化學(xué)

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王和興，周穎，姜慶五

化學(xué)

超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)分析奶粉中9種雌激素

王和興，周穎，姜慶五

近幾年來不斷發(fā)生的奶粉安全事件致使奶粉的安全問題備受關(guān)注。雌激素作為內(nèi)分泌干擾物之一，有研究表明兒童性早熟，男性前列腺癌，婦女乳腺癌和子宮癌發(fā)病率的上升與食品中雌激素的殘留有關(guān)。我國農(nóng)業(yè)部在2002年第193號(hào)公告里禁止性激素和具有雌激素樣作用的物質(zhì)在食品動(dòng)物中的使用。但是在經(jīng)濟(jì)利益驅(qū)動(dòng)下，違規(guī)濫用這類物質(zhì)的情況仍然很多；同時(shí)有研究表明：奶牛在養(yǎng)殖過程中，可能會(huì)引起牛奶中內(nèi)源性雌激素的升高。因此，為保障食品的安全，內(nèi)源性和外源性雌激素的同時(shí)檢測(cè)就顯得很重要。食品中雌激素常用的檢測(cè)方法是氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）。GC-MS 雖然分離效果好，但是雌激素?fù)]發(fā)性低，需要衍生化，操作繁瑣。LC-MS因?yàn)殪`敏度高，選擇性好，樣品前處理相對(duì)簡(jiǎn)單而成為雌激素檢測(cè)的主要方法。超高效液相色譜（UPLC）相對(duì)普通LC分離效果好，分析速度快，非常適合于多組分快速檢測(cè)。飛行時(shí)間質(zhì)譜（TOF-MS）能夠進(jìn)行分子量的精確測(cè)定，適合復(fù)雜基質(zhì)中組分的準(zhǔn)確定性，因此UPLC-TOF-MS成為復(fù)雜基質(zhì)中多組分殘留的有效分析方法。本研究通過對(duì)樣品提取條件、除脂凈化條件以及色譜和質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，建立了奶粉中9種雌激素（雌三醇、β-雌二醇、α-雌二醇、馬烯雌甾酮、17α-乙炔雌二醇、雌酮、己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚）的超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-QTOF-MS）分析方法。樣品用水溶解，乙腈超聲提取雌激素，NaCl快速分層，上清液用正己烷除脂，NH2柱凈化，經(jīng)Waters ACQUITY UPLC HSS T3色譜柱（100mm×2.1mm×1.8μm）分離，采用電噴霧離子源（ESI）負(fù)離子模式，對(duì)9種雌激素進(jìn)行 Q-TOF分析。保留時(shí)間和分子離子與子離子的精確分子量測(cè)定共同定性，9種雌激素的分子離子測(cè)定質(zhì)量數(shù)與理論值誤差在－1.0～0.9 mDa之間，而子離子測(cè)定質(zhì)量數(shù)與理論質(zhì)量數(shù)之間的誤差僅為－0.9～0.5 mDa?；|(zhì)匹配內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，內(nèi)標(biāo)物為β-雌二醇-d3。方法：分析時(shí)間為13min，線性范圍為0.001～0.5 mg/L；檢出限（S/N＝3）為0.11～0.30 μg/kg，定量限（S/N＝10）為 0.37～1.0 μg/kg。在添加水平分別為1，2，10和100 μg/kg時(shí)，平均回收率為 61%～137%，RSD為1.0%～22.6%。采用本方法對(duì)市售的7種奶粉進(jìn)行檢測(cè)，均未檢出上述9種雌激素。本方法實(shí)現(xiàn)了奶粉中9種雌激素的快速提取和基線分離，質(zhì)譜母離子和特征子離子的精確質(zhì)量數(shù)測(cè)定，增強(qiáng)了本方法在復(fù)雜基質(zhì)中雌激素的定性能力，結(jié)合基質(zhì)匹配內(nèi)標(biāo)法準(zhǔn)確定量，能夠滿足奶粉樣品中雌激素多殘留快速分析的要求。

