枯芩、條芩主要活性成分含量比較Δ

蘆海生，陳銘陽，劉春生#

(1.中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院藥學(xué)部，北京 100102； 2.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102)

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枯芩、條芩主要活性成分含量比較Δ

蘆海生1*，陳銘陽2，劉春生2#

(1.中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院藥學(xué)部，北京 100102； 2.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 100102)

目的：比較黃芩飲片枯芩、條芩部分主要活性成分的含量，為醫(yī)院藥房采購及臨床用藥提供參考。方法：采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent ZORBAX-Eclipse XDB C18色譜柱(25 cm×4.6 mm，5 μm)；流動相為甲醇-水-磷酸(V∶V∶V=47 ∶53 ∶0.2)；流速1 ml/min；檢測波長280 nm。使用SAS 8.2軟件分析各組數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性。結(jié)果：枯芩中黃芩苷平均含量為12.80%，黃芩素平均含量為2.01%；條芩中黃芩苷平均含量為13.14%，黃芩素平均含量為1.35%。分析結(jié)果顯示，枯芹、條芹中黃芩苷、黃芩素平均含量的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：枯芩中黃芩素含量較高，條芩中黃芩苷含量較高，因此不能斷論其中一種優(yōu)于另一種，本研究結(jié)論可為藥房采購及臨床用藥提供參考。

黃芩； 枯芩； 條芩； 高效液相色譜法； 質(zhì)量評價(jià)

黃芩為唇形科植物黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。通過查閱文獻(xiàn)與藥房工作經(jīng)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，黃芩飲片一直以來分為枯芩、條芩等2種規(guī)格。條芩飲片以片大、質(zhì)堅(jiān)實(shí)、斷面黃者為優(yōu)，枯芩飲片以片大、空心、邊緣黃者質(zhì)佳[1]。對于2種規(guī)格不同的黃芩飲片的應(yīng)用及評價(jià)，目前有幾種不同的意見。有醫(yī)家認(rèn)為條芩質(zhì)堅(jiān)實(shí)為優(yōu)，枯芩大多空心則質(zhì)量差[2]；有也醫(yī)家認(rèn)為枯芩多屬于野生老根，次生代謝產(chǎn)物積累豐富，因此其藥效好，價(jià)格應(yīng)高于條芩[3]；還有醫(yī)家認(rèn)為條芩、枯芩藥性不同，功能主治有差異[4]。黃芩素和黃芩苷是黃芩發(fā)揮功效的主要活性成分[5]。鑒于此，本研究對不同批次、不同規(guī)格的黃芩飲片的黃芩素和黃芩苷含量進(jìn)行對比分析，以期為藥房飲片采購及醫(yī)院臨床用藥提供參考。

1 材料

1.1 儀器

島津LC20A型高效液相色譜儀(LC-20AT高效泵，SPD-20A檢測器，LC solution工作站，日本島津公司)；METTLER AE 240型電子分析天平(d=0.1 mg，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋(金壇市華峰儀器有限公司)；KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器(中國昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 試劑與飲片

乙醇(分析純，北京化工廠)；乙腈、甲醇(色譜純，美國Fisher公司)；黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品(購自中國藥品生物制品檢定所)；黃芩素標(biāo)準(zhǔn)品(購自成都曼斯特生物科技有限公司)。所用黃芩飲片取自北京各大醫(yī)院藥房，規(guī)格見表1，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定系主任劉春生教授鑒定，基原均為唇形科植物黃芩。

表1 20批黃芩飲片規(guī)格

Tab 1 Specification of 20 batches of Radix scutellariae decoction pieces

編號規(guī)格編號規(guī)格1條芩11枯芩2枯芩、條芩12枯芩、條芩3枯芩、條芩13枯芩、條芩4條芩14枯芩、條芩5枯芩、條芩15枯芩、條芩6枯芩、條芩16枯芩、條芩7條芩17枯芩、條芩8條芩18枯芩、條芩9條芩19枯芩、條芩10條芩20枯芩、條芩

