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    蠶蛹蛋白的價值、提取及應(yīng)用研究進展

    2017-01-14 13:26:39章玉萍張麗麗代君君吳傳華
    中國蠶業(yè) 2017年1期
    關(guān)鍵詞:蠶蛹柞蠶脫色

    章玉萍 張麗麗 陳 明 代君君 吳傳華 劉 健 范 濤

    (安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所,安徽合肥 230061)

    蠶蛹蛋白的價值、提取及應(yīng)用研究進展

    章玉萍 張麗麗 陳 明 代君君 吳傳華 劉 健 范 濤

    (安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑研究所,安徽合肥 230061)

    蠶蛹蛋白是一種優(yōu)質(zhì)純天然全價動物蛋白質(zhì),具有非常高的利用價值,近年來被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè)中。綜述了蠶蛹蛋白的營養(yǎng)、保健和藥用價值,脫脂、脫臭和脫色提取工藝,及其在食品、醫(yī)藥、飼料等方面的應(yīng)用,希望為蠶蛹蛋白的進一步開發(fā)應(yīng)用及工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。

    蠶蛹蛋白;生物活性物質(zhì);提取工藝;綜合利用;研究進展

    蛋白質(zhì)資源不足是當(dāng)今世界存在的四大危機之一,缺乏動物性蛋白質(zhì)、尋求新的蛋白質(zhì)資源已是擺在我們面前的一項迫切任務(wù)[1]。蠶桑產(chǎn)業(yè)是一項資源可以再生,具有經(jīng)濟和生態(tài)雙重效益,符合可持續(xù)發(fā)展道路的產(chǎn)業(yè)。蠶蛹作為蠶桑產(chǎn)業(yè)中的大宗副產(chǎn)物,資源十分豐富,我國年產(chǎn)家蠶蛹約30萬t,約占全世界總產(chǎn)量的80%[2];年產(chǎn)柞蠶蛹4萬t以上,占世界總產(chǎn)量的90%以上[3]。研究發(fā)現(xiàn),蠶蛹不僅蛋白質(zhì)含量豐富、氨基酸配比合理,還含有豐富的微量元素,是一種比植物蛋白更具營養(yǎng)價值的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)資源[2-4]。但是長期以來,我國的蠶蛹蛋白利用率不高。本文就蠶蛹蛋白的營養(yǎng)、保健和藥用價值,現(xiàn)階段的提取工藝及其開發(fā)應(yīng)用等方面的研究進展進行綜述,以期為蠶蛹蛋白的綜合利用提供一些參考。

    1 蠶蛹蛋白的價值

    1.1 蠶蛹蛋白的營養(yǎng)價值

    蠶蛹蛋白是一種優(yōu)質(zhì)的動物蛋白資源,鮮家蠶蛹中蛋白質(zhì)含量為12.9%~15.0%,脂肪含量為2.8%~5.3%,不飽和脂肪酸含量相對較高,占總脂肪的64.65%~67.23%,氨基酸含量為7.31%~9.14%[5-6]。鮮柞蠶蛹中蛋白質(zhì)含量為12.42%~12.83%,粗脂肪含量為5.34%~5.91%,占總脂肪的80.72%~80.16%,氨基酸含量為8.61%~9.64%[7]。2種蠶蛹中氨基酸種類齊全,均含有8種人體必需氨基酸,必需氨基酸和總氨基酸比例符合聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)提出的氨基酸模式。除氨基酸之外,蠶蛹中還含有大量人體所需的鉀、鈣、鎂、鐵、硒等礦物質(zhì)元素,其中鉀的含量最高,家蠶蛹中達到了3.650~4.250 mg/g,柞蠶蛹中達到了0.280~0.319 mg/g[5,7]。蠶蛹中還含有豐富的維生素A、維生素E、維生素D、維生素B1和維生素B2等[5,7]。

    另外,有研究報道,雞、豬等家禽(畜)對昆蟲氨基酸的消化利用率接近或超過對傳統(tǒng)植物蛋白飼料的消化利用率,高達70.00%~98.93%[8];在體外模擬消化試驗中,蠶蛹蛋白表現(xiàn)出了很高的消化利用率,總氮釋放量達到92.72%[9],高于植物性蛋白的消化利用率[10]。因此,將蠶蛹蛋白粉加入到主食品中混合食用,可以相互補充,為機體提供全面、合理、豐富的蛋白質(zhì)。

