膠體金免疫層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

陳一鳴

(內(nèi)蒙古赤峰市獸藥監(jiān)察所,內(nèi)蒙古赤峰 024000)

膠體金免疫層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

陳一鳴

(內(nèi)蒙古赤峰市獸藥監(jiān)察所,內(nèi)蒙古赤峰 024000)

為探討分析膠體金免疫層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)工作中的應(yīng)用價(jià)值，筆者收集了近年關(guān)于畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)的相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道進(jìn)行了總結(jié)和分析。其結(jié)果顯示，膠體金免疫層析法應(yīng)用在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用效果良好，且其同時(shí)具備敏感度高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)勢(shì)，具備較高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

膠體金免疫層析法 畜禽產(chǎn)品 獸藥殘留 食品安全

在畜禽養(yǎng)殖過(guò)程中，為了防止畜禽感染各類疾病導(dǎo)致減少產(chǎn)量，通常會(huì)應(yīng)用一些藥物進(jìn)行相關(guān)預(yù)防和治療。而大量的藥物應(yīng)用，會(huì)使得相關(guān)藥物不能完全被畜禽所代謝，儲(chǔ)存在畜禽體內(nèi)，從而形成畜禽產(chǎn)品的獸藥殘留。畜禽產(chǎn)品中的獸藥殘留在人體食用后會(huì)被人體吸收，從而影響人體健康，是食品安全中的一個(gè)重要問(wèn)題[1]。為控制畜禽產(chǎn)品的獸藥殘留和保證食品安全，通常會(huì)對(duì)相關(guān)畜禽產(chǎn)品進(jìn)行獸藥殘留檢驗(yàn)。膠體金免疫層析法就是一種新型的畜禽產(chǎn)品獸藥殘留的檢測(cè)方法，為探討分析膠體金免疫層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)中的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值與應(yīng)用方法，筆者收集了近年來(lái)的一些相關(guān)研究報(bào)道，并結(jié)合實(shí)際應(yīng)用情況進(jìn)行了總結(jié)和分析。

1 膠體金免疫層析法的技術(shù)原理

膠體金是一種分散相、粒徑為1～100mm，橘紅色至紫紅色的金溶膠。膠體金可以通過(guò)靜電作用、疏水作用以及金硫鍵等相關(guān)物理作用方式將蛋白質(zhì)等高分子吸附并結(jié)合在金溶膠的表面[2]。膠體金免疫層析法屬于一種標(biāo)記免疫分析方法，主要是采用納米金顆粒對(duì)相關(guān)抗體進(jìn)行標(biāo)記，當(dāng)金標(biāo)抗體聚集到一定量時(shí)，就會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的紫紅色，從而可對(duì)抗體和抗原的反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行直觀測(cè)定。膠體金免疫層析法可分為夾心法和競(jìng)爭(zhēng)抑制法兩種情況，夾心法主要應(yīng)用于對(duì)病毒、細(xì)菌、寄生蟲等殘留的檢測(cè)，而競(jìng)爭(zhēng)移植法主要應(yīng)用于對(duì)獸藥殘留、類固醇、農(nóng)藥等小分子物質(zhì)的檢測(cè)。

2 膠體金免疫層析法的應(yīng)用方法

膠體金免疫層析法操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠。應(yīng)用時(shí)將被檢測(cè)樣品溶液滴加在試紙上，通過(guò)觀察試紙顏色的變化確定檢測(cè)結(jié)果。膠體金免疫層析試紙主要由樣品墊、膠體金結(jié)合墊、硝酸纖維素膜、吸水墊以及PVC膠板等材料構(gòu)成。將樣品溶液滴落在樣品墊上，樣品溶液在層析作用下經(jīng)過(guò)膠體金標(biāo)記抗體的結(jié)合墊，然后經(jīng)過(guò)包被抗原和二抗檢測(cè)線（實(shí)際應(yīng)用中也被稱作T線）以及控制線（即C線），若樣品溶液中含有獸藥成分，相關(guān)藥物成分就會(huì)與金標(biāo)抗體相結(jié)合，而不會(huì)再與包被抗原發(fā)生反應(yīng)，所以T線就不會(huì)顯色。反之如果被測(cè)樣品中包含有相關(guān)獸藥成分，金標(biāo)抗體就會(huì)與包被抗原發(fā)生反應(yīng)，從而出現(xiàn)顯色反應(yīng)。但無(wú)論是否存在相關(guān)獸藥成分，金標(biāo)抗體都會(huì)與二抗發(fā)生反應(yīng)，所以應(yīng)用后C線均會(huì)發(fā)生反應(yīng)，若C線未發(fā)生顯色反應(yīng)，則提示本次檢測(cè)失敗。

