麻杏二陳特稟咳顆粒鎮(zhèn)咳、抗炎和祛痰作用實(shí)驗(yàn)研究

馬家寶，王力寧，楊正騰

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023）

麻杏二陳特稟咳顆粒鎮(zhèn)咳、抗炎和祛痰作用實(shí)驗(yàn)研究

馬家寶，王力寧，楊正騰

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023）

目的研究麻杏二陳特稟咳顆粒用于鎮(zhèn)咳、抗炎和祛痰的藥理作用。方法分別采用氨水引咳、二甲苯致小鼠耳廓腫脹和氣管酚紅排泄方法對麻杏二陳特稟咳顆粒鎮(zhèn)咳、抗炎和祛痰的藥理作用進(jìn)行研究。結(jié)果麻杏二陳特稟咳顆粒止咳作用顯著，高（40 g／kg）、中（20 g／kg）、低（10 g／kg）劑量均有藥效（P＜0.05或 P＜0.01），且高劑量作用優(yōu)于陽性藥；抗炎與祛痰的藥理作用只在高劑量時有所體現(xiàn)（P＜0.05）。結(jié)論麻杏二陳特稟咳顆粒鎮(zhèn)咳作用明顯，有一定的抗炎和祛痰作用。

麻杏二陳特稟咳顆粒；鎮(zhèn)咳；抗炎；祛痰

麻杏二陳特稟咳顆粒由麻杏二陳湯演變而來，原湯劑由炙麻黃、杏仁、細(xì)辛、射干、僵蠶、半夏、陳皮、茯苓、萊菔子和甘草10味中藥組方，是在古方小青龍湯合二陳湯加減基礎(chǔ)上創(chuàng)制的經(jīng)驗(yàn)方[1－2]，治療小兒特稟質(zhì)咳嗽（痰濕質(zhì)咳嗽）有顯著療效。因傳統(tǒng)湯劑受其自身服用不便和劑量定位不準(zhǔn)的限制，故顆粒劑型的衍生具有一定意義。該劑型既保留原處方的有效性，又符合小兒服藥特點(diǎn)，還便于攜帶與保存，同時提高了制劑穩(wěn)定性，可為廣大咳嗽患兒提供品質(zhì)優(yōu)良的純中藥制劑，臨床應(yīng)用前景廣闊，也可產(chǎn)生顯著的社會和經(jīng)濟(jì)效益。本研究中在確定其生產(chǎn)工藝的前提下，初步分析麻杏二陳特稟咳顆粒鎮(zhèn)咳、抗炎和祛痰的藥理作用，為新劑型的臨床前期研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器、動物與試藥

1.1.1 儀器

NE－C30型壓縮式吸入器（歐姆龍＜大連＞有限公司）；秒表；EL204型電子天平（梅特勒－托利多公司）；8 mm打孔器；UV2250型分光光度儀（日本島津公司）。一次性注射器（江西洪達(dá)醫(yī)療機(jī)械集團(tuán)有限公司）。

1.1.2 動物

昆明小鼠，300只，SPF級，雌雄各半，體質(zhì)量20～25g，購自廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，許可證號：SCXK桂 2014－001，飼養(yǎng)環(huán)境室溫為 24℃，相對濕度為68%。

1.1.3 試藥

樣品：處方組方10味中藥加水煎煮2次，第1次加8倍量水煎煮1.5 h，第2次加6倍量水煎煮1 h，濾過，合并濾液，濃縮至相對密度為1.10～1.20（60℃）的稠膏，放冷，加入95%乙醇使含醇量達(dá)到70%，靜止12 h，濾過，回收乙醇，濃縮為每1 mL含2 g生藥量的浸膏；阿司匹林腸溶片（青島黃海制藥有限責(zé)任公司）；麻杏止咳片（吉林天藥本草堂制藥有限公司）；濃氨水（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；酚紅試劑（啟東市名城化工有限公司）；氯化銨（成都科龍化工試劑廠）；0.9%氯化鈉注射液（昆明市宇斯藥業(yè)有限責(zé)任公司）；二甲苯（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 鎮(zhèn)咳作用試驗(yàn)[3]

