HBV標(biāo)記物陽(yáng)性表型血清標(biāo)本HBV－DNA和Prse 1檢驗(yàn)分析

彭麗華

(郴州市第四人們醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 郴州423000)

HBV標(biāo)記物陽(yáng)性表型血清標(biāo)本HBV－DNA和Prse 1檢驗(yàn)分析

彭麗華

(郴州市第四人們醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖南 郴州423000)

目的:探討乙型肝炎病毒Pres 1和血清學(xué)標(biāo)志物與HBV-DNA之間的關(guān)系。方法:以386名接受乙肝5項(xiàng)體檢人員為研究對(duì)象，測(cè)定乙肝5項(xiàng)(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)、Pres 1抗原及HBV-DNA，分析HBVDNA及Pres 1的陽(yáng)性表達(dá)水平，并分析HBV-DNA與Pres1抗原在各陽(yáng)性模式組下的陽(yáng)性表達(dá)相關(guān)性。結(jié)果:HbsAg+、HbeAg-、HbcAb+模式組下的HBV-DNA、Pres 1陽(yáng)性率分別為86.96%(60/69)、94.20%(65/69)，均高于其他模式組(χ2=17.637、14.352，P＜0.05)。在HbsAg+各陽(yáng)性模式下(HbsAg+、HbeAb+，HbsAg+、HbeAg-、HbcAb+，HbsAg+、HbeAb+、HbcAb+)，HBV-DNA在Pres 1+中的陽(yáng)性率均高于Pres 1-的陽(yáng)性率(χ2=3.980、5.113、18.256，P＜0.05)。結(jié)論:Pres1抗原可以較好的反映HBV-DNA復(fù)制狀況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)乙肝5項(xiàng)漏檢，在HBV檢測(cè)中具有重要的運(yùn)用意義。

HBV;乙肝5項(xiàng);HBV-DNA;Pres 1抗原

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)屬于我國(guó)常見(jiàn)的傳染病。HBV可通過(guò)血液、呼吸道等途徑傳播，危害較大。因此，HBV的及時(shí)診斷具有重要意義。乙肝5項(xiàng)(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)是HBV診斷的傳統(tǒng)標(biāo)志物，但是漏診和誤診較為嚴(yán)重。隨著基因技術(shù)的發(fā)展，HBV-DNA水平分析成為可能。但是HBVDNA成本高、操作復(fù)雜。Pres 1作為近年來(lái)反映HBV感染復(fù)制狀況的一種指標(biāo)，本文探討了Pres 1與乙肝5項(xiàng)和HBV-DNA的相關(guān)性，期望為HBV的檢測(cè)改善提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 一般資料 選擇2013年6月至2015年5月在我院進(jìn)行不同HBV標(biāo)記物的體檢人員共386人作為研究對(duì)象。其中，男278例、女108例，年齡21～60歲、平均(41.3±15.2)歲。

1.2 方法 檢測(cè)受檢人員HbsAg、HbsAb、HbeAg、Hbe-Ab、HbcAb、Pres 1抗原、HBV-DNA水平。按規(guī)定流程采集血液標(biāo)本，并立即離心獲得血清標(biāo)本。血清標(biāo)本置于-20℃冰箱保存待測(cè)。HBV-DNA使用熒光定量PCR法測(cè)定。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定Pres 1抗原、乙肝5項(xiàng)。本研究所用試劑盒由上?？迫A生物公司和上海阿爾法生物科技公司提供。以5×104copy/mol為臨界值，HBVDNA如果小于該值，則認(rèn)定為陰性，相反認(rèn)定為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)使用SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，t方法檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料使用例(%)表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)，組內(nèi)多重比較采用LSD法進(jìn)行。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV-M模式下HBV-DNA和Pres 1陽(yáng)性結(jié)果比較 HbsAg+、HbeAg-、HbcAb+模式組下的HBV-DNA、Pres 1陽(yáng)性率分別為 86.96%(60/69)、94.20% (65、69)，均高于其他模式組陽(yáng)性率(χ2=17.637、14.352，P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 HBV－M模式下HBV－DNA和Pres 1陽(yáng)性結(jié)果比較

