生物素對(duì)蛋雞代謝基因表達(dá)的調(diào)控及日糧推薦用量

黨曉鵬 ，劉梅

（1.陜西納米維生素工程研究中心，陜西 西安 710018；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110161）

生物素對(duì)蛋雞代謝基因表達(dá)的調(diào)控及日糧推薦用量

黨曉鵬1，劉梅2

（1.陜西納米維生素工程研究中心，陜西 西安 710018；2.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110161）

生物素是蛋雞正常生長(zhǎng)發(fā)育和維持高產(chǎn)性能的必需營(yíng)養(yǎng)素，作為蛋雞體內(nèi)重要生物代謝酶的輔助因子在蛋雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝和細(xì)胞因子基因表達(dá)調(diào)控起著廣泛而又非常關(guān)鍵的作用，是蛋雞蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪代謝等必不可少的微量營(yíng)養(yǎng)素。隨著蛋雞育種和集約化養(yǎng)殖設(shè)施設(shè)備的迅猛發(fā)展，蛋雞日糧中生物素的營(yíng)養(yǎng)需要量不斷增高，目前推薦集約化高產(chǎn)蛋雞配合飼料中生物素的添加量為150～250mg/噸。

生物素；蛋雞基因表達(dá)；用量

生物素(biotin)，又稱維生素H、輔酶R、維生素B7，屬B族水溶性維生素。生物素是蛋雞蛋白質(zhì)、碳水化合物和脂肪等正常代謝不可或缺的物質(zhì)，是蛋雞生長(zhǎng)發(fā)育和維持高產(chǎn)性能的必需營(yíng)養(yǎng)素[1]。近年來(lái),生物素已成為蛋雞維生素營(yíng)養(yǎng)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。

早在1936年，兩位德國(guó)科學(xué)家Kogl和Tonnis就從鴨蛋黃中分離提取出一種酵母生長(zhǎng)所必需的結(jié)晶物質(zhì)，稱之為生物素。20世紀(jì)40年代初，歐美科學(xué)家分別明確了生物素的化學(xué)結(jié)構(gòu)，1944年Harris等完成了生物素的人工化學(xué)合成。生物素廣泛分布于動(dòng)植物中,天然存在的生物素主要以與其它分子結(jié)合的形式存在。生物素的化學(xué)結(jié)構(gòu)中包括一個(gè)含五個(gè)碳原子的羧基側(cè)鏈和兩個(gè)五元雜環(huán),在體內(nèi)由側(cè)鏈上的羧基與酶蛋白的賴氨酸殘基結(jié)合,發(fā)揮輔酶作用。生物素有8種不同的異構(gòu)體,其中只有D-生物素具有生物活性。生物素在動(dòng)物肝、腎、酵母（2mg/kg）及牛乳中含量較多。生物素容易同雞蛋清中一種蛋白質(zhì)（抗生物素蛋白，avidin）結(jié)合，大量食用生蛋白可阻礙生物素的吸收從而導(dǎo)致生物素缺乏癥，如體重減輕、脫毛、皮炎、腳趾開裂、蹄病等。生物素在蛋白質(zhì)、脂肪合成、糖質(zhì)新生等生化反應(yīng)過(guò)程中均有重要作用。生物素是多種羧化酶的輔酶，在羧化酶反應(yīng)中起CO2載體的作用，是生物體固定CO2的重要因素。生物素是許多需要ATP羧化反應(yīng)中羧基的載體。羧基與生物素雙環(huán)系統(tǒng)上的一個(gè)氮原子結(jié)合，如丙酮酸羧化酶催化丙酮酸羧化成草酰乙酸的反應(yīng)。

