通過血細胞分析復檢規(guī)則發(fā)現(xiàn)1例EDTA抗凝劑引起的血小板假性減少病例

徐麗霞

通過血細胞分析復檢規(guī)則發(fā)現(xiàn)1例EDTA抗凝劑引起的血小板假性減少病例

徐麗霞

目的探討血細胞復檢規(guī)則的重要性及血小板假性減少的原因及處理方法。方法通過工作中遇到的1例血小板假性減少的病例，根據(jù)血細胞分析復檢規(guī)則，制作血細胞涂片顯微鏡復檢及使用不同的抗凝劑處理檢測血小板。結(jié)果血涂片鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板聚集成堆，EDTA抗凝劑采血管檢測血常規(guī)血小板異常減低，肝素抗凝管檢測血常規(guī)血小板正常。結(jié)論復檢規(guī)則在血常規(guī)檢測中起著重要的作用。通過復檢規(guī)則能避免單純依靠儀器造成的誤診和漏診，采用血涂片復檢和更換肝素抗凝劑等方法可發(fā)現(xiàn)EDTA抗凝劑引起的血小板聚集，糾正由EDTA抗凝劑引起的血小板假性減少。

復檢規(guī)則；血小板假性減少；EDTA抗凝劑

隨著現(xiàn)代化儀器的不斷更新和應(yīng)用，血細胞分析儀早已取代了手工計數(shù)法被廣泛的應(yīng)用到臨床實驗室中，血細胞分析儀具有快速，準確，便捷的特點，特別是在人員緊張，標本量日益增大的情況下，更是給臨床試驗室?guī)砹藰O大的幫助。但是血細胞分析儀也存在一定的不足，比如有時候也會有一些假陽性結(jié)果，需要手工推片來復檢，以免造成漏診和誤診。為此，國際血液學復檢專家組（International Consensus Croup for hematology Review）在2005年制定了自動血細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)的復檢標準，該標準被國際實驗血液學協(xié)會（ISLH）作為一個推薦方法介紹給全球使用各種自動化血液分析系統(tǒng)的專業(yè)人士參考[1]，這就是41條復檢規(guī)則。在血常規(guī)檢測中經(jīng)常會遇到血小板減少的病例，根據(jù)國際血液學復檢專家組制定的41條復檢規(guī)則，對于血小板低于50×109/L的標本要采取復檢，通常采用血涂片復檢的方法，對于嚴重的血小板減少的病例，或者懷疑是EDTA抗凝劑引起的血小板假性減少的病例，涂片鏡檢能發(fā)現(xiàn)血小板聚集成團，重點觀察片子的邊緣和尾部，要更換枸櫞酸鈉抗凝管或肝素抗凝管采血，重新檢測。

本文就臨床工作中遇到的1例血小板減少的病例通過復檢規(guī)則發(fā)現(xiàn)是血小板假性減少，并進一步驗證是EDTA依賴性血小板假性減少來闡述血常規(guī)復檢的重要性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

臨床工作中遇到的1例血小板假性減少的病例，2017年4月2日，患者孫某，男，70歲，血小板9×109/L，其余指標都正常，復查結(jié)果血小板12×109/L。和臨床醫(yī)生及患者溝通得知患者以前去過多家醫(yī)院檢查過多次均是血小板減低，但始終未查出原因，因為血小板減低已經(jīng)超出復檢規(guī)則，按復檢規(guī)則要推片鏡檢，制作血涂片經(jīng)瑞-姬染色后顯微鏡下可見血小板聚集成團。

1.2 儀器與試劑

儀器日本Sysmex公司生產(chǎn)的XT-2000i全自動血細胞分析儀及原裝配套試劑和質(zhì)控物，質(zhì)控采用高、中、低3個水平測試，Olympus顯微鏡。

試劑染色液貝索瑞-姬氏染色液，抗凝劑：EDTAK2抗凝肝素抗凝。

1.3 方法

取EDTA抗凝管中的血液制作血涂片，經(jīng)瑞-姬染色后鏡檢，換肝素抗凝管重新采血做血常規(guī)檢測，把EDTA抗凝管的標本放37℃水浴箱中孵育1小時后上機檢測。

2 結(jié)果

在顯微鏡下鏡檢血涂片可見血小板聚集成堆，肝素抗凝血檢測血小板102×109/L，EDTA抗凝管37℃水浴之后檢測血小板仍然是減低的。

3 討論

血小板是臨床出血性疾病的重要參數(shù)之一，對臨床醫(yī)生判斷患者情況有重要的指導意義，目前血細胞分析儀計數(shù)血小板受到多種因素的影響，紅細胞碎片、白細胞碎片、小紅細胞增多，導致血小板假性增高，另外血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，血小板碎片和EDTA抗凝劑誘導的血小板聚集又可導致儀器測定血小板降低。根據(jù)國際血液學復檢專家組制定的41條復檢規(guī)則，對于血小板低于50×109/L的標本要采取復檢，通常采用血涂片復檢的方法，復檢規(guī)則在血常規(guī)檢測中起著重要的作用。通過復檢規(guī)則能避免單純依靠儀器造成的誤診和漏診。本文就是通過復檢規(guī)則發(fā)現(xiàn)了1例EDTA-K2依賴性血小板假性減少病例。