2.2 HBV-DNA、Pres 1在各種HbsAg陽(yáng)性模式下的關(guān)系 在HbsAg+、HbeAb+陽(yáng)性模式、HbsAg+、HbeAg-、HbcAb+陽(yáng)性模式、HbsAg+、HbeAb+、HbcAb+陽(yáng)性模式下，HBV-DNA在Pres 1+中的陽(yáng)性率均高于Pres 1-的陽(yáng)性率(χ2=3.980、5.113、18.256，P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 HBV－DNA、Pres 1在各種HbsAg陽(yáng)性模式中的關(guān)系

3 討論

乙型肝炎是我國(guó)的主要傳染病疾病，被認(rèn)為是造成肝硬化、肝癌的主要原因。我國(guó)是世界上乙型肝炎的高發(fā)國(guó)家。據(jù)估計(jì)，我國(guó)約有1.3億人攜帶乙型肝炎病毒，對(duì)我國(guó)居民安全帶來(lái)了極大的威脅［1］。強(qiáng)化乙型肝炎的檢測(cè)，及時(shí)診斷并采取相應(yīng)的預(yù)防措施，對(duì)于國(guó)民身體健康具有重要的意義。乙肝5項(xiàng)檢查作為乙型肝炎傳統(tǒng)的檢測(cè)手段，目前已經(jīng)有幾十年的發(fā)展歷史，并且在乙型肝炎檢測(cè)中發(fā)揮了突出的作用。但是，乙肝5項(xiàng)采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定，該法對(duì)靈敏度的要求高，在實(shí)際操作中存在一定的漏診和誤診。孫珍等［2］就指出，如果HBV病毒處在低水平復(fù)制時(shí)，乙肝5項(xiàng)并不能準(zhǔn)確的檢出乙型肝炎。他們認(rèn)為傳統(tǒng)的乙肝5項(xiàng)不能準(zhǔn)確評(píng)估乙肝病毒活動(dòng)狀況和進(jìn)展?fàn)顩r，在某種程度上乙肝5項(xiàng)存在較大的運(yùn)用缺陷。此外，也有學(xué)者指出由于標(biāo)記物窗口期表現(xiàn)、抗原抗體反應(yīng)“后帶”現(xiàn)象以及干預(yù)治療會(huì)造成陰性檢測(cè)結(jié)果［3］。隨著現(xiàn)代生物基因技術(shù)的發(fā)展，除乙肝5項(xiàng)檢查之外，還可以運(yùn)用其他方法對(duì)乙型肝炎患者(包括疑似患者)進(jìn)行進(jìn)一步的判斷，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確率。

HBV-DNA可以從分子生物學(xué)的角度反映乙型肝炎病毒狀況。近年來(lái)隨著基因技術(shù)在醫(yī)療領(lǐng)域的運(yùn)用越來(lái)越廣泛，有大量的學(xué)者對(duì)HBV-DNA進(jìn)行了研究。申煥君［3］以慢性乙型肝炎患者為對(duì)象，分析了HBV血清標(biāo)志物與HBV-DNA的相關(guān)性。從他們的結(jié)論來(lái)看，證實(shí)了乙肝5項(xiàng)與HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果具有一定的相關(guān)性。HBV-DNA還可以反應(yīng)患者HBV的復(fù)制情況，提高乙肝5項(xiàng)的診斷正確率。李彩東等［4］也報(bào)道了相似的結(jié)論，證實(shí)了HBV-DNA在乙型肝炎病毒檢測(cè)中的重要意義。但是HBV-DNA水平檢測(cè)所采用的PCR法對(duì)設(shè)備的要求較高，而且操作專業(yè)性相對(duì)較強(qiáng)，目前還不存在大面積普及的價(jià)值。近年來(lái)，關(guān)于乙型肝炎的研究不斷豐富。乙肝表面Pres 1抗原在乙肝進(jìn)展中的意義為學(xué)界所證實(shí)。崔春霞等認(rèn)為Pres 1抗原與HBV入侵和復(fù)制關(guān)系密切，可以作為反映HBV感染與復(fù)制的重要指標(biāo)。通過(guò)分析Pres 1抗原在乙肝檢測(cè)中具有重要的意義。