生物素純品為無(wú)色長(zhǎng)針狀結(jié)晶，具有尿素與噻吩相結(jié)合的駢環(huán)，并帶有戊酸側(cè)鏈。極微溶于水（22mg/100ml水，25℃）和乙醇（80mg/100ml，25℃），較易溶于熱水和稀堿液，不溶于其它常見(jiàn)的有機(jī)溶劑。通常條件下生物素相當(dāng)穩(wěn)定，但強(qiáng)酸、強(qiáng)堿和甲醛可破壞生物素,酸敗脂肪及膽堿也可使其失活，紫外線照射也能破壞生物素活性。生物素有結(jié)合和游離兩種存在形式,結(jié)合的生物素不能被蛋雞直接利用,必須在腸道經(jīng)生物素降解酶分解,釋放出游離生物素后,方能被吸收利用。生物素在小腸前段以完整分子形式與特異性載體結(jié)合被腸粘膜上皮細(xì)胞主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)吸收，吸收后的生物素進(jìn)入肝門脈循環(huán)，體內(nèi)各種組織中以肝臟和腎臟中含量最高[3]。蛋雞通常不能降解生物素分子中的環(huán)結(jié)構(gòu)，大部分在線粒體中通過(guò)側(cè)鏈的β氧化降解為雙降生物素，與體內(nèi)多余的生物素一起隨尿液排出。至于小腸內(nèi)未被吸收的生物素以及腸道遠(yuǎn)端微生物自身合成的生物素，到了大腸部位也通過(guò)與小腸相類似的機(jī)理被機(jī)體吸收[2]。

上世紀(jì)90年代以前，國(guó)際生物素市場(chǎng)一直由包括德國(guó)巴斯夫、瑞士羅氏、日本住友株式會(huì)社和武田化學(xué)等幾家大公司所壟斷。自1949年羅氏集團(tuán)采用Sternbach合成法，在世界首次實(shí)現(xiàn)D－生物素工業(yè)化合成生產(chǎn)以來(lái)，各國(guó)化學(xué)家對(duì)生物素合成方法開展了大量的研究，但作為工業(yè)化合成生產(chǎn)路線，均無(wú)明顯進(jìn)展。Sternbach法工業(yè)化生產(chǎn)中存在著硫代反應(yīng)不完全、反應(yīng)條件苛刻、原料難獲取、成本高，脫芐收率低等弊端。多年來(lái)各國(guó)科學(xué)家雖試圖改進(jìn)該方法，但進(jìn)展緩慢。為找出一條生產(chǎn)成本低、產(chǎn)品收率高的D－生物素合成新路徑，復(fù)旦大學(xué)陳芬兒教授課題組獨(dú)辟蹊徑，刻苦攻關(guān)，終于在2001年開發(fā)成功以不對(duì)稱催化合成為核心技術(shù)的D－生物素不對(duì)稱合成新工藝。該技術(shù)以富馬酸為起始原料，經(jīng)氯代、相轉(zhuǎn)移催化芐胺化和關(guān)環(huán)制得環(huán)酸，經(jīng)脫水、不對(duì)稱甲酯化、還原和硫代制得關(guān)鍵手性合成硫內(nèi)酯，再經(jīng)格式反應(yīng)、羧化、脫水、立體專一性還原成D－雙芐生物素，進(jìn)而經(jīng)脫芐、開環(huán)、再關(guān)環(huán)即得D－生物素。新的生物素工業(yè)化合成技術(shù)，原料易得且價(jià)格低廉，反應(yīng)條件溫和，生物素產(chǎn)品生產(chǎn)成本不到國(guó)外公司的三分之一。這一生物素合成新工藝，結(jié)束了我國(guó)生物素長(zhǎng)期依賴進(jìn)口的局面，并牢牢確立了我國(guó)生物素產(chǎn)品在國(guó)際市場(chǎng)上的話語(yǔ)權(quán)，使我國(guó)一舉成為全球最大的生物素生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó)。

1 生物素對(duì)蛋雞營(yíng)養(yǎng)代謝和細(xì)胞因子基因表達(dá)的調(diào)控

生物素對(duì)蛋雞營(yíng)養(yǎng)代謝基因表達(dá)的調(diào)控，主要是通過(guò)作為多種營(yíng)養(yǎng)代謝酶輔助因子來(lái)實(shí)現(xiàn)的。生物素是羧化和羧基轉(zhuǎn)移酶系的輔酶,是羧基轉(zhuǎn)運(yùn)的載體,這些酶系在蛋雞體內(nèi)有轉(zhuǎn)移羧基和固定二氧化碳的作用。其中乙酰輔酶A羧化酶(ACC)、丙酮酸羧化酶 (PC)、丙酰輔酶A羧化酶(PCC)和3-甲基丁烯酰輔酶A羧化酶(MCC)是四種代表性的羧化酶。隨著基因調(diào)控和分子生物技術(shù)的發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)生物素不僅具有這些傳統(tǒng)典型的酶輔助因子功能，而且還在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上影響蛋雞營(yíng)養(yǎng)代謝基因的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)對(duì)相關(guān)營(yíng)養(yǎng)代謝的調(diào)控。

