三種實驗室指標在膜性腎病中的診斷價值

詹富國吳秀風陳惠娟陳靜

三種實驗室指標在膜性腎病中的診斷價值

詹富國1吳秀風2陳惠娟1陳靜1

目的 評估血清抗磷脂酶A2受體（phospholipase A2 receptor，PLA2R）抗體與腎小球PLA2R和腎小球IgG4沉積聯(lián)合檢測在特發(fā)性膜性腎病（IMN）中的診斷價值。方法 應(yīng)用間接免疫熒光法檢測230例腎小球疾病患者血清抗PLA2R抗體。其中127例腎小球疾病患者同時應(yīng)用免疫組化法檢測腎小球PLA2R和IgG4亞型沉積情況，受試者工作曲線（ROC）分析三種檢測指標在IMN中的診斷價值，比較三種檢測指標的一致性。結(jié)果 血清抗PLA2R抗體與腎小球PLA2R或腎小球IgG4表達一致性一般（Kappa值分別為0.748和0.703，P＜0.01）。結(jié)論 血清抗PLA2R抗體在IMN診斷中的有很高的敏感性和特異性。血清抗PLA2R抗體與腎小球PLA2R或腎小球IgG4聯(lián)合檢測可提高檢測靈敏度。

膜性腎病；抗磷脂酶A2受體抗體；磷脂酶A2受體；IgG4

[Keywords]membranous nephropathy; anti-phospholipase A2 receptor antibody; phospholipase A2 receptor; IgG4

膜性腎?。∕N）是以腎小球基底膜上皮細胞下彌漫性免疫復(fù)合物沉積伴有基底膜增厚為特征的一組疾病。膜性腎病在腎活檢及腎小球疾病中僅次于IgA 腎病，且其發(fā)病率在近11年內(nèi)正以每年13%的速度增長[1]。特發(fā)性膜性腎?。↖MN）是成人腎病綜合征的常見病理類型之一，其臨床結(jié)局變化不定，1/3的患者可自發(fā)緩解，但是有40%～50%的IMN患者在5～10年內(nèi)發(fā)展至終末期腎臟病。

Beck等[2]2009年首次報道PLA2R是IMN的主要靶抗原，血清自身抗體陽性患者腎小球沉積主要是免疫球蛋白IgG4亞型。目前國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)對血清抗PLA2R抗體、腎小球PLA2R表達和腎小球IgG4沉積對IMN的診療價值作了大量研究[3-5]。然而，由于研究的人種、檢測原理、對象數(shù)量等因素的差異，三種指標對IMN的診斷價值還存在爭議[6-7]，且聯(lián)合檢測對臨床的價值研究甚少。本研究通過檢測福建IMN人群中血清PLA2R抗體，腎小球PLA2R和IgG4沉積水平，探討聯(lián)合檢測在IMN中的診斷價值。

1 對象與方法

1.1 對象

收集2014年6月—2017年6月福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腎內(nèi)科住院與門診患者共230例，接受腎活檢的患者經(jīng)腎臟病理結(jié)合臨床資料確診為IMN患者117例，完善PLA2R檢查非IMN患者113例?；颊吣挲g為15～82歲，平均年齡（48.9±15.0）歲，其中男性143例（62.2%），女性87例（37.8%）。

1.2 方法

分離新鮮血清，當日檢測或者4℃保存7 d內(nèi)完成檢測。采用間接免疫熒光（IIF）法檢測230例患者血清抗PLA2R抗體，檢測用德國歐蒙公司試劑盒。其中127例患者同時應(yīng)用免疫組化法檢測腎小球PLA2R和IgG4亞型沉積情況，檢測抗體為小鼠抗人PLA2R單抗（abcam公司，CL0474） 和兔抗人IgG4單抗（abcam公司，EP4420）。所用試劑均在有效期內(nèi)，試驗嚴格按照說明書操作。熒光顯微鏡觀察結(jié)果，根據(jù)熒光強度不同報（-）、（1+）～（4+）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，兩兩之間的比較采用χ2檢驗，計算一致性檢驗Kappa系數(shù)，Kappa＜0.4時一致性較差，0.4≤Kappa＜0.7時一致性一般，Kappa≥0.75時一致性較好，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ROC曲線分析

以腎穿刺活檢作為確診IMN的標準，對230例入組患者做ROC曲線分析，曲線下面積AUC血清抗PLA2R抗體（0.918）＞AUC腎IgG4（0.917）＞AUC腎PLA2R（0.906），三種指標對IMN診斷價值均很高。