本研究以386例患者為對(duì)象，探討了Pre S1抗原與HBV血清學(xué)標(biāo)志物和HBV DNA的相關(guān)性。從HBV-M模式下HBV-DNA和Pres 1陽(yáng)性結(jié)果比較來(lái)看，HbsAg+、HbeAg-、HbcAb+模式組下的HBV-DNA、Pres 1陽(yáng)性率分別為86.96%(60/69)、94.20%(65、69)，均高于其他模式組陽(yáng)性率(χ2=17.637、14.352，P＜0.05)。本研究結(jié)論與崔中鋒等［9］的結(jié)論一致。崔中鋒等報(bào)道的Pres 1和HBV-DNA陽(yáng)性率分別為94.0%和83.6%，也是在各HBV-M模式組中最高。從HBV-DNA、Pres 1在各種HbsAg陽(yáng)性模式下的關(guān)系來(lái)看，在HbsAg+各陽(yáng)性模式下，HBV-DNA在Pres 1+中的陽(yáng)性率均高于Pres 1-的陽(yáng)性率(χ2=3.980、5.113、18.256，P＜0.05)。研究結(jié)論與依然與文獻(xiàn)3的結(jié)論相符合。這提示了HBV-DNA和Pres 1的陽(yáng)性率具有較好的相關(guān)性。出現(xiàn)這一原因，可能與HbsAg編碼基因和Pres 1編碼基因共同位于S區(qū)有關(guān)［6］。

綜合本研究的結(jié)果來(lái)看，傳統(tǒng)乙肝5項(xiàng)檢查可以較好的反映患者HBV感染后的免疫狀態(tài)，但是難以說(shuō)明患者感染狀態(tài)和病毒復(fù)制狀況。HBV-DNA則可以較好的反映HBV感染與復(fù)制情況，但是由于PCR法是成本和操作因素，在目前的條件下還不具有推廣的價(jià)值。Pres 1不僅可以較好的反映HBV感染和復(fù)制情況，漏診率和誤診率較低，而且相比于HBV-DNA檢查，操作方法簡(jiǎn)單，成本較低。在乙型肝炎檢測(cè)中，可以考慮乙肝5項(xiàng)配合Pres 1檢測(cè)，以更好的提升乙型肝炎檢測(cè)準(zhǔn)確率。

［1］ 崔春霞，解希帝，鄭瑞芬.乙型肝炎病毒的研究進(jìn)展［J］.疾病監(jiān)測(cè)與控制，2013，7(4):228-231.

［2］ 孫珍，趙志軍，師志云，等.寧夏地區(qū)乙肝病毒感染者HBV基因分型與臨床意義［J］.寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，36(1):34-37.

［3］ 申煥君，陳敬銀，張中偉，等.慢性乙型肝炎患者HBV血清標(biāo)志物與HBV-DNA相關(guān)性分析［J］.傳染病信息，2013，26(2):111-114.

［4］ 李彩東，吳斌段，正軍，等.乙型肝炎病毒基因分型與HBV-DNA水平及血清標(biāo)志物關(guān)系的探討［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，，2(5):907-909.

［5］ 崔中鋒，王雪俠.乙肝病毒標(biāo)記物陽(yáng)性表型血清標(biāo)本HBV-DNA的檢驗(yàn)分析［J］.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，37(6):837-839.

［6］ 劉玲麗，賴燕燕，林海英.乙肝患者血清PreS1-Ag和HBsAg與HBV-DNA相關(guān)性研究［J］.中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)，2013，13(3):353-355.

2016-02-16)