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX-Eclipse XDB C18色譜柱(25 cm×4.6 mm，5 μm)；流動相：甲醇-水-磷酸(V∶V∶V=47 ∶53 ∶0.2)；流速：1 ml/min；檢測波長：280 nm[6-8]。

2.2 對照品溶液制備

分別取在60 ℃下減壓干燥4 h的黃芩苷、黃芩素對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成1 ml含60 μg黃芩苷、黃芩素的溶液，即得。

2.3 供試品溶液制備

取黃芩飲片中粉(過四號篩)約0.3 g，精密稱定，加70%乙醇40 ml，加熱回流3 h，放冷，濾過，濾液置于100 ml容量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾入同一容量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取1 ml，置于10 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

2.4 精密度試驗(yàn)

取15號樣品1份，制備供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定峰面積，計(jì)算黃芩苷、黃芩素峰面積的RSD值分別為0.70%、0.52%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取15號樣品1份，制備供試品溶液，分別于0、3、6、9、12、24 h注入高效液相色譜儀，測定峰面積，計(jì)算黃芩苷、黃芩素峰面積的RSD值分別為1.86%、0.74%，結(jié)果顯示，供試品溶液中黃芩苷、黃芩素在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取15號樣品6份，制成供試品溶液，測定黃芩苷、黃芩素含量的RSD值分別為1.53%、1.62%。

2.7 樣品含量測定

分別測定20批枯芩、條芩等黃芩飲片中黃芩苷、黃芩素含量，結(jié)果見表2—3。由表2可見，各批枯芩、條芩等黃芩飲片中黃芩苷含量均達(dá)到了《中華人民共和國藥典》(2015年版)的標(biāo)準(zhǔn)(9.0%)，其中，枯芩中黃芩苷的平均含量為12.80%，條芩中黃芩苷的平均含量為13.14%。利用SAS 8.2軟件對同批黃芩飲片枯芩、條芩的黃芩苷含量進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，r=0.769，P=0.002<0.01，表明枯芩與條芩中黃芩苷含量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，條芩中黃芩苷的含量顯著高于枯芩。根據(jù)表3的結(jié)果計(jì)算得出各批黃芩飲片中枯芩中黃芩素的平均含量為2.01%，條芩中黃芩素的平均含量為1.35%。利用SAS 8.2軟件對同批黃芩飲片枯芩、條芩的黃芩素含量進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，r=0.659，P=0.014<0.05，表明枯芩與條芩中黃芩素含量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，枯芩中黃芩素的含量顯著高于條芩。

表2 20批枯芩、條芩等黃芩飲片中黃芩苷含量(%)

Tab 2 Content of baicalin in 20 batches of Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae(%)

編號枯芩中黃芩苷含量條芩中黃芩苷含量1—13 85211 2312 97313 5013 504—13 17512 8413 81613 4313 897—12 058—12 649—12 1910—12 821113 50—1212 0012 921313 4213 741413 2113 841512 8313 281613 3413 891713 2113 471812 8812 851912 3412 392011 4312 33

注：“—”表示無相關(guān)數(shù)據(jù)

Note：“—” stands for no relevant data available

表3 20批枯芩、條芩等黃芩飲片中黃芩素含量(%)
Tab 3 Content of baicalein in 20 batches of Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae(%)

編號枯芩中黃芩素含量條芩中黃芩素含量1——21 801 8032 152 154——52 242 2462 122 127——8——9——10——111 881 88121 961 96132 002 00141 881 88152 062 06162 032 03172 042 04181 831 83192 152 15201 931 93

注：“—”表示無相關(guān)數(shù)據(jù)