    1.2 蠶蛹蛋白的保健價值

    蠶蛹蛋白可提高機體對外界的抵御能力。盧楠等[11]研究發(fā)現(xiàn),柞蠶蛹蛋白多肽能提高小鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù)與外周血白細胞數(shù),可以緩解小鼠衰老導(dǎo)致的免疫低下癥狀,且2組蠶蛹蛋白多肽在調(diào)節(jié)衰老小鼠的免疫器官指數(shù)和血液免疫細胞數(shù)上效果顯著。劉雋彥等[12]對柞蠶蛹多肽溶液進行了功能性試驗,結(jié)果表明柞蠶蛹多肽溶液能提高免疫低下小鼠的免疫器官質(zhì)量和外周血細胞數(shù)量,明顯促進T、B淋巴細胞增殖,說明柞蠶蛹多肽溶液具有免疫活性,有增強免疫力之功效。

    周思敏等[13]研究發(fā)現(xiàn),家蠶蛹蛋白能顯著延長小鼠力竭游泳時間、增加肝糖原含量并降低血乳酸曲線下面積,證明蠶蛹蛋白具有明顯的抗疲勞作用。張麗萍等[14]進行柞蠶蛹蛋白對人體抗疲勞作用研究發(fā)現(xiàn),食用蠶蛹蛋白可降低受試者運動后血乳酸的升高,增加機體抗疲勞能力,升高受試者最大耗氧量值,增加機體運動耐力,顯示蠶蛹蛋白對人體具有良好的抗疲勞作用。

    1.3 蠶蛹蛋白的藥用價值

    1.3.1 抗腫瘤作用 湛孝東等[15]運用噻唑藍(MTT)比色法測定了柞蠶蛹水解氨基酸對人肝癌細胞株(Hep G2.2.15)的體外抑制作用,結(jié)果表明蠶蛹水解氨基酸對Hep G2.2.15具有顯著的抑制作用,且對正常肝臟細胞毒性較低。謝書越[16]研究表明,以家蠶蛹蛋白為原料,在水解度(DH)為25.00%,堿性蛋白酶(alcalase)酶解產(chǎn)物(AH)濃度為0.3 mg/mL時,對人胃腺癌細胞(MGC-803)抑制率可達到96.46%。閆琦濤等[17]試驗結(jié)果顯示,在柞蠶蛹蛋白多肽液濃度為150~600 mg/g時,對小鼠肉瘤細胞(S180)和肝癌細胞(H22)的抑瘤率分別達到28.72%~58.18%和27.64%~63.88%。

    1.3.2 降血壓作用 吳瓊英等[18]體外血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制活性試驗結(jié)果表明,家蠶蛹蛋白酶解產(chǎn)物均具有較強的ACE抑制活性,蠶蛹蛋白有可能成為降血壓肽的生產(chǎn)原料。趙靜等[19]以家蠶蛹蛋白為原料,采用6種不同蛋白酶進行酶解產(chǎn)生降血壓肽,結(jié)果顯示在酶解條件為溫度60 ℃、pH值6.50、底物濃度15.00%、加alcalase量1 250 U/g時的酶解液的ACE 抑制率體外檢測為87.75%。趙鐘興等[20]以ACE的抑制率作為降血壓活性的檢測指標(biāo),研究了家蠶蛹蛋白酶解產(chǎn)物的降血壓作用,結(jié)果表明以家蠶蛹蛋白為原料,使用alcalase對其進行酶解,當(dāng)酶解條件為溫度51 ℃、pH值9.05、加alcalase量0.38%時,酶解產(chǎn)物對ACE的抑制率可達到50.30%。

