渾濁尿液標(biāo)本在U F-5 0 0 i分析儀上的應(yīng)用

梁朝坤

攀鋼集團(tuán)總醫(yī)院密地院區(qū)檢驗(yàn)科，四川攀枝花617063

渾濁尿液標(biāo)本在U F-5 0 0 i分析儀上的應(yīng)用

梁朝坤

攀鋼集團(tuán)總醫(yī)院密地院區(qū)檢驗(yàn)科，四川攀枝花617063

尿液分析是一項(xiàng)很常規(guī)的檢驗(yàn)，而目前自動(dòng)化尿液分析儀器也只能是起過篩作用，最終確認(rèn)有形成分還得以顯微鏡鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)。尿液中有形成分過多的標(biāo)本外觀往往呈渾濁狀態(tài)，用UF-500i檢測(cè)這些渾濁標(biāo)本往往會(huì)產(chǎn)生相互干擾或引起攜帶污染，合理處理渾濁的尿液標(biāo)本，可減少假陽(yáng)性的結(jié)果，降低顯微鏡復(fù)檢率，從而提高工作效率。

渾濁；尿液有形成分；攜帶污染

Sysmex UF-500i全自動(dòng)尿液有形成分分析儀是通過流式細(xì)胞術(shù)對(duì)尿液有形成分的電阻抗變化和熒光散射強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)和分析[1]，具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速、精密度高，人為偏差小、安全等優(yōu)點(diǎn)。雖然該儀器性能相比前幾代產(chǎn)品有所提高，但還是不能完全取代顯微鏡鏡檢，而顯微鏡雖然是尿液有形成分診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但畢竟使用顯微鏡鏡檢費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且由于檢驗(yàn)人員之間的差異，不利于檢驗(yàn)流程的標(biāo)準(zhǔn)化。所以清楚儀器的工作原理以及會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素后，檢測(cè)前合理處理一些“特殊”標(biāo)本，就能減少標(biāo)本本身對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響及干擾，從而提高工作效率。在工作過程中，也發(fā)現(xiàn)了一些問題，如當(dāng)尿液標(biāo)本中的有形成分濃度過高時(shí)，尿液外觀呈現(xiàn)出渾濁的狀態(tài)，檢測(cè)結(jié)果多會(huì)受到干擾出現(xiàn)假陽(yáng)性甚至出現(xiàn)攜帶污染。引起尿液標(biāo)本外觀渾濁的原因一般是因?yàn)槟蛞褐械挠行纬煞州^多、濃度較高所致，如尿液標(biāo)本中含有較多量紅細(xì)胞、白細(xì)胞（膿細(xì)胞）、細(xì)菌、酵母樣菌、管型、草酸鈣結(jié)晶、尿酸結(jié)晶、磷酸鹽結(jié)晶、上皮細(xì)胞等。

1 儀器的檢測(cè)原理

Sysmex UF-500i應(yīng)用了流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗的原理。儀器吸入定量的尿液標(biāo)本，經(jīng)稀釋、加溫和染色后，依靠液壓作用噴射入鞘液流動(dòng)池。儀器將捕捉到的熒光強(qiáng)度（Fl，從染色細(xì)胞發(fā)出的熒光，主要反映細(xì)胞染色的強(qiáng)度）、前向熒光脈沖寬度（Flw，主要反映細(xì)胞染色質(zhì)的長(zhǎng)度）、前向散射光強(qiáng)度（Fsc，主要反映細(xì)胞大?。?、前向散射光脈沖寬度（Fscw，主要反映細(xì)胞長(zhǎng)度）、電阻抗（主要與細(xì)胞體積成正比）等轉(zhuǎn)變成電信號(hào)，并對(duì)各種信號(hào)進(jìn)行分析、綜合識(shí)別和計(jì)算得到相應(yīng)細(xì)胞的大小、長(zhǎng)度、體積和染色質(zhì)長(zhǎng)度等信息，形成紅細(xì)胞、白細(xì)胞、細(xì)菌、管型等有形成分定量報(bào)告，并得到有形成分的直方圖和散點(diǎn)圖，從而對(duì)尿中有形成分進(jìn)行鑒別并計(jì)數(shù)。

UF-500i尿液有形成分分析儀檢測(cè)速度快，在檢測(cè)報(bào)告中，除了給出紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌等主要有形成分的定量參數(shù)外，還給出了一些標(biāo)記參數(shù)和紅細(xì)胞的相關(guān)信息。UF-500i的使用極大地提高了工作效率，同時(shí)也為臨床提供了較多的輔助診斷的信息，如可根據(jù)紅細(xì)胞的形態(tài)信息輔助診斷泌尿道出血的位置；可根據(jù)定量計(jì)數(shù)的動(dòng)態(tài)結(jié)果來有效監(jiān)測(cè)患者病情的發(fā)展趨勢(shì)及治療效果等。尿液標(biāo)本中的有形成分較為復(fù)雜，部分有形成分之間的檢測(cè)參數(shù)相似，從而造成UF-500i不能準(zhǔn)確地將它們區(qū)分，從而造成假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)。