選取昆明種小鼠100只，雌雄各半，恒溫恒濕條件下適應(yīng)飼養(yǎng)3 d。將小鼠隨機(jī)分成麻杏二陳特稟咳顆粒高劑量（40 g／kg）組(C1組)、中劑量（20 g／kg）組(C2組)、低劑量（10 g／kg）組(C3組)、麻杏止咳片（1.0 g／kg）陽性對照組(B組)、空白對照組(A組)，每組20只。給藥容量為每10 g體質(zhì)量0.2 mL?？瞻讓φ战M給予0.9%氯化鈉注射液等容量灌胃，各組連續(xù)灌胃7 d。于第7天進(jìn)行氨水引咳試驗(yàn)，前期禁食不禁飲12 h，末次灌胃給予相應(yīng)藥物1 h后，將小鼠放于500 mL燒杯中，內(nèi)置吸有0.2 mL濃氨水的棉球，觀察各組小鼠咳嗽的潛伏期及其3 min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。

1.2.2 抗炎作用試驗(yàn)[4－5]

選取昆明種小鼠100只，雌雄各半，恒溫恒濕條件下適應(yīng)飼養(yǎng)3 d。將小鼠隨機(jī)分成麻杏二陳特稟咳顆粒高劑量（40 g／kg）組(F1組)、中劑量（20 g／kg）組(F2組)、低劑量（10 g／kg）組(F3組)、阿司匹林腸溶片（0.2 g／kg）陽性對照組(E組)、空白對照組(D組)，每組20只。給藥容量為每 10 g體質(zhì)量 0.2 mL?？瞻讓φ战M給予0.9%氯化鈉注射液等容量灌胃，各組連續(xù)灌胃7 d。于第7天進(jìn)行抗炎試驗(yàn)，前期禁食不禁飲12 h，末次灌胃給予相應(yīng)藥物1 h后，用移液槍精密吸取二甲苯溶液，均勻涂抹于小鼠右耳正反兩面，每面10 μL。左耳不作處理。除空白對照組外，其余各組均涂抹致炎。30 min后，觀察小鼠右耳變化情況，將小鼠頸椎脫臼處死，沿其耳廓線剪下雙耳，去掉耳廓周圍毛發(fā)，將雙耳平放鋪開，用8 mm打孔器打下雙耳同一部位耳片，立即置于分析天平稱量，以避免炎癥區(qū)積水，造成試驗(yàn)誤差。以小鼠雙耳片質(zhì)量，以雙耳片質(zhì)量差為致炎腫脹程度。耳腫脹程度（mg）＝致炎側(cè)耳片質(zhì)量（右耳）－對側(cè)耳片質(zhì)量（左耳）。

1.2.3 祛痰作用試驗(yàn)[6－8]

選取昆明種小鼠100只，雌雄各半，恒溫恒濕條件下適應(yīng)飼養(yǎng)3 d。將小鼠隨機(jī)分成麻杏二陳特稟咳顆粒高劑量（40 g／kg）(I1組)、中劑量（20 g／kg）(I2組)、低劑量（10 g／kg）組(I3組)、氯化銨（0.3 g／kg）陽性對照組(H組)、空白對照組(G組)，每組20只。給藥容量為每10 g體質(zhì)量0.2 mL?？瞻讓φ战M給予0.9%氯化鈉注射液等容量灌胃，各組連續(xù)灌胃7 d。末次給予相應(yīng)藥物30 min后，每只小鼠腹腔注射5%酚紅0.6 mL，30 min后處死動物，剝離氣管，剪下甲狀腺軟骨至氣管分支處的一段，置有1 mL 5%NaHCO3的離心管中，用紫外分光光度計于550 nm波長下測定吸光度值。同時，精密稱取一定量酚紅，以5%NaHCO3溶解，制作酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線，帶入公式，計算每只小鼠的酚紅排泄量。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 鎮(zhèn)咳作用試驗(yàn)

結(jié)果見表1。

2.2 抗炎作用試驗(yàn)

結(jié)果見表2。

2.3 祛痰作用試驗(yàn)

