檢驗(yàn)時(shí)，要按照標(biāo)準(zhǔn)的流程進(jìn)行操作。在進(jìn)入到實(shí)驗(yàn)室前就要按規(guī)定穿著消毒隔離服，戴手套等，操作的每一步驟都要按規(guī)范流程操作，操作要合理，要杜絕因操作錯(cuò)誤而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果出錯(cuò)的情況。定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室的廢棄樣品和藥品進(jìn)行妥善處理，無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室要定期進(jìn)行消毒，從而最大可能地確保檢驗(yàn)環(huán)境的安全性。

（3）其他因素控制策略。要完善培養(yǎng)基的選擇方法、制定檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，并且嚴(yán)格的控制實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境。通過(guò)質(zhì)量控制，必然可以降低微生物檢驗(yàn)的誤差率。

4結(jié)論

總之，影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素較多，pH、接種密度以及溫度是主要影響因素，同時(shí)人員素質(zhì)、檢驗(yàn)規(guī)范性以及標(biāo)本因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果同樣具有直接的影響。需要結(jié)合實(shí)際情況，制定針對(duì)性的質(zhì)量控制策略。

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