2 大量有形成分造成檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果

2.1 對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響

尿液中一些有形成分如酵母樣菌、結(jié)晶等在形態(tài)、大小、染色上與紅細(xì)胞類似，儀器不能完全準(zhǔn)確區(qū)分這些有形成分，從而造成紅細(xì)胞計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確。工作中該研究發(fā)現(xiàn)許多尿液干化學(xué)分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞陰性而UF-500i檢測(cè)紅細(xì)胞結(jié)果為陽(yáng)性的標(biāo)本，會(huì)報(bào)警提示“RBC/ X'TAL刻度異?！?，鏡檢后發(fā)現(xiàn)這些尿液存在草酸鈣等結(jié)晶，然后觀察散點(diǎn)圖，也確實(shí)會(huì)出現(xiàn)結(jié)晶與紅細(xì)胞分布區(qū)域交叉；酵母樣菌雖然有細(xì)胞核，但染料對(duì)膜的通透性低，染色后酵母樣菌的熒光強(qiáng)度和前向散射光強(qiáng)度較低[2]，所以當(dāng)尿液中含有酵母樣菌時(shí)，也可能會(huì)干擾紅細(xì)胞的檢測(cè)，從散點(diǎn)圖分布中可以看出，紅細(xì)胞與酵母樣菌所分布的區(qū)域有交叉現(xiàn)象，有些酵母樣菌含量較高的標(biāo)本，儀器會(huì)報(bào)警提示“RBC/YLC刻度異?！?。有研究表明尿液中的酵母樣菌含量越高，被儀器誤認(rèn)為紅細(xì)胞的情況越嚴(yán)重[3]；細(xì)菌因含有核酸，故經(jīng)染色后熒光強(qiáng)度大于紅細(xì)胞的熒光強(qiáng)度，UF-500i對(duì)細(xì)菌進(jìn)行了特異性染色且專門設(shè)有細(xì)菌檢測(cè)通道，大大提高了檢測(cè)細(xì)菌的準(zhǔn)確度，但尿液中大量球菌和桿菌存在時(shí)，細(xì)菌在代謝時(shí)產(chǎn)生的一些有毒物質(zhì)，可改變細(xì)胞膜通透性及變形性，使得細(xì)菌在尿液中成堆出現(xiàn)。菌團(tuán)大小與紅細(xì)胞相似有可能被誤認(rèn)為紅細(xì)胞[4]，此時(shí)在散點(diǎn)圖中可見細(xì)菌與紅細(xì)胞在散點(diǎn)圖中有交叉的區(qū)域，且有時(shí)儀器會(huì)報(bào)警提示“RBC/BACT刻度異常”；聚集成團(tuán)的非晶形尿酸鹽、磷酸鹽也會(huì)使紅細(xì)胞測(cè)定結(jié)果假性升高并影響紅細(xì)胞分析。

2.2 對(duì)紅細(xì)胞信息的影響

Sysmex UF-500i尿有形成分分析儀對(duì)紅細(xì)胞識(shí)別計(jì)數(shù)的同時(shí)記錄其形態(tài)信息，尿有形成分流式細(xì)胞儀可將尿紅細(xì)胞形態(tài)自動(dòng)分為均一性、非均一性、混合性3型。儀器將80%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度（FSC）≥84 ch，歸為均一性紅細(xì)胞，多為非腎小球性血尿；將80%紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度（FSC）≤126 ch，歸為非均一性紅細(xì)胞，多為腎小球性血尿；而紅細(xì)胞前向散射光強(qiáng)度介于兩者之間時(shí)，則為可判斷為混合性紅細(xì)胞，提示出血不是起源于一個(gè)部位[5]。紅細(xì)胞形態(tài)的檢測(cè)有利于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷，對(duì)判斷出血部位有很大的輔助診斷價(jià)值，當(dāng)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)受到干擾時(shí)，紅細(xì)胞形態(tài)信息也必然受到影響，造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確，此時(shí)可能干擾臨床對(duì)患者病情的診斷甚至導(dǎo)致誤診。

2.3 對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響

白細(xì)胞檢測(cè)中，UF-500i與鏡檢結(jié)果比較陽(yáng)性和陰性符合率比較高，但還是有假陽(yáng)性出現(xiàn)[6]，主要由檢測(cè)參數(shù)相似的小圓上皮細(xì)胞引起，當(dāng)尿液中有大量非晶形鹽類結(jié)晶時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)白細(xì)胞的假陽(yáng)性。

2.4 影響管型識(shí)別

UF-500i尿沉渣分析儀根據(jù)前向散射光脈沖測(cè)定管型的長(zhǎng)度，通過熒光測(cè)定管型內(nèi)是否含有顆粒（病理管型），電阻抗脈沖測(cè)定管型的體積。當(dāng)尿液中出現(xiàn)與管型檢測(cè)參數(shù)相似的物質(zhì)時(shí)就會(huì)干擾管型（病理管型）的檢測(cè)。尿中含有大量粘液絲時(shí)，如粘液絲大小和外形接近管型時(shí)，易被儀器誤認(rèn)歸為管型；當(dāng)粘液絲上粘附有白細(xì)胞、細(xì)菌、真菌等物質(zhì)時(shí)，經(jīng)過染色后，易被儀器識(shí)別為病理管型；尿中含有較多膿細(xì)胞時(shí)，成團(tuán)的膿細(xì)胞在通過儀器檢測(cè)孔時(shí)易形成串珠狀排列，此時(shí)易被儀器誤認(rèn)為是病理管型；當(dāng)發(fā)生上皮細(xì)胞粘連成一體時(shí)，其分布寬度和散射寬度均增大，被儀器誤認(rèn)為病理管型[7]。