1.1 對(duì)蛋白質(zhì)和核酸代謝基因表達(dá)的調(diào)控 生物素在蛋白質(zhì)合成、氨基酸脫氨、氨基甲酞轉(zhuǎn)移以及亮氨酸、色氨酸分解代謝中起重要的作用,也是多種氨基酸轉(zhuǎn)移脫羧過(guò)程所必需。生物素缺乏會(huì)影響亮氨酸轉(zhuǎn)化為草酰乙酸的脫氨反應(yīng),體內(nèi)瓜氨酸合成鳥氨酸能力降低，氨基酸結(jié)合進(jìn)入肝臟、腸粘膜、胰腺和皮膚等組織蛋白質(zhì)的過(guò)程被明顯抑制。若及時(shí)補(bǔ)充生物素,便能促進(jìn)氨基酸的結(jié)合。生物素缺乏會(huì)損害組蛋白與DNA的互作,這與組蛋白的磷酸化、乙酰化和甲基化等作用有關(guān)。生物素缺乏還會(huì)導(dǎo)致肝臟鳥氨酸轉(zhuǎn)甲氨酰酶活性及其mRNA豐度降低，鳥氨酸轉(zhuǎn)甲氨酰酶在精氨酸代謝和尿素循環(huán)中起著很重要的作用。DNA芯片研究表明,生物素對(duì)外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞的多個(gè)基因表達(dá)均有影響。生物素酰腺苷酸是羧化全酶合成過(guò)程中的中間產(chǎn)物，生物素酰腺苷酸的合成是由羧化全酶合成酶催化的。目前認(rèn)為生物素酰腺苷酸是通過(guò)一種尚不清楚的機(jī)理對(duì)可溶性鳥苷酸環(huán)化酶進(jìn)行活化。鳥苷酸環(huán)化酶的活化使環(huán)鳥苷酸量增加，從而刺激蛋白激酶G產(chǎn)生信號(hào)傳導(dǎo)，蛋白磷酸化得到活化，使編碼羧化全酶合成酶、乙酰輔酶A羧化酶，丙酰輔酶A羧化酶基因轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng)。如果生物素缺乏或羧化全酶合成酶的活性降低這些基因的轉(zhuǎn)錄活性將受損。

生物素對(duì)嘌呤等核苷酸的合成也起著關(guān)鍵的作用。生物素缺乏將會(huì)損害組蛋白和DNA的互作，這與組蛋白的磷酸化、乙?；图谆扔嘘P(guān)。生物素放射性標(biāo)記后發(fā)現(xiàn)位于細(xì)胞核內(nèi)的生物素與組蛋白共價(jià)形成核蛋白，并通過(guò)磷酸化、甲基化來(lái)調(diào)控轉(zhuǎn)錄、基因沉默和DNA修復(fù)等代謝過(guò)程。