2.2 檢驗結(jié)果一致性的定性對比

同時用上述三種方法檢測127份血清標本。根據(jù)各檢測系統(tǒng)的陽性判斷指標對樣本的檢測結(jié)果作定性判斷。腎小球PLA2R和腎小球IgG4表達一致性良好（Kappa=0.929，P＜0.05），血清抗PLA2R抗體與腎小球PLA2R或腎小球IgG4表達一致性一般（Kappa分別為0.748和0.703，P＜0.05）。

2.3 聯(lián)合檢測陽性率比較

血清抗PLA2R抗體診斷IMN組的敏感性為84.6%（99/117），特異性90.3%（102/113）。與腎小球PLA2R聯(lián)合檢測時陽性率達95.9%（47/49），與腎小球IgG4聯(lián)合檢測是陽性率為98.0%（48/49），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

根據(jù)ROC曲線分析，血清抗PLA2R抗體、腎小球PLA2R、腎組織IgG4沉積對IMN診斷價值均很高（曲線下面積AUC＞0.9，P＜0.05）。由于腎組織活檢有諸多弊端：有創(chuàng)檢查不易為患者接受，不適合早期診斷，禁忌證多等，因此血清抗PLA2R抗體在可疑膜性腎病患者中可作為首選檢查。

Dai等[7]認為由于IMN患者血清快速清除了自身抗體、已沉積在腎小球或因為延時采樣導(dǎo)致PLA2R發(fā)生了不可逆轉(zhuǎn)的超微結(jié)構(gòu)的變化，活體檢查比血清學(xué)檢查更為敏感。因此本研究對127份血清標本同時檢測了腎小球PLA2R和IgG4沉積水平，根據(jù)各檢測系統(tǒng)的陽性判斷指標對樣本的檢測結(jié)果作定性判斷，腎小球PLA2R表達和腎小球IgG4沉積陽性率一致性良好（Kappa=0.929，P=0.000），說明腎活檢腎小球PLA2R和腎小球IgG4檢測結(jié)果基本一致，二者聯(lián)合檢測意義不大。血清抗PLA2R抗體與腎小球PLA2R或腎小球IgG4表達一致性一般（0.4≤Kappa＜0.75，P＜0.01）。IMN患者血清抗PLA2R抗體與腎小球PLA2R或IgG4聯(lián)合檢測敏感性達 95.9%和98.0%，高于單獨檢測的84.6%。有報道[8]指出血清抗PLA2R抗體與腎小球IgG4聯(lián)合檢測時，敏感性和特異度分別為98.3%和100%，與本研究結(jié)果相符。

綜上所述，血清抗PLA2R抗體在IMN診斷中有良好的效能，可作為膜性腎病首選診斷指標。血清抗PLA2R抗體與腎小球PLA2R或腎小球IgG4表達聯(lián)合檢測可以提高IMN檢測靈敏度，各實驗室可根據(jù)患者情況選擇合適的檢測方法。

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Diagnostic Value of Three Kinds of Laboratory Indexes in Membranous Nephropathy

ZHAN Fuguo1WU Xiufeng2CHEN Huijuan1CHEN Jing11 Department of Clinical Laboratory, The First Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou Fujian 350005, China; 2 Department of Clinical Laboratory, The Third Affiliated Hospital of Fujian Medical University, Fuzhou Fujian 350005, China

Objective To evaluate the diagnostic value of serum antiphospholipase A2 receptor(PLA2R) antibodies and glomerular PLA2R and glomerular IgG4 deposits in the patients with idiopathic membranous nephropathy (IMN). Methods Serum anti-PLA2R antibodies were detected by indirect immunofluorescence method in 230 patients with glomerular diseases. Meanwhile glomerular PLA2R and glomerular IgG4 deposits were analyzed in 127 cases of them. Receiver operating characteristic (ROC) curves were drawn to analyze the diagnostic value of the three indices in the IMN and to compare the consistency among them. Results There were some differences of the consistency of Serum anti-PLA2R antibodies and glomerular PLA2R or glomerular IgG4 deposits (Kappa values were 0.748, 0.703, P ＜ 0.01). Conclusion Serum anti-PLA2R antibodies is of high sensitivity and specif i city in IMN. And serum anti-PLA2R antibodies combined with glomerular PLA2R or glomerular IgG4 could improve the sensitivity of IMN.

R692

A

1674-9316（2017）19-0124-03

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.19.065

1福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科，福建 福州 350005；2 福建醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗科，福建 福州 350005

陳靜