小反芻獸疫及其防控

郭 強(qiáng) 楊 波 法燕梅 王桂娟

（青島市黃島區(qū)畜牧獸醫(yī)局，山東青島 266000）

小反芻獸疫及其防控

郭 強(qiáng) 楊 波 法燕梅 王桂娟

（青島市黃島區(qū)畜牧獸醫(yī)局，山東青島 266000）

小反芻獸疫（PPR）是小反芻獸疫病毒（PPRV）引起的小反芻獸的一種急性、熱性和高度傳染性的烈性傳染病，主要感染山羊和綿羊。牛呈隱性感染，牛感染后不會(huì)傳染其他動(dòng)物。本病的特點(diǎn)是患病動(dòng)物突然出現(xiàn)精神沉郁、發(fā)熱、眼鼻分泌物增多、唇和舌出現(xiàn)損傷進(jìn)而出現(xiàn)呼吸不暢、咳嗽、惡臭性腹瀉以及出現(xiàn)壞死性口炎、肺炎、腸炎，一般預(yù)后不良，多為死亡。該病無(wú)特效治療方法，防控主要以疫苗免疫為主。該病曾因其臨床癥狀與牛瘟類似而又被稱為是偽牛瘟。

1 病原學(xué)

小反芻獸疫病毒（PPRV）屬于副黏病毒科麻疹病毒屬。PPRV是一種有囊膜的多形性RNA病毒，多為球形或橢圓形，病毒粒子直徑在150～700nm之間，其基因組是由15948個(gè)核苷酸組裝成的負(fù)鏈RNA分子，全長(zhǎng)為15948 nt，囊膜上的纖突由融合蛋白（F）和血凝素蛋白（H）構(gòu)成。病毒囊膜里面是核殼體，由核蛋白（N）、磷蛋白（P）、大蛋白（L）、基質(zhì)蛋白（M）組成。PPRV對(duì)中性PH環(huán)境比較穩(wěn)定，對(duì)酸、堿、乙醚、酒精和一些去污劑敏感。病毒對(duì)溫度也較敏感，50℃、30 min即可喪失感染力。在紫外線作用及陽(yáng)光的照射下也能很快失活。

2 流行病學(xué)

目前發(fā)現(xiàn)，PPRV只有1個(gè)血清型，根據(jù)N、F、H 基因組序列差異可將其分4個(gè)系。其中，3個(gè)系源于非洲，1個(gè)系源于亞洲。PPR對(duì)動(dòng)物的感染具有品種傾向性，山羊比綿羊易感，死亡率方面，在山羊上報(bào)道為71.6%，而在綿羊上為55.4%。牛呈隱形感染，感染后也不會(huì)傳染其他動(dòng)物。一些野生動(dòng)物也能夠感染本病，如小鹿瞪羚、努比亞羱羊、拉利斯頓地毯羊和好望角大羚羊。水牛、豬、亞洲獅也可感染PPRV，但不表現(xiàn)出臨床癥狀。目前，尚沒有人感染PPRV的報(bào)道。

3 診斷方法

3.1 臨床診斷

根據(jù)PPR典型的臨床癥狀如山羊和綿羊突然出現(xiàn)高熱、眼鼻分泌物、腹瀉、肺炎等，可初步做出假設(shè)性診斷。PPRV不同毒株的致病性各異，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)亞臨床癥狀或者較輕的臨床癥狀，雖然只有一個(gè)血清型，在臨床上卻易與山羊和綿羊的一些常見疾病相混淆。如果PPR為溫和性感染時(shí)，臨床癥狀不明顯，難于做出鑒別診斷，這時(shí)需要通過實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)確診。

3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.2.1 病原學(xué)診斷

PPRV抗原檢測(cè)方法主要有捕獲酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（icELISA）、瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散（AGID）、對(duì)流免疫電泳（CIEP）、間接熒光抗體試驗(yàn)（IFAT）和病毒分離鑒定。

3.2.2 分子生物學(xué)診斷

目前對(duì)PPRV核酸進(jìn)行檢測(cè)的方法主要采用特異性的cDNA探針和反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）兩種方法。此外，還有近年發(fā)展的實(shí)時(shí)熒光定量PCR和環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）。

3.2.3 血清學(xué)診斷

常用的抗體檢測(cè)方法是酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），此外，還包括血細(xì)胞凝集試驗(yàn)和乳膠凝集試驗(yàn)和病毒中和試驗(yàn)（VNT）。