1.2 對(duì)碳水化合物代謝基因表達(dá)的調(diào)控 在碳水化合物代謝中，生物素酶完成脫羧和羧化反應(yīng)。這些反應(yīng)包括：丙酮酸向草酰乙酸的可逆轉(zhuǎn)化，蘋果酸轉(zhuǎn)化成為丙酮酸，琥珀酸和丙酸的相互轉(zhuǎn)化，草酰琥珀酸轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸以及脫羧作用的其它反應(yīng)。生物素具有固定二氧化碳的生化作用。生物素缺乏降低了葡萄糖的利用率，糖酵解反應(yīng)受阻，因?yàn)樯锼厥翘墙徒膺^(guò)程中葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶活性激活的關(guān)鍵因子。而生物素通過(guò)誘導(dǎo)胰島素分泌進(jìn)行碳水化合物代謝調(diào)節(jié)的機(jī)制主要有兩條途徑：一是生物素-葡萄糖激酶通路。葡萄糖激酶作為糖酵解過(guò)程核心酶之一，促進(jìn)糖酵解反應(yīng)生成丙酮酸。在丙酮酸脫氫酶的作用下，生成乙酰輔酶A，進(jìn)入三羧酸循環(huán)，生成ATP來(lái)影響胰島素的分泌，葡萄糖激酶活性在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平得到調(diào)控。生物素主要在轉(zhuǎn)錄階段調(diào)控其表達(dá)，并對(duì)葡萄糖激酶mRNA的表達(dá)呈現(xiàn)出雙向調(diào)節(jié)作用，即生物素短期作用產(chǎn)生刺激作用，長(zhǎng)期作用則呈現(xiàn)抑制作用。但生物素通過(guò)葡萄糖激酶促進(jìn)胰島素分泌，只在生物素灌流的初期發(fā)生。通過(guò)第二信使鳥苷酸環(huán)化酶(cGMP)激活cGMP依賴性的蛋白激酶，增加葡萄糖激酶mRNA的轉(zhuǎn)錄表達(dá)需要2h，而6h后葡萄糖激酶活性才呈現(xiàn)大幅度提高；二是生物素-丙酮酸羧化酶通路。丙酮酸羧化酶作為依賴生物素羧化酶系之一，在糖異生和三羧酸循環(huán)過(guò)程中有重要作用。丙酮酸羧化酶在胰小島里并沒(méi)有發(fā)揮糖異生的作用，因其中磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的mRNA的表達(dá)及酶的活性很低甚至沒(méi)有，生物素同時(shí)也能大大降低其他組織中烯醇式丙酮酸羧激酶的活性，而磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶是糖異生過(guò)程不可或缺的關(guān)鍵酶之一，所以丙酮酸羧化酶催化生成的草酰乙酸只能進(jìn)入三羧酸循環(huán)，從而產(chǎn)生大量的ATP。隨著ATP、ADP能量狀態(tài)的改變，激活細(xì)胞能量壓力感受器5-AMP激活性蛋白激酶，通過(guò)一系列的轉(zhuǎn)錄因子 SREBP-lc、ChREBP、NAMPT、PGC-ld 和mTORCl等來(lái)調(diào)控碳水化合物的代謝。對(duì)于離體培養(yǎng)的非生物素缺乏小鼠胰島細(xì)胞，10～1000nmol/L的生物素可以增加葡萄糖激酶活性和其mRNA豐度；同時(shí)胰島素的表達(dá)和分泌隨生物素的添加而提高。相反，生物素缺乏，胰臟葡萄糖激酶活性和mRNA的豐度降低至對(duì)照組的一半。中間代謝中另一個(gè)重要的蛋白質(zhì)——胰島素受體也受生物素的調(diào)節(jié)。有研究發(fā)現(xiàn)生物素在轉(zhuǎn)錄后提高了胰島素受體水平。