結(jié)果見表3。

表1 麻杏二陳特稟咳顆粒對氨水引咳小鼠的鎮(zhèn)咳作用（±s，n＝20）

表1 麻杏二陳特稟咳顆粒對氨水引咳小鼠的鎮(zhèn)咳作用（±s，n＝20）

注：與A組比較， P＜0.01；與 B組比較， P＜0.01。

組別A組B組C1組C2組C3組劑量（g／kg）－1.0 40 20 10咳嗽潛伏期（s）18.9±6.6 41.2±11.2 59.7±9.5 40.7±17.4 43.3±14.7 3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)58.9±16.7 33.3±13.6 18.2±9.1 35.4±16.8 40.8±17.3

表2 麻杏二陳特稟咳顆粒對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（±s，n＝20）

表2 麻杏二陳特稟咳顆粒對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（±s，n＝20）

注：與D組比較， P＜0.05， P＜0.01。

表3 麻杏二陳特稟咳顆粒對小鼠氣管酚紅排泄量的影響（±s，n＝20）

表3 麻杏二陳特稟咳顆粒對小鼠氣管酚紅排泄量的影響（±s，n＝20）

注：與G組比較， P＜0.05， P＜0.01。

組別G組H組I1組I2組I3組劑量（g／kg）－0.5 40 20 10吸光度0.057±0.010 0.094±0.022 0.081±0.045 0.077±0.019 0.065±0.034酚紅排泄量（ g／mL）0.50±0.13 1.27±0.31 1.01±0.28 0.89±0.15 0.74±0.47

3 討論

麻杏二陳湯的小兒使用劑量為2 g／kg，考慮對小鼠的有效性，制作和選取了麻杏二陳特稟咳顆粒40，20，10 g／kg的藥物濃度，對鎮(zhèn)咳、抗炎和祛痰進(jìn)行了藥理研究，判定其藥效。

鎮(zhèn)咳試驗(yàn)中，麻杏二陳特稟咳顆粒高、中、低劑量均有療效，且高劑量效果優(yōu)于麻杏止咳片，考慮因其處方的組成不同而致。相比于麻杏止咳片，麻杏二陳特稟咳顆粒中的細(xì)辛能宣肺散寒，射干、僵蠶能解痙。

抗炎試驗(yàn)中，利用二甲苯致小鼠耳腫脹模型，其主要原理是使某些炎癥介質(zhì)如組胺、激肽和纖維蛋白溶解釋放，引起毛細(xì)血管通透性增加，炎癥細(xì)胞浸潤，造成耳部急性滲出性炎癥水腫[9－10]。試驗(yàn)結(jié)果顯示，僅高劑量有一定的抗炎作用，低、中劑量無抗炎效果。相比于陽性藥物，阿司匹林腸溶片可阻斷前列腺素轉(zhuǎn)化為花生四烯酸，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生而發(fā)揮較為具體的抗炎機(jī)制，麻杏二陳特稟咳顆粒的抗炎機(jī)理還有待確定。

祛痰試驗(yàn)中，麻杏二陳特稟咳顆粒高、中劑量有療效，高劑量和陽性藥比空白組療效明顯，低劑量酚紅排泄量雖有增加，但與空白組相比無明顯差異?？紤]其處方中半夏、陳皮和茯苓能燥濕化痰、健脾行水，萊菔子起到了化痰降逆之功效。

對于傳統(tǒng)中藥湯劑，一般都以水為提取溶劑。本試驗(yàn)中，在對麻杏二陳特稟咳顆粒劑型的研究中加入了有機(jī)溶劑乙醇的提取環(huán)節(jié)。隨著近幾年新科技的應(yīng)用及對中藥有效成分精確要求的提高，導(dǎo)致各種有機(jī)溶劑的提取方法逐漸占了上峰。相關(guān)研究也發(fā)現(xiàn)，有機(jī)溶劑的應(yīng)用不僅能使有效成分富集或得以分離提取，而且能增強(qiáng)療效[11－12]，同時配合顆粒劑型的使用，大大方便了患者。但本試驗(yàn)還缺乏對其相關(guān)特稟質(zhì)作用的研究，后續(xù)將進(jìn)一步從中醫(yī)有關(guān)特稟質(zhì)體質(zhì)類型中的濕熱質(zhì)、陽虛質(zhì)和氣虛質(zhì)展開探討。

[1]王力寧，馮春輝，陳金月，等.麻杏二陳湯煮散治療小兒特稟質(zhì)咳嗽的研究[J].中醫(yī)兒科雜志，2012，8（5）：32－35.

