豬支原體肺炎疫苗應(yīng)用現(xiàn)狀與研究進展

魏 鳳，張文通，李 峰，沈志強*，，

（1.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東 濱州 256600；2.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600）

豬支原體肺炎疫苗應(yīng)用現(xiàn)狀與研究進展

魏 鳳1，張文通2，李 峰1，沈志強*，1，2

（1.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東 濱州 256600；2.山東綠都生物科技有限公司，山東 濱州 256600）

豬支原體肺炎是造成養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟損失最大的傳染病之一，嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。疫苗免疫防治該病極為關(guān)鍵。本文就該病在疫苗方面的應(yīng)用現(xiàn)狀與研究進展展開綜述，為有效防控該病提供參考。

豬支原體肺炎；疫苗；研究進展

豬肺炎支原體（Mhp）是引起豬肺炎的一種接觸性呼吸系統(tǒng)傳染病。它主要通過感染破壞豬的上呼吸道纖毛、導(dǎo)致纖毛的脫落，進而使得其他病原有機會侵襲肺臟而引發(fā)肺炎，從而導(dǎo)致豬體的體液免疫和細胞免疫功能的降低，產(chǎn)生免疫抑制，使其他細菌或病毒性疾病易感。該病的特點是可感染各年齡階段的豬群，當(dāng)豬肺炎支原體伴有其他病原混合感染或繼發(fā)感染（如豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖與呼吸綜合征病毒等）時，表現(xiàn)為呼吸困難、發(fā)熱、死亡；反之，未伴有其他病原體時，表現(xiàn)為干咳、生長減慢。該病全世界普遍存在，能夠降低豬只平均日增重、降低飼料轉(zhuǎn)化率、增加防治藥費、增加淘汰豬和低體重豬數(shù)量等，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟損失[1-4]。

防治該病最關(guān)鍵措施是疫苗接種。目前國內(nèi)外用于預(yù)防豬肺炎支原體感染的商品疫苗有滅活苗、減毒活苗，這些疫苗己得到廣泛應(yīng)用。而一些新型疫苗的研究如活載體苗、以及亞單位苗和DNA苗均處于實驗室研究階段。本文對該疫苗在國內(nèi)外主要研究進展展開綜述。

1 滅活疫苗

目前國內(nèi)市場上出售的豬支原體肺炎滅活苗進口的有：梅里亞有限責(zé)任公司的BQ14株，西班牙海博萊的J株，碩騰公司美國查理斯堡的P-5722-3株，美國普泰克的P株，勃林格殷格翰的J株，英特威美國分公司的J株。市場上出售的豬支原體肺炎滅活苗國產(chǎn)的有：哈藥集團的P-5722-3株，中牧的DJ-166株。

豬支原體肺炎滅活苗可分為兩針免疫和一針免疫。兩針免疫用法與用量為：肌肉注射，每頭豬1頭份（2 ml）；兩次接種，間隔至少2周。建議首次接種在1周齡時進行，3周齡時進行第2次接種。未曾接種過的妊娠母豬，在分娩前6周和2周時各接種1次；曾經(jīng)接種過的妊娠母豬，在分娩前2周時再接種1次；公豬，每隔半年接種1次。一針免疫的免疫程序為1～3周齡或以上肌肉注射1.0～2.0 mL疫苗，免疫持續(xù)期達4～6個月。一針法免疫需要較少的人力，應(yīng)用更方便，免疫效果與兩針免疫相當(dāng)，目前應(yīng)用較多。

豬支原體肺炎滅活疫苗通過肌肉注射，臨床使用方便，免疫效果良好，在我國臨床上較經(jīng)常使用。國內(nèi)外產(chǎn)品質(zhì)量差別主要體現(xiàn)在佐劑水平上。哈藥集團“瑞倍適”系列產(chǎn)品使用的是新型佐劑愛菲金，該佐劑含有4.5%的礦物油，油滴細小，比傳統(tǒng)油佐劑增加50%的吸附面積，具有更大的抗原結(jié)合面積，增強免疫應(yīng)答；英特威“安百克”保留了15種豬肺炎支原體抗原蛋白，使用Emunade水包油佐劑；輝瑞“瑞富特”采用專利水質(zhì)佐劑Carbopol），24 h啟動免疫，3 d后產(chǎn)生有效保護；普泰克“喘泰克”為P株亞單位疫苗，免疫印跡證實抗原齊全、純凈，采用抗原濃縮技術(shù)，每次免疫僅需1.0 mL，使用了非油質(zhì)佐劑QS－21；勃林格“茵格發(fā)”為全球首創(chuàng)單針豬喘氣病疫苗，使用專用佐劑“茵培萊”，具有最佳的生物降解性，免疫后無任何不良反應(yīng)；海博萊以左旋咪唑和carbomer樹脂作為佐劑，左旋咪唑起免疫增強的作用，樹脂起緩慢釋放抗原作用，從而產(chǎn)生雙重效力；梅里亞公司的豬肺炎支原體滅活疫苗采用抗原性好的豬肺炎支原體BQ14株及阻斷支原體感染的菌膜蛋白抗原，雙效抗原提升了疫苗保護力，采用可快速釋放抗原的水性氫氧化鋁膠作佐劑，產(chǎn)生應(yīng)激小，對3日齡仔豬免疫注射依然安全，且能快速誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體。