按照國際血液學標準化委員會的建議，1.5～2.2 mg的EDTA-K2抗凝1 ml的全血可以抑制血小板聚集，從而達到抗凝的目的，但有極少數(shù)人的血小板在用EDTA抗凝時，反而會出現(xiàn)血小板聚集，這種EDTA依賴性假性血小板減少可能與血漿中存在的抗血小板抗體和抗心磷脂抗體等自身抗體有關(guān)。EDTA-K2可使血液發(fā)生免疫介導，產(chǎn)生冷抗血小板抗體，使血小板發(fā)生凝集現(xiàn)象，這種EDTA依賴的冷抗血小板自身抗體還能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同時這種與血小板結(jié)合后的自身抗Fc端又可與淋巴細胞或單核細胞膜上Fc受體結(jié)合，出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象[2]，由于EDTA-K2可引起血小板的聚集或發(fā)生衛(wèi)星現(xiàn)象，分析儀不能識別凝集的血小板，導致血小板計數(shù)偏低；當血小板聚集成堆與白細胞體積接近時，可被分析儀當作白細胞進行計數(shù)，這就造成了血小板假性減少和白細胞假性增多。

有報道稱EDTA-K2作為抗凝劑，保持紅細胞，白細胞，血小板形態(tài)不發(fā)生改變已被廣泛應(yīng)用并作為標準執(zhí)行，但EDTA-K2作為抗凝劑的確有促使和誘導血小板發(fā)生凝集，從而導致血小板計數(shù)假性低下的問題偶有出現(xiàn)[3]。有文獻報道EDTA依賴性假性血小板減少EDTA（PTCP）發(fā)生率為0.09%～0.21%[4]，雖然發(fā)生率不高，但應(yīng)加以重視，2007年周小棉等[5]報道能用其它抗凝劑，如枸櫞酸鹽、NaF代替EDTA能得到準確的血小板計數(shù)。也可用肝素抗凝管，本文中的病例重新采血用肝素抗凝管后血小板計數(shù)為102×109/L，血小板假性減少得以糾正。血涂片形態(tài)檢查，也是最基本最重要的實驗室檢查。對血小板減少的病例，重點關(guān)注血小板數(shù)量、大小、形態(tài)、聚集狀態(tài)[6]。當發(fā)現(xiàn)患者血小板計數(shù)值偏低，患者沒有任何出血傾向，此外，可引起血小板減少的疾病的相關(guān)檢查指標在正常范圍之內(nèi)，應(yīng)高度懷疑為EDTA-PTCP[7]。工作中發(fā)現(xiàn)血小板計數(shù)減少、直方圖異常或異常報警時，操作人員應(yīng)首先觀察標本是否有凝集[8]。對于EDTA依賴性假性血小板減少的患者，要告知患者以后檢查血常規(guī)時要和臨床醫(yī)生說明情況，采取不同的抗凝劑檢測血常規(guī)。由于這種假性血小板減低會導致臨床增加不必要的輔助檢查，甚至引起臨床誤診、誤治，帶給患者心理上的壓力及身體上的痛苦，導致醫(yī)療資源的浪費。因此，提高假性血小板減少癥的檢測水平，必要時涂片鏡檢，已受到檢驗醫(yī)生的重視，作為檢驗人員，在臨床檢驗工作中更要做到認真仔細，嚴格按照血常規(guī)復檢規(guī)則去做。對于臨床上無任何出血癥狀與體征，出凝血時間正常而血小板明顯減少者，建議涂片鏡檢觀察是否有血小板聚集，如果有血小板聚集，懷疑為EDTA抗凝劑誘導的血小板假性減少，同時換肝素抗凝管重新采血檢測。涂片鏡檢對于EDTA抗凝劑誘導的血小板聚集有著重要的價值。依據(jù)復檢規(guī)則復檢后避免了誤診，提高了檢測的準確性。

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One Case of Thrombocytopenia Caused by EDTA Anticoagulants Were Found by Blood Cell Analysis Re-examination Rule

XU Lixia Department of Laboratory, TCM Hospital of Wangqing County,Wangqing Jilin 133200, China

ObjectiveTo investigate the importance of blood cell re examination rules and the causes and treatment of false reduction of platelets.MethodsA case of thrombocytopenia was encountered in the work. According to the blood cell analysis re examination rules, blood smear microscopy was used to recheck and use di ff erent anticoagulants to detect platelets.Results Platelet aggregation was detected by blood smear microscopy.Routineblood routine test, blood platelet abnormality and blood routine examination of heparin anticoagulant tube were detected by EDTA anticoagulant.ConclusionThe review rules play an important role in routine blood test. By reviewing the rules,he misdiagnosis and missed diagnosis can be avoided by relying solely on the instrument. Platelet aggregation induced by EDTA anticoagulant can be detected by blood smear reexamination and replacement of heparin anticoagulant. Correction of Pseudo thrombocytopenia by EDTA anticoagulants.

re-examination rule; platelet pseudo reduction; EDTA anticoagulant

R446

A

1674-9308（2017）24-0048-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.24.023

吉林省汪清縣中醫(yī)院檢驗科，吉林 汪清 133200