    1.3.3 抗氧化作用 王偉等[21]分析了酶解產(chǎn)物家蠶蛹蛋白肽的抗氧化活性,結(jié)果表明復(fù)合蛋白酶聯(lián)合分步酶解家蠶蛹蛋白的酶解產(chǎn)物在濃度為5.5 mg/mL時,苦基苯肼(DPPH)自由基清除率達95.88%,當(dāng)蠶蛹蛋白的酶解產(chǎn)物濃度為5.0 mg/mL時,總抗氧化力達45 U/mL。肖燕平等[22]以DPPH自由基清除率為指標(biāo),進行家蠶蛹蛋白制備抗氧化肽的工藝研究,結(jié)果表明,在溫度30 ℃、pH值7.50、底物質(zhì)量分數(shù)3.00%、加alcalase量3.50%時,利用alcalase酶解20 min后的家蠶蛹蛋白酶解產(chǎn)物中,分子量Mr≤5 ku 組分的抗氧化活性最強,其對DPPH 自由基清除率為79.90%(質(zhì)量濃度45 μg/mL)。農(nóng)珍妮[23]研究發(fā)現(xiàn),以繅絲后的柞蠶蛹為原料,選用木瓜蛋白酶(papain)作為水解酶,當(dāng)溫度49 ℃、pH值7.00、底物濃度2.10%、加papain量2.0%時,其酶解產(chǎn)物的DPPH自由基清除率為84%。

    1.3.4 抑菌作用 SEIICHI等[24]從家蠶蛹體內(nèi)提取一種新的抗菌肽,人為合成moricin基因,構(gòu)建重組表達載體并在大腸桿菌中大量表達,結(jié)果表明,通過基因工程方法獲得的表達肽與從體內(nèi)提取的抗菌肽具有相同的抑菌活性。羅富英等[25]以天然家蠶蛹抗菌肽為防腐液處理鮮豬肉,檢測結(jié)果表明,家蠶蛹抗菌肽濃度在0.05%時對乳酸菌、微球菌、葡萄球菌的抑菌率分別為89.00%、94.30%、98.80%;鮮豬肉經(jīng)該防腐液處理后在室溫下能貯藏7 d。岳陽等[26]的研究結(jié)果表明,純化后的柞蠶蛹抗菌肽在100 ℃條件下處理20 min對大腸桿菌的抑菌圈直徑為1.80 cm,室溫放置3 h抑菌圈直徑達2.05 cm。

    2 蠶蛹蛋白的提取工藝

    由于蠶蛹的顏色、特殊氣味等因素不易被人接受,限制了蠶蛹蛋白的進一步開發(fā)與利用[27]。此外,較高的油脂含量也不利于蛋白的分離制備,因此在蠶蛹蛋白的制備過程中必須要進行脫脂、脫色和除臭處理。

    2.1 脫脂

    現(xiàn)有的脫脂方法主要有傳統(tǒng)工藝和新型工藝2種。傳統(tǒng)的脫脂方法主要有機械壓榨脫脂法、機械離心脫脂法和溶劑浸出法,新型工藝有超臨界萃取和酶解2種提取方法。

    胡濱等[28]以石油醚(沸程60~90 ℃)為提取溶劑,提取溫度40 ℃,液料質(zhì)量比11∶1,在超聲波功率225 W輔助條件下,提取37 min,家蠶蛹油脂提取率可達30.85%。肖建清等[29]用超臨界CO2流體萃取技術(shù)從家蠶蛹中提取蠶蛹油,在萃取溫度40 ℃,萃取壓力33 MPa時,萃取65 min,蠶蛹油脂提取率可達28.60%。此外,張道平等[30]用酶解的方法提取家蠶蛹中的油脂,通過正交試驗得到優(yōu)化的提取工藝參數(shù)為提取溫度50 ℃、酶解體系pH值8.50、2 500 U/mg胰蛋白酶用量為2%(相對于蛹粉的質(zhì)量分數(shù))、酶解時間4 h,蠶蛹油脂提取率可達23.55%。