3 膠體金層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用現(xiàn)狀

膠體金層析法為近年來(lái)新出現(xiàn)的一種標(biāo)記免疫分析檢測(cè)技術(shù)，在畜禽產(chǎn)品藥殘留檢測(cè)的應(yīng)用中相對(duì)應(yīng)用較少。但近年來(lái)已經(jīng)有很多研究證實(shí)，膠體金層析法在畜禽產(chǎn)品獸藥殘留的檢測(cè)中應(yīng)用價(jià)值較高。特別是對(duì)抗生素藥物、磺胺類藥物、呋喃類藥物以及興奮劑藥物等相關(guān)獸藥殘留的檢測(cè)應(yīng)用效果較好，并得到科學(xué)地實(shí)驗(yàn)證實(shí)。比如近年就有研究報(bào)道指出，應(yīng)用膠體金層析法檢測(cè)豬肉中氯霉素殘留，其檢測(cè)限達(dá)0.3μg/kg，其檢測(cè)結(jié)果與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的檢測(cè)結(jié)果基本一致，其檢測(cè)時(shí)間均控制在10分鐘以內(nèi)；在檢查豬肉中磺胺甲噁唑殘留中，有研究報(bào)道其檢測(cè)下限可達(dá)到20μg/L，且其與磺胺嘧啶、四環(huán)素、青梅等無(wú)交叉反應(yīng)，其檢測(cè)靈敏度高，特異性強(qiáng)[3]。對(duì)呋喃類藥物的檢測(cè)，可根據(jù)其與代謝物質(zhì)作為殘留的標(biāo)識(shí)物進(jìn)行檢測(cè)。而對(duì)β-興奮劑的檢測(cè)可通過(guò)對(duì)相關(guān)動(dòng)物的血液、尿液糞便等進(jìn)行檢測(cè)，以確定其體內(nèi)是否存在β-興奮劑。

4 討論

在畜牧、家禽養(yǎng)殖過(guò)程中，為了保證其產(chǎn)量，通常會(huì)對(duì)相關(guān)畜禽給予一定藥物進(jìn)行預(yù)防和治療相關(guān)疾病。隨著藥物的應(yīng)用量的增多，通常其殘留在畜禽體內(nèi)的藥物殘留量較大。當(dāng)人食用相關(guān)畜禽產(chǎn)品后，其產(chǎn)品中的獸藥殘留可能會(huì)被人體吸收，從而影響人體的健康。比如殘留的抗生素可能會(huì)導(dǎo)致食用者出現(xiàn)過(guò)敏、耐藥性增強(qiáng)、毒性反應(yīng)、致畸、致癌等，殘留的磺胺類藥物可能會(huì)對(duì)食用者神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、造血功能等造成損害，呋喃類藥物殘留可致癌、誘導(dǎo)突變，殘留的β-興奮劑也可能損害人體的神經(jīng)系統(tǒng)等多系統(tǒng)功能[4]。所以控制畜禽產(chǎn)品獸藥殘留，確保食品安全，已成為當(dāng)下全社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)。當(dāng)前，隨著相關(guān)科技地不斷創(chuàng)新和發(fā)展，對(duì)相關(guān)畜禽產(chǎn)品的獸藥殘留檢測(cè)手段較多。在實(shí)際應(yīng)用中較為常見(jiàn)的可分為色譜分析法、微生物抑制分析法以及標(biāo)記免疫分析法。其中標(biāo)記免疫分析法又可以分為膠體金免疫分析法、放射性免疫分析法、酶聯(lián)免疫分析法、熒光免疫分析法等多種方法。膠體金免疫分析法由于其操作簡(jiǎn)便，不需要任何輔組儀器以及相關(guān)試劑，同時(shí)其測(cè)試速度快，一般只需要3～15min即可測(cè)得其結(jié)果，且其可以通過(guò)肉眼直接觀看檢測(cè)結(jié)果，其實(shí)踐應(yīng)用性強(qiáng)，特別是對(duì)相關(guān)畜禽產(chǎn)品獸藥殘留的初篩檢驗(yàn)中應(yīng)用價(jià)值極高。

[1] 李淑群，曹碧云，?；?，等.膠體金免疫層析法快速檢測(cè)牛奶、奶粉、飼料中的三聚氰胺[J].分析化學(xué)，2013，41（7）：1025-1030.

[2] 檀尊社，陸恒，邵偉，等.膠體金免疫層析法快速檢測(cè)水產(chǎn)品中四環(huán)素類藥物殘留[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2010，19（8）：32-37.

[3] 王喜亮，易俊東，金秀娥，等.膠體金免疫層析法半定量檢測(cè)雞肉中磺胺嘧啶殘留[J].食品科學(xué)，2007，28（8）：337-340.

[4] 孫志文，陶光燦，羅曉琴，等.膠體金免疫層析法測(cè)定牛奶中β-內(nèi)酰胺類抗生素和三聚氰胺殘留[J].乳業(yè)科學(xué)與技術(shù)，2012，35（3）：39-42.