1.3 對(duì)脂肪代謝基因表達(dá)的調(diào)控 在脂肪代謝中，乙酰輔酶A羧化酶催化乙酰輔酶A的羧化，其前體為丙二酰輔酶A，這一化合物的作用是能使脂肪酸鏈延長(zhǎng)，隨后由細(xì)胞多酶復(fù)合體和脂肪酸合成酶將丙二酰輔酶A合成棕櫚酸。生物素也是合成長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸的必須因子，并與膽固醇的代謝有關(guān)。脂肪代謝過(guò)程中需要乙酰輔酶A羧化酶(ACC)、脂肪合成酶(FAS）、6-磷酸葡萄糖脫氫酶以及硬脂酰脫氫酶等重要酶的參與。而這些酶mRNA表達(dá)受到轉(zhuǎn)錄因子同醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBPlc)調(diào)控。在脂肪合成代謝中，生物素通過(guò)SREBPlc激活乙酰輔酶A羧化酶，加速脂肪合成。而作為脂酸合成的限速酶，乙酰輔酶A羧化酶負(fù)反饋降低線粒體內(nèi)脂酰肉堿轉(zhuǎn)移酶的活性，抑制脂肪氧化分解。同時(shí)也激活6-磷酸葡糖脫氫酶和硬脂酰脫氫酶，促進(jìn)不飽和脂肪酸的合成和脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)。葡萄糖是脂肪合成最主要的底物，因此參與糖酵解的酶也可被看作是脂肪合成代謝的延伸。生物素一定程度上提高了糖酵解過(guò)程中葡萄糖激酶的活性，同時(shí)生物素通過(guò)刺激胰島素的分泌，激活葡萄糖載體轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖進(jìn)質(zhì)膜，協(xié)同葡萄糖磷酸化。葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6磷酸刺激了ACC和FAS mRNA的表達(dá)，從而促進(jìn)脂肪的合成。在脂肪分解代謝中，人們發(fā)現(xiàn)F0X01基因能抑制糖酵解和脂肪合成相關(guān)基因的表達(dá)。肝細(xì)胞中過(guò)氧化物酶增殖體受體抑制脂肪氧化和生酮作用，有利于脂肪合成酶和硬脂酰脫氫酶的合成。生物素衍生物抑制了過(guò)氧化物酶增殖體受體 mRNA在脂肪組織中的表達(dá)及脂肪的生成，但生物素在不同組織中對(duì)過(guò)氧化物酶增殖體受體表達(dá)可能有所不同。生物素作為乙酰輔酶A羧化酶的輔酶參與脂肪酸的合成,催化乙酰CoA生成丙二酸CoA。該反應(yīng)為脂肪酸合成的第一步，然后經(jīng)過(guò)細(xì)胞質(zhì)多酶復(fù)合體、脂肪酸合成酶，由丙二酰CoA合成棕櫚酸。在脂肪酸碳鏈的延長(zhǎng)反應(yīng)中，丙二酰ACP作為二碳單位的供給體參與反應(yīng)，而丙二酰ACP來(lái)源于丙二酰CoA。生物素缺乏，脂類代謝異常,引起機(jī)體的脂肪酸組成發(fā)生變化，飽和脂肪酸合成減少，三酰甘油合成增多,使肝、腎脂肪提高。蛋雞日糧缺乏生物素，會(huì)使肝臟組織中棕櫚酸去飽和作用速率提高，棕櫚油酸增加，硬脂酸減少。生物素也是長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸正常合成和脂肪酸代謝的必需物質(zhì)。生物素還與乙酰膽堿的合成和膽固醇的代謝有關(guān)，缺乏生物素會(huì)降低蛋雞從亞油酸合成花生四烯酸的能力,導(dǎo)致亞油酸在體內(nèi)累積。研究發(fā)現(xiàn)生物素和血清總脂、游離脂肪酸、甘油三酯和膽固醇負(fù)相關(guān)，和總磷脂濃度正相關(guān)。生物素具有降低血脂和膽固醇的作用，醫(yī)學(xué)上用于治療高甘油三酯血癥等疾?。桓邉┝康纳锼啬芙档脱逯懈视腿蜆O低密度脂蛋白，但總膽固醇濃度不受影響。生物素對(duì)脂肪酸的組成也有重要影響。生物素能提高脂肪酸的去飽和速率，添加生物素有利于亞麻油酸和花生四烯酸的生成，減少了硬脂肪的含量。生物素缺乏時(shí)，去飽和酶活性降低，不飽和脂肪酸合成減少。

1.4 對(duì)細(xì)胞因子基因表達(dá)的調(diào)控 生物素可以在基因轉(zhuǎn)錄水平影響一些細(xì)胞因子的基因表達(dá)。添加生物素可以促進(jìn)蛋雞脾臟細(xì)胞IFN-y和IL基因的表達(dá)，顯著提高其表達(dá)產(chǎn)物mRNA的表達(dá)水平[4]。受生物素影響的這些細(xì)胞因子在免疫功能中非常重要。如干擾素具有廣譜、間接非特異性的抗病毒活性，可誘導(dǎo)抗病毒基因如腺嘌呤核苷酸等的表達(dá)。IL-2可活化CD4和CD8 T細(xì)胞，促進(jìn)細(xì)胞因子產(chǎn)生。刺激NK細(xì)胞增殖、活化，誘導(dǎo)LAK細(xì)胞產(chǎn)生。促進(jìn)B細(xì)胞活化、增殖及產(chǎn)生抗體，激活單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，具有顯著的抗腫瘤作用，并能抵抗病毒性感染。IL-1使Th淋巴細(xì)胞活化成熟，使B淋巴細(xì)胞克隆擴(kuò)增，激活NK細(xì)胞，在炎癥反應(yīng)中結(jié)合巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞。另外，IL-1還誘導(dǎo)肝細(xì)胞合成急性期蛋白、成骨細(xì)胞增殖及成骨細(xì)胞，產(chǎn)生前列腺素。IL-4可介導(dǎo)B淋巴細(xì)胞的激活和B淋巴細(xì)胞的類別轉(zhuǎn)換。添加生物素可顯著提高增殖細(xì)胞核抗原基因的表達(dá)水平，顯著提高血液中B淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率，以及脾臟中T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率[5]。生物素缺乏將降低蛋雞免疫器官中的DNA含量和DNA的周轉(zhuǎn)代謝速度。添加生物素，能明顯提高免疫器官的DNA含量，促進(jìn)DNA的周轉(zhuǎn)代謝。