2 活疫苗

豬支原體肺炎活疫苗國外沒有市場化產(chǎn)品，國內(nèi)市場化的產(chǎn)品有兩個。這兩個產(chǎn)品分別為豬支原體肺炎活疫苗(168株)和豬肺炎支原體活疫苗(R M48株)。其中，豬支原體肺炎活疫苗(168株)所用的豬肺炎支原體168株是由江蘇省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所于1979年在甘肅省分離，經(jīng)3次克隆化培養(yǎng)，無細胞培養(yǎng)340代次，人工致弱的弱毒菌株[5]。而豬肺炎支原體活疫苗(R M48株)所用的豬肺炎支原體兔化弱毒株由中國獸藥監(jiān)察所采用濟南強毒株在乳兔連續(xù)傳代致弱后獲得。

豬肺炎支原體活疫苗(168株)用法與用量：用于5～15日齡仔豬，只需免疫1次、1頭份；配備專用稀釋液和針頭，0.5 mL或1 mL/頭份；由胸部中間位置肋間隙垂直進針，肺內(nèi)注射；不影響豬圓環(huán)病毒病、豬藍耳病等疫苗的肌肉注射。豬肺炎支原體活疫苗(R M48株)用法與用量：1）胸腔接種。30日齡以上的健康豬，用滅菌PBS（0.01 mol/L，pH 7.2）按瓶簽注明頭份稀釋成1頭份/mL，由右側(cè)肩胛后緣約2 cm肋間隙進針，每頭豬胸腔內(nèi)注射疫苗1 mL。2）鼻腔接種。斷奶前后健康仔豬，用滅菌PBS（0.01 mol/L，pH 7.2）按瓶簽注明頭份稀釋成1頭份/mL，在豬吸氣時將疫苗噴射入鼻腔深部，每頭豬接種疫苗2 mL。

豬肺炎支原體活疫苗優(yōu)點有：同時產(chǎn)生占位免疫、細胞免疫、以及體液免疫，抗體產(chǎn)生快，持續(xù)期長[6-8]。該活疫苗主要缺點為：操作較繁瑣，胸腔、肺內(nèi)或滴鼻接種，工作量大。RM-48株活苗為兔化弱毒株，其免疫原性更好，安全性更強。鑒于豬肺炎支原體活疫苗接種麻煩的缺點，在其免疫途徑方面研究者做了一些研究：鄭鵬研究了豬支原體肺炎RM-48株活疫苗的霧化吸入免疫，研究結(jié)果顯示接種后能夠誘導(dǎo)機體產(chǎn)生的呼吸道黏膜免疫及細胞免疫反應(yīng)；邵國青等基于傳統(tǒng)的豬肺炎弱毒活疫苗（168株弱毒活疫苗）成功地開發(fā)出一種新型的豬支原體肺炎噴霧型疫苗，該168株疫苗噴霧免疫14 d后，能夠在免疫后豬只的鼻腔分泌液（鼻拭子）中明顯地檢測到豬肺炎支原體特異性分泌型IgA（SIgA）的存在。

3 基因工程疫苗

基因工程疫苗能利用外源載體對豬肺炎支原體免疫原性蛋白進行大量表達，研制有效的疫苗，用于解決傳統(tǒng)抗原培養(yǎng)難問題，具有很好的市場前景?；蚬こ桃呙绲难兄浦饕菑拿庖咴鞍追矫嫒胧值模F(xiàn)在研究最多的免疫原蛋白主要是P36、P46、P97、P110等[8]。盡管國內(nèi)外在豬支原體肺炎方面做了大量研究工作，然而至今無商品化的豬支原體肺炎基因工程疫苗。

[1] 蔡寶祥.家畜傳染病學(xué) [M].3版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1997：141-142.

[2] 趙德明，張仲秋，沈建忠，譯. 豬病學(xué)[M].9 版.北京： 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2008： 797.

[3] 姜青華.豬氣喘病的流行特點及診治[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2014(1)：76-77.

[4] 楊莉，楊茂生，吳位珩，等.豬氣喘病的研究進展[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2011(6)：7-9.

[5] 周勇岐，趙永前.豬支原體肺炎(168 株)活疫苗的作用機理與應(yīng)用[J].中國牧業(yè)通訊，2008(10)：49-52.

[6] 沈青春，寧宜寶，賈青松.豬肺支原體的研究進展[J].中國獸藥雜志，2003，37(6)：26-30.

[7] 寧宜寶.動物支原體病預(yù)防與控制的研究進展[J].中國獸藥雜志，1999，33(1)：45-48.

[8] 施堯.豬支原體肺炎疫苗研究進展[J].養(yǎng)豬，2013(3)：93-95.

2017-04-13）

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團隊項目 SDAIT-08-17

魏鳳，女（1979-），河南遂平人，碩士，助理研究員，主要從事獸用生物制品研究，E-mail：hzndzwt1@163.com