來源出版物：分析化學(xué),2011,39(9):1323-1328

入選年份：2015

快速高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中5類33種藥物殘留

羅輝泰，黃曉蘭，吳惠勤，等

摘要：目的：近年來，抗生素（如四環(huán)素類、喹諾酮類、磺胺類、磺胺增效劑等）及三苯甲烷類染料常被作為抗菌藥物用于水產(chǎn)寄生蟲病的防治或作為消毒劑用于延長(zhǎng)鮮活水產(chǎn)品壽命，這些藥物殘留在水產(chǎn)品中并通過食物鏈在人體內(nèi)蓄積，將對(duì)人體健康造成嚴(yán)重威脅。因此，建立一種水產(chǎn)品中藥物多殘留同時(shí)快速測(cè)定的方法顯得非常迫切。方法：5g勻質(zhì)試樣置50 mL聚四氟乙烯離心管中，加入100 μL濃度為50 μg/L的內(nèi)標(biāo)溶液，加入2 mL 0.1 mol/L Na2EDTA-Mcllvaine緩沖溶液，混勻，再加入10 mL乙腈，渦旋混勻2min后，超聲提取10min，4000 r/min離心10min，上清液轉(zhuǎn)移至100 mL燒杯；向殘?jiān)尤?g酸性氧化鋁，充分?jǐn)噭颍尤?0 mL乙腈，合并上清液，于45℃水浴氮吹濃縮至約2 mL，濃縮液轉(zhuǎn)移至1.0 mL刻度的梨形瓶中，用乙腈洗滌燒杯多次，洗滌液合并入梨形瓶中，繼續(xù)濃縮至1.0 mL。加入1.0 mL 50%（體積比）乙腈水溶液，混勻，正己烷除脂，下層清液經(jīng)RRLC分離，在電噴霧離子源的正離子模式下以動(dòng)態(tài)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（DMRM）模式對(duì)33種待測(cè)物進(jìn)行定性定量分析。結(jié)果：（1）質(zhì)譜分析：所有待測(cè)物均在 ESI正離子模式下獲得[M＋H]＋母離子，每個(gè)化合物均有兩個(gè)特征碎片離子作為定性定量子離子。采用DMRM方式采集數(shù)據(jù)，儀器可根據(jù)每個(gè)化合物的保留時(shí)間動(dòng)態(tài)分配采集時(shí)間，僅對(duì)保留時(shí)間窗口內(nèi)的目標(biāo)化合物進(jìn)行檢測(cè)，極大提高了采集效率。（2）色譜分析：以Hypersil BDS C8柱（100mm×2.1mm，2.4μm）為分析柱，在流動(dòng)相A為0.4%（體積比）甲酸+10mmol/L乙酸銨的水溶液，流動(dòng)相 B為含 0.4%（體積比）甲酸的乙腈條件下，所有待測(cè)物均獲得了良好峰形及分離。（3）樣品預(yù)處理：采用 Na2EDTA-Mcllvaine緩沖溶液-乙腈作為提取溶劑，不但改善了四環(huán)素類藥物的回收率，還沉淀了大多數(shù)蛋白質(zhì)，實(shí)現(xiàn)同時(shí)提取與凈化，有效縮短樣品處理時(shí)間。（4）方法驗(yàn)證：33種藥物在相應(yīng)的濃度范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，在三個(gè)不同濃度添加水平下，平均回收率為63.6%～115.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為4.6%～14.6%，檢出限（LOD，S/N≥3）和定量限（LOQ，S/N≥10）分別為 0.1～2.0 μg/kg及0.5～5.0 μg/kg。（5）實(shí)際樣品測(cè)定：采用本法對(duì)鯇魚、鳙魚、鰻魚、淡水蟹及東風(fēng)螺共5種水產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，其中有3個(gè)鰻魚樣品檢出隱色孔雀石綠（含量在2.2～3.1 μg/kg之間）及恩諾沙星（含量在3.3～13.3 μg/kg之間）外，其余樣品均未檢出33種藥物殘留。結(jié)論：本研究建立的可同時(shí)提取并測(cè)定水產(chǎn)品中四環(huán)素類、喹諾酮類、磺胺類、磺胺增效劑和三苯甲烷類共 5類33種藥物殘留的 RRLC-MS/MS法具有簡(jiǎn)便快速、靈敏可靠等優(yōu)點(diǎn)。樣品實(shí)測(cè)結(jié)果表明，該法非常適用于水產(chǎn)品中藥物多殘留的同時(shí)快速定性定量測(cè)定。

來源出版物：分析化學(xué),2012, 40(2):273-279

入選年份：2015