    2.2 脫色

    脫色工藝對蠶蛹蛋白的品質(zhì)至關(guān)重要,目前蠶蛹蛋白常用的脫色方法有蛋白質(zhì)修飾法、氧化漂白法和活性炭吸附法等。

    農(nóng)珍妮[23]以木瓜蛋白酶水解的家蠶蛹蛋白酶解液作為試驗原料,研究了在脫色劑用量為1.90%、酶解液質(zhì)量濃度為9.61 mg/mL、pH值為7.20、水浴溫度為60 ℃、脫色時間為1.0 h的條件下,脫色率達94.50%,其中脫色劑為質(zhì)量比1∶1∶1的活性白土、堿性鈣基膨潤土和膨潤土混合物。朱新鵬等[31]選用堿性H2O2對柞蠶蛹蛋白的脫色工藝進行了研究,在H2O2濃度為14.00%、固液質(zhì)量比為1∶25、溫度為75 ℃、pH值為8.50的條件下脫色70 min,亨特白度可達63.96%。粟暉等[32]選擇粉末活性炭作為家蠶蛹蛋白水解液的脫色吸附劑,得到最優(yōu)脫色條件是吸附劑用量為0.20 g(在濃度為1%、體積為50 mL的蛋白水解液中加入0.2 g的吸附劑)、脫色溫度為30 ℃、pH值為5.00、脫色時間為15 min,平均脫色率達91.27%。

    2.3 除臭

    目前蠶蛹蛋白的除臭方法主要有有機溶劑浸提法、氧化法、微生物法、汽提法、吸附法和離子交換樹脂法等[32-37]。周貞兵等[35]研究認為,在Na2CO3濃度為2.00%、浸泡時間為12 h、料液質(zhì)量比為1∶2時,柞蠶蛹脫脂除臭的效果最好。吳建一等[36]選用臭氧除臭,用臭氧脫臭2 h左右,可除去家蠶蛹的特殊臭味,得到無異味的蛋白質(zhì)。任仙娥等[37]利用微生物發(fā)酵法脫除家蠶蛹蛋白的臭味,結(jié)果表明,在活性干酵母用量為0.30%、葡萄糖用量為2.00%、溫度為37 ℃的條件下發(fā)酵28~35 min可完全除臭;在瑞士乳桿菌液(活菌數(shù)108CFU/mL)用量為2.00%、溫度為37 ℃的條件下發(fā)酵7 h也可完全除臭。

    3 蠶蛹蛋白的開發(fā)利用

    3.1 在食品上的應(yīng)用

    世界上許多國家和地區(qū)很早就將昆蟲作為美味食品,蠶蛹是目前為人們所接受的已商業(yè)化的可食用昆蟲之一。蠶蛹蛋白不僅富含各種限制性氨基酸,還含有微量的抗菌肽和溶菌酶等生物活性物質(zhì),具有補充機體營養(yǎng)、促進生長發(fā)育、抗疲勞和提高人體免疫力等多種功能[38-39]。蠶蛹除可直接烹制食用外,也可被加工成各種休閑零食或以原料的形式添加入各種食品中。目前比較成熟且商業(yè)化應(yīng)用的蠶蛹蛋白食品有面包、餅干、面條、蠶蛹酒、蠶蛹片、高級營養(yǎng)醬油、高級全營養(yǎng)素口服液和老年滋補膏等[40]。此外,柞蠶蛹蛋白對人體還具有較好的抗疲勞作用,可以制成抗疲勞的運動飲料[41]。

    3.2 在醫(yī)藥上的應(yīng)用

    蠶蛹蛋白及其相關(guān)產(chǎn)品具有抗腫瘤、抗氧化、抗疲勞、降血壓和增強免疫力等諸多功效。如周菊香等[42]研究結(jié)果表明,家蠶蛹多肽具有降低血清膽固醇和抗氧化的作用。KWON等[43]發(fā)現(xiàn),與口服商業(yè)Dawn 808+酒精組相比,口服0.5 mg/mL的家蠶蛹提取物+酒精組的乙醇脫氫酶活性明顯要高,該結(jié)果表明蠶蛹提取物具有對酒精的解毒活性,可用于開發(fā)解酒類藥物。RYU[44]發(fā)現(xiàn),家蠶蛹的攝入可以導(dǎo)致小鼠體內(nèi)脂肪儲存的減少和脂肪合成的抑制,這給利用蠶蛹開發(fā)減肥類藥物提供了試驗依據(jù)。浦錦寶等[45]研究發(fā)現(xiàn),柞蠶蛹復(fù)合氨基酸給藥14 d后能明顯促進外傷大鼠的創(chuàng)口愈合。此外,蠶蛹蛋白質(zhì)利用微生物轉(zhuǎn)谷氨酰氨酶可交聯(lián)成具有吸附、可降解的功能性載體,用于醫(yī)藥行業(yè)[46]。