3 高濃度尿液有形成分容易引起攜帶污染

3.1 大量紅細(xì)胞

當(dāng)采用自動(dòng)進(jìn)樣模式檢測(cè)含有大量紅細(xì)胞的尿液標(biāo)本時(shí)，可能會(huì)因?yàn)閿y帶污染而影響后面相鄰標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果，尤其可能引起排在血尿后面的陰性標(biāo)本結(jié)果假性升高，造成假陽(yáng)性。有學(xué)者的研究也證實(shí)有此情況[8-9]。

3.2 較多白細(xì)胞（膿細(xì)胞）

尿液標(biāo)本中的白細(xì)胞濃度過高時(shí)，可能會(huì)因?yàn)闈舛冗^高，儀器清洗不干凈，而導(dǎo)致下一個(gè)標(biāo)本的假陽(yáng)性，有學(xué)者也對(duì)因?yàn)槟蛞褐邪准?xì)胞濃度過高而引起的攜帶交叉污染有過報(bào)道[10]。

3.3 尿液中含大量細(xì)菌

當(dāng)尿液標(biāo)本中細(xì)菌濃度較高時(shí)，外觀也會(huì)呈渾濁狀，此時(shí)連續(xù)檢測(cè)標(biāo)本同樣也可能會(huì)引起攜帶污染而造成假陽(yáng)性結(jié)果，有報(bào)道稱用Sysmex尿液有形成分儀檢測(cè)無菌的生理鹽水得到了較高的本底值[11]，可想而之當(dāng)有攜帶污染現(xiàn)象存在時(shí)，檢測(cè)結(jié)果更是會(huì)假性升高。

3.4 較多量結(jié)晶

當(dāng)尿液中含有大量的草酸鈣、尿酸、磷酸鹽、尿酸鹽等結(jié)晶時(shí)，往往會(huì)影響紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，造成紅細(xì)胞計(jì)數(shù)假性升高；且該研究在工作中發(fā)現(xiàn)結(jié)晶含量高時(shí)也可能會(huì)引起攜帶污，影響下一個(gè)標(biāo)本的檢測(cè)，同時(shí)儀器會(huì)報(bào)警提示“RBC/X'TAL刻度異?！被颍ê停皵y帶污染？”。

有學(xué)者提出使用Sysmex尿液有形成分分析儀檢測(cè)尿液標(biāo)本的陰性結(jié)果與顯微鏡鏡檢的符合率較高，出現(xiàn)的漏診率極低，故陰性結(jié)果可信度較高[12]，而陽(yáng)性結(jié)果中會(huì)出現(xiàn)因?yàn)槠渌麢z測(cè)參數(shù)相似的物質(zhì)而引起的假陽(yáng)性，所以對(duì)于陽(yáng)性結(jié)果的標(biāo)本，就必須借助顯微鏡人工復(fù)檢，結(jié)合顯微鏡檢驗(yàn)結(jié)果審核報(bào)告。雖然目前顯微鏡是檢測(cè)有形成分的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但當(dāng)復(fù)檢的標(biāo)本太多時(shí)，就會(huì)耗費(fèi)大量的人力物力，降低工作效率[13]，且不可避免地出現(xiàn)不同檢測(cè)者之間結(jié)果不一致，不利于檢驗(yàn)流程的標(biāo)準(zhǔn)化。

綜上所述，當(dāng)尿液標(biāo)本中含有較多量紅細(xì)胞、白細(xì)胞（膿細(xì)胞）、細(xì)菌、結(jié)晶、酵母樣菌、管型、粘液絲、上皮細(xì)胞等成分時(shí)，尿液往往呈渾濁狀態(tài)。使用UF-500i尿液有形成分分析儀自動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)檢測(cè)這些渾濁的標(biāo)本時(shí)，可能會(huì)因?yàn)闄z測(cè)參數(shù)之間的相似而產(chǎn)生相互干擾，導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)；可能會(huì)因?yàn)橄鄳?yīng)的有形成分濃度過高引起攜帶交叉污染而導(dǎo)致下一個(gè)標(biāo)本的結(jié)果假性升高，甚至造成假陽(yáng)性。所以日常工作中可以將外觀渾濁的標(biāo)本挑選出來單獨(dú)處理，如通過稀釋樣本等方法以減少干擾和攜帶污染的發(fā)生，從而降低復(fù)檢率，提高工作效率。

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R446.12

A

1672-5654（2017）03（b）-0053-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.08.053

2016-12-11）

梁朝坤（1988-），男，四川廣元人，大專，檢驗(yàn)師，主要從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作。