Note：“—” stands for no relevant data available

3 討論

本研究結(jié)果顯示，枯芩、條芩中黃芩苷、黃芩素含量的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中，枯芩中黃芩素含量較高，條芩中黃芩苷含量較高。其機(jī)制目前無從考證，猜想可能為黃芩老根中控制黃芩素合成黃芩苷的糖基轉(zhuǎn)移酶及其他相關(guān)酶基因的表達(dá)量降低所致?！吨腥A人民共和國藥典》(2015年版)中“黃芩”項(xiàng)下指標(biāo)性成分的含量測定只規(guī)定了黃芩苷一項(xiàng)，但本研究者認(rèn)為不能僅憑黃芩苷含量的高低來評價(jià)黃芩飲片質(zhì)量的優(yōu)劣，還應(yīng)結(jié)合其他生物活性成分的含量。相關(guān)研究報(bào)道顯示，黃芩苷、黃芩素的藥理作用相近且黃芩素進(jìn)入體內(nèi)后迅速進(jìn)入血液循環(huán)，而黃芩苷口服不易吸收，在腸道經(jīng)酶水解為黃芩素后方可吸收入血[9]。雖然黃芩素極性較其他黃酮類化合物苷元高，但在煎煮過程中其的水溶性仍弱于黃芩苷，因此，黃芩飲片中的黃芩苷和黃芩素在進(jìn)入患者體內(nèi)血液循環(huán)的過程中均受到一定程度的阻礙[10]，根據(jù)已有研究仍不能斷論枯芩、條芩孰優(yōu)孰劣。

本研究探討了枯芩、條芩中2種主要活性成分黃芩苷、黃芩素的含量差異，盡管不能得出其中一種規(guī)格的質(zhì)量明顯優(yōu)于另一種的結(jié)論，但對醫(yī)院藥房采購及臨床用藥仍有一定的參考價(jià)值。

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Comparison of Major Bioactive Components between Radix Scutellariae with Xylem Rotten and Strip Type Radix scutellariaeΔ

LU Haisheng1, CHEN Mingyang2, LIU Chunsheng2
(1.Dept.of Pharmacy, Wangjing Hospital of CACMS, Beijing 100102, China; 2.School of Chinese Materia Medica, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100102，China)

OBJECTIVE：To compare the major bioactive components between Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae, so as to provide reference of drug purchaseing for pharmacy and clinical application in clinic. METHODS: HPLC method was adopted, the chromatographic column was Agilent ZORBAX-Eclipse XDB C18(25 cm×4.6 mm，5 μm), with mobile phase of methanol-water-phosphoric acid(V∶V∶V=47 ∶53 ∶0.2)and flow rate of 1 ml/min, and detection wavelength at 280 nm. Correlation between each set of data was analyzed by SAS 8.2 software. RESULTS: The average content of baicalin in Radix scutellariae with xylem rotten was 12.80%, the average content of baicalein was 2.01%; and the average content of baicalin in Strip type radix scutellariae was 13.14%, the average content of baicalein was 1.35%. According to the analysis, the differences were statistically significant among the average content of baicalin in Radix scutellariae with xylem rotten and Strip type radix scutellariae, the average content of baicalein(P<0.05). CONCLUSIONS: The content of baicalein is relatively high in Radix scutellariae with xylem rotten, while baicalin is relatively high in Strip type radix scutellariae. So it’s impossible to tell which is better than the other. The conclusion of this study can provide reference of drug purchaseing for pharmacy and clinical application in clinic.KEYWORDS Radix scutellariae; Radix scutellariae with xylem rotten; Strip type radix scutellariae; HPLC; Quality evaluation

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81373909)；公益性行業(yè)科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(No.201507002-4-2)

R927.2

A

1672-2124(2016)12-1594-03

2016-09-07)

*主管藥師。研究方向：中藥材質(zhì)量評價(jià)研究 E-mail：wjyyypk@163.com

#通信作者：教授，博士生導(dǎo)師。研究方向：藥用植物與分子生藥學(xué)。E-mail：max_liucs@263.net

DOI 10.14009/j.issn.1672-2124.2016.12.003