    3.3 在飼料業(yè)中的應(yīng)用

    在飼料上,由于干蠶蛹蛋白質(zhì)含量高達68.30%,完全可以作為蛋白質(zhì)添加劑使用。張建紅等[47]研究發(fā)現(xiàn),與不喂家蠶蛹蛋白粉的豬相比,喂食家蠶蛹蛋白粉的豬平均日增加體質(zhì)量高23.6%,并且育肥期縮短,出欄率提高。余平[48]、張建祿等[49]研究表明,在建鯉飼料中添加50.00%以下的脫脂家蠶蛹,同時添加晶體賴氨酸可提高魚體的蛋白質(zhì)沉積水平,但蠶蛹蛋白添加超過50.00%,魚體質(zhì)量增加率、特定生長率、蛋白質(zhì)效率和粗灰分含量顯著低于不添加蠶蛹蛋白對照,而攝食量、脂肪含量顯著高于對照。余平[48研究發(fā)現(xiàn),微生態(tài)制劑發(fā)酵的家蠶蛹全價飼料可以顯著提高飼料中的酸溶性蛋白和益生菌數(shù)量,同時降低飼料pH值、提高飼料適口性。

    3.4 在紡織等其他方面的應(yīng)用

    此外,蠶蛹蛋白在其他領(lǐng)域也有相應(yīng)的應(yīng)用,在紡織業(yè)中,聚酯纖維紡織品和蠶蛹蛋白相結(jié)合得到的新型聚酯織物,開發(fā)出了HRV功能服裝[50-52]。在日化行業(yè)中,以蠶蛹蛋白為原料合成氨基酸類表面活性劑,具有去污、起泡和殺菌的功能,對頭發(fā)和皮膚作用溫和,擴大了蠶蛹蛋白的應(yīng)用領(lǐng)域[53-54]。伍敏暉[54]以蠶蛹油和脫脂蛹蛋白粉為原料合成了N-脂肪?;被徕c鹽(NFAAA)表面活性劑,因NFAAA具有更好的表面張力降低能力和很強的發(fā)泡性能與乳化性能,在日用化學(xué)品特別是在沐浴露、洗頭膏、嬰幼兒洗滌用品等方面都有廣泛的應(yīng)用。在生物領(lǐng)域,蠶蛹中蛋白含量高這一特點非常適合用作生物反應(yīng)器來表達外源蛋白,“蠶生物反應(yīng)器”具有成本低、方便、安全和穩(wěn)定等優(yōu)勢,可用來生產(chǎn)口服疫苗,是一個非常完美的表達系統(tǒng)。目前,已經(jīng)有數(shù)種重組蛋白和病毒在家蠶幼蟲體或家蠶細胞內(nèi)成功表達的報道[55-56]。

    4 存在的問題及展望

    作為一種優(yōu)質(zhì)純天然的全價蛋白質(zhì),蠶蛹蛋白因其極高的營養(yǎng)和藥用價值,得到了研究者的廣泛關(guān)注。但受制于現(xiàn)有的技術(shù)條件,目前國內(nèi)蠶蛹蛋白的實際工業(yè)化產(chǎn)品還比較少。為合理有效地利用蠶蛹蛋白資源,加強功能性蛋白產(chǎn)品的開發(fā),今后的蠶蛹蛋白研究,應(yīng)著力于蠶蛹蛋白水溶性改性、蠶蛹蛋白多肽提取等方面的研究,切實可行地解決蠶蛹蛋白加工、生產(chǎn)、儲存中存在的問題,給現(xiàn)有的蠶業(yè)發(fā)展帶來新的道路。

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    10.16839 /j.cnki.zgcy.2017.01.015

    2016-07-14;接受日期:2016-10-14

    安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新團隊建設(shè)項目(編號 15C0606);安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院院長青年創(chuàng)新基金項目(編號 15B0626);現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(編號 CARS-22);安徽省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系蠶桑專項 (編號 ahnycytx-16)。

    信息:章玉萍(1981—),女,安徽涇縣,博士,副研究員。 Tel:0551-65154995,E-mail:ypzhang6330@163.com

    信息:范濤(1962—),男,碩士,研究員。 Tel:0551-62826686,E-mail:fantao116@sohu.com

    S886.9

    B

    1007-0982(2017)01-0065-05

    ISSN 1007-0982; CN 32-1421 /S

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