1.5 對(duì)其它營(yíng)養(yǎng)物代謝基因表達(dá)的調(diào)控 生物素作為輔酶成分還參與其它微量營(yíng)養(yǎng)素營(yíng)養(yǎng)代謝的基因表達(dá)調(diào)控，包括維生素B6、維生素B12、維生素C、葉酸、泛酸代謝以及溶菌酶的活化等。除此之外，生物素對(duì)角蛋白合成和表皮細(xì)胞增值分化的基因表達(dá)過(guò)程也有著極為重要的作用，能夠促進(jìn)角質(zhì)生成，影響表皮細(xì)胞的增值和分化，可有效預(yù)防蛋雞腳趾開裂出血以及皮炎、脫毛等病癥的發(fā)病率。

2 生物素在蛋雞日糧中的推薦用量

由于生物素在飼料原料中廣泛分布,而且蛋雞腸道微生物能夠合成生物素,過(guò)去人們?cè)J(rèn)為蛋雞飼料中無(wú)需額外添加。隨著蛋雞育種和集約化養(yǎng)殖設(shè)備與環(huán)境的迅猛發(fā)展和變化,生物素對(duì)蛋雞基因表達(dá)調(diào)控的影響日趨重要。美國(guó)NRC和世界著名動(dòng)物維生素營(yíng)養(yǎng)研究機(jī)構(gòu)，近年來(lái)均對(duì)蛋雞生物素營(yíng)養(yǎng)需要量進(jìn)行上調(diào)。美國(guó)NRC推薦蛋雞生物素添加量為100～150mg/噸，帝斯曼公司OVN（2016版）蛋雞飼料生物素的推薦劑量為100～150mg/噸，泰高公司（2016 版）蛋雞飼料生物素的推薦劑量為120～150mg/噸。另外，筆者統(tǒng)計(jì)了國(guó)內(nèi)外畜牧行業(yè)期刊（2000～2016年）共計(jì)93篇有關(guān)蛋雞維生素營(yíng)養(yǎng)論文中蛋雞配合飼料的生物素使用量，經(jīng)過(guò)計(jì)算求得其平均值為112mg/噸，整體水平偏低。目前，對(duì)于集約化養(yǎng)殖的高產(chǎn)蛋雞品種，建議采用我國(guó)農(nóng)業(yè)部《飼料添加劑安全使用規(guī)范》的推薦用量 150～250mg/噸。

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豬場(chǎng)、雞場(chǎng)未批先建能否補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)？環(huán)保部是這樣說(shuō)的……

未批先建能否補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)？環(huán)保部：環(huán)保法生效前項(xiàng)目應(yīng)限期補(bǔ)辦

對(duì)于“未批先建”企業(yè)能否補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)的問(wèn)題，從環(huán)保部環(huán)評(píng)司獲悉，新《環(huán)保法》生效前的“未批先建”項(xiàng)目應(yīng)限期補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)；新環(huán)保法生效后的，不再適用限期補(bǔ)辦手續(xù)。

2016年9月1日起實(shí)施的新《環(huán)評(píng)法》，取消了有關(guān)“未批先建”項(xiàng)目補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)的規(guī)定。對(duì)于“未批先建”項(xiàng)目接受環(huán)保部門依法處罰后是否可以辦理環(huán)評(píng)手續(xù)的問(wèn)題，實(shí)際操作中存在爭(zhēng)論。