4 防控措施

目前，該病尚無(wú)有效的治療方法，發(fā)病初使用磺胺類藥物和抗生素可對(duì)癥治療和預(yù)防繼發(fā)性感染。用超免疫血清進(jìn)行被動(dòng)免疫可減少疫病的傳播，但是對(duì)已發(fā)病的病畜無(wú)作用。現(xiàn)階段防治PPRV主要是依賴于疫苗的免疫接種。

4.1 傳統(tǒng)弱毒疫苗

4.1.1 異源疫苗

由于PPRV和RPV能夠產(chǎn)生交叉保護(hù)，因此，RP疫苗作為一個(gè)異種疫苗首先被用來預(yù)防PPR，具有良好的免疫保護(hù)效果。自從OIE提出“全球消滅牛瘟”計(jì)劃后，該疫苗已停止使用。

4.1.2 同源疫苗

當(dāng)PPRV異源疫苗被禁止使用后，PPRV同源疫苗是目前唯一允許用于預(yù)防PPR的疫苗。如：PPRV Nigeria 75/1 疫苗、PPRV Sungri/96 疫苗、PPRV Arasur/87 疫苗、耐熱性PPR疫苗。

4.1.3 多聯(lián)弱毒疫苗

隨著現(xiàn)代疫苗技術(shù)的發(fā)展，人們開始研制能夠同時(shí)預(yù)防2 種及以上疾病的多聯(lián)疫苗。和PPR一樣，山羊痘（GP）也是OIE規(guī)定的必須報(bào)告的動(dòng)物傳染病，二者的同時(shí)感染加重了疫區(qū)養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失。因此開發(fā)PPR和GP 的二聯(lián)疫苗預(yù)防這兩種疾病的感染，就顯得非常必要。目前，由印度獸醫(yī)研究所利用山羊痘和小反芻獸疫印度分離株研制了適用于Vero細(xì)胞培養(yǎng)的山羊痘-小反芻獸疫聯(lián)苗，田間試驗(yàn)結(jié)果表明該疫苗是安全有效的。

4.2 基因工程疫苗

盡管PPR弱毒疫苗效果很好，但卻不能從血清學(xué)上區(qū)別疫苗株和野毒株感染，給接種過PPR 疫苗的疫區(qū)的血清學(xué)調(diào)查帶來困難。為了便于血清學(xué)監(jiān)測(cè)，人們嘗試對(duì)基因進(jìn)行分子標(biāo)記，試圖研制更安全有效，并能從血清學(xué)上區(qū)別免疫或感染的PPRV 基因工程疫苗。

4.2.1 基因重組疫苗

JonesL 等用基因重組技術(shù)，同時(shí)表達(dá)了RPV 的F基因和H基因并制備了重組疫苗免疫山羊，雖然只檢測(cè)到RPV的抗體而不能檢測(cè)到PPRV的抗體，但用PPRV攻擊，免疫動(dòng)物全部獲得保護(hù)。

4.2.2 嵌合病毒疫苗

以牛瘟病毒作為載體骨架，將RP病毒的F和H基因替換成PPRV的F和H 基因，隨后獲得表達(dá)PPRV F和H蛋白的RP嵌合病毒。可以根據(jù)RPV和PPRV 的H和N蛋白的單克隆抗體來區(qū)分免疫接種和自然感染的動(dòng)物。

4.2.3 活載體疫苗

Berhe等將PPRV的F基因插入羊痘病毒的TK基因編碼區(qū)，構(gòu)建了重組羊痘病毒疫苗recCapPPR/F。用該重組疫苗免疫動(dòng)物后PPRV攻擊感染，結(jié)果發(fā)現(xiàn)重組病毒的使用量為0.1PFU免疫即可抵抗PPRV強(qiáng)毒的攻擊感染，同時(shí)也能預(yù)防羊痘病毒的感染。

4.3 表位疫苗

表位疫苗以其片段短、表達(dá)產(chǎn)物分子質(zhì)量小、可插入合適的免疫增強(qiáng)因子進(jìn)行共表達(dá)、不存在基因重組、整合的問題、安全性和穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)已逐漸成為人們研究和關(guān)注的焦點(diǎn)。目前，表位疫苗的研究尚有許多問題需要解決，從研制到應(yīng)用還有很長(zhǎng)的路要走。