[2]楊正騰，王力寧，馬家寶.麻杏二陳湯的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2016，12（19）：57－58.

[3]王延文，舒 東.祛痰止咳丸止咳化痰作用實(shí)驗(yàn)研究[J].山西中醫(yī)，2015，31（1）：50－52.

[4]王 佩，劉曉昱.蟬貝口服液祛痰止咳抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用的研究[J].中國中醫(yī)藥科技，2011，18（3）：190－191.

[5]梁生林，梁 瓊，鐘衛(wèi)華，等.葒草提取物抗炎鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)研究[J].中草藥，2014，45（21）：3 132.

[6]張淑鋒.維藥溜果黑種草子鎮(zhèn)咳、祛痰、抗炎有效部位初步研究[D].烏魯木齊：新疆醫(yī)科大學(xué)，2010.

[7]柯昌毅.半夏5種不同溶劑提取物對小鼠祛痰鎮(zhèn)咳作用的研究[J].中國藥房，2012，23（39）：3 652－3 654.

[8]王小蘭，赫金麗，張國順，等.桑白皮水煎液及化學(xué)拆分組分止咳祛痰平喘作用研究[J].世界科學(xué)技術(shù)——中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2014，16（9）：1 951－1 955.

[9]徐文杰，趙 杰，周惠芳，等.不同配伍配比對麻黃甘草藥對有效成分含量及抗炎活性的影響[J].四川中醫(yī)，2012，30（10）：50－53.

[10]趙 杰，余林中，方 芳，等.麻黃－甘草藥對的抗炎作用及機(jī)制研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)，2012，18（15）：163－166.

[11]楊明華，毛培江，楊蘇蓓.浙產(chǎn)山茱萸水醇提取物毒性、藥效比較研究[J].中藥材，2006，29（6）：588.

[12]盧芳國，張世鷹，吳治諺，等.中藥煎煮的容器、溶媒、時間、火候因素[J].中醫(yī)雜志，2016，57（1）：78－80.

Antitussive，Anti－Inflammatory and Expectorant Pharmacological Effects of Maxing Erchen Tebingke Granules

Ma Jiabao，Wang Lining，Yang Zhengteng
（The First Affiliate Hospital of Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning，Guangxi，China 530023）

Objective To study the antitussive，anti－inflammatory and expectorant pharmacological effects of Maxing Erchen Tebingke Granules.Methods The antitussive，anti－inflammatory and expectorant effects of Maxing Erchen Tebingke Granules were studied by using ammonia－induced cough，xylene－induced mice auricle swelling and tracheal phenol red excretion.Results The antitussive effect was significant，with high dose（40 g／kg），medium dose（20 g／kg）and low dose（10 g／kg）all showing curative effect（P＜0.05 or P＜0.01），and the efficacy in the high dose group was better than that of the positive medicine；but the anti－inflammatory and expectorant effect only worked in the high dose group（P＜0.05）.Conclusion Maxing Erchen Tebingke Granules has obvious antitussive effect and also has certain anti－inflammatory and expectorant effect.

Maxing Erchen Tebingke Granules；antitussive；anti－inflammatory；expectorant

R285.5；R286

A

1006－4931(2016)24－0013－03

馬家寶，碩士研究生，研究方向?yàn)樗幬锓治?，（電子信箱?74632459＠qq.com；楊正騰（1970－），男，碩士研究生，副主任藥師，研究方向?yàn)樗幚韺W(xué)，本文通訊作者，（電子信箱）18776728630＠163.com。

2016－10－19)

廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目，項目編號：桂科攻1355004。