一種主要觀點(diǎn)認(rèn)為，新《環(huán)保法》和《環(huán)評(píng)法》取消了“限期補(bǔ)辦手續(xù)”的規(guī)定。

因此，對(duì)“未批先建”建設(shè)項(xiàng)目，給予行政處罰后，建設(shè)單位已經(jīng)付出了應(yīng)有的違法代價(jià)，不應(yīng)再要求建設(shè)單位補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)，而應(yīng)通過(guò)排污許可證的核發(fā)等手段，將該建設(shè)項(xiàng)目納入日常環(huán)保監(jiān)管。

另一種觀點(diǎn)認(rèn)為，雖然法律取消了“限期補(bǔ)辦手續(xù)”的規(guī)定，但并不意味著補(bǔ)辦環(huán)評(píng)手續(xù)的完全廢止。

考慮到實(shí)踐中涉及“未批先建”的建設(shè)項(xiàng)目量大面廣，排污許可證的核發(fā)工作剛剛開始起步，不允許補(bǔ)辦環(huán)境影響評(píng)價(jià)手續(xù)，將會(huì)導(dǎo)致大量“未批先建”建設(shè)項(xiàng)目的法律地位處在不明確的狀態(tài)，也將給后續(xù)的排污許可證核發(fā)、竣工環(huán)境保護(hù)驗(yàn)收等制度的執(zhí)行帶來(lái)障礙，可能直接影響環(huán)保執(zhí)法。

環(huán)保部環(huán)評(píng)司司長(zhǎng)崔書紅在接受采訪時(shí)介紹，目前傾向于區(qū)分兩類情況處理。

一是對(duì)2015年1月1日新《環(huán)保法》生效前，建設(shè)單位未依法報(bào)批建設(shè)項(xiàng)目環(huán)境影響報(bào)告書、報(bào)告表，或者未重新報(bào)批或者報(bào)請(qǐng)重新審核環(huán)境影響報(bào)告書、報(bào)告表，擅自開工建設(shè)的建設(shè)項(xiàng)目，根據(jù)“法不溯及既往”原則，依照原環(huán)境保護(hù)法和原環(huán)境影響評(píng)價(jià)法執(zhí)行，應(yīng)當(dāng)限期補(bǔ)辦環(huán)境影響評(píng)價(jià)手續(xù)。

二是對(duì)2015年1月1日新《環(huán)保法》生效后，包括2016年9月1日新《環(huán)評(píng)法》生效后的“未批先建”項(xiàng)目，不再適用“限期補(bǔ)辦手續(xù)”。但是，建設(shè)單位在接受環(huán)保部門處罰后，主動(dòng)補(bǔ)辦環(huán)境影響報(bào)告書、報(bào)告表報(bào)請(qǐng)環(huán)保部門審批的，環(huán)保部門應(yīng)當(dāng)受理。對(duì)符合環(huán)境影響評(píng)價(jià)審批要求的，依法作出審批決定；對(duì)不符合環(huán)境影響評(píng)價(jià)審批要求的，不予批準(zhǔn)，并依法責(zé)令恢復(fù)原狀。崔書紅還表示，環(huán)保部將在與相關(guān)方面溝通后印發(fā)文件予以規(guī)范。相關(guān)要求以正式印發(fā)的文件為準(zhǔn)。

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1673-1085（2017）11-0051-05

2017-10-07

黨曉鵬，男(1966.5-)，陜西富平人。1989年畢業(yè)于西北農(nóng)林科技大學(xué)，農(nóng)學(xué)碩士,高級(jí)獸醫(yī)師職稱。曾獲省部級(jí)科技獎(jiǎng)四項(xiàng)，發(fā)表科技論文四十余篇，參編專著三部?，F(xiàn)任陜西省納米維生素工程研究中心副主任,西安市納米維生素工程實(shí)驗(yàn)室主任，陜西金冠牧業(yè)有限公司技術(shù)總監(jiān)。主要從事納米維生素和畜禽復(fù)合維生素產(chǎn)品研發(fā)和技術(shù)服務(wù)工作。