手足口病患兒血清神經(jīng)元烯醇化酶、降鈣素原、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y表達水平與病情的關系

袁艷

（河南省鄭州市兒童醫(yī)院 感染科，河南 鄭州 450000）

·經(jīng)驗交流·

手足口病患兒血清神經(jīng)元烯醇化酶、降鈣素原、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y表達水平與病情的關系

袁艷

（河南省鄭州市兒童醫(yī)院 感染科，河南 鄭州 450000）

目的探討手足口病患兒血清神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、降鈣素原（PCT）、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y（NPY）表達水平與病情的關系。方法收集手足口病患兒112例，根據(jù)病情程度分為輕度組（n =48）、重度組（n =40）、危重組（n =24）。對比患兒血清及腦脊液血清神經(jīng)元烯醇化酶（NSE）、降鈣素原（PCT）、S100β蛋白、神經(jīng)肽Y（NPY）水平。結果重度組血清和腦脊液中NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1（sVCAM-1）及NPY水平均明顯高于輕度組（P ＜0.05），危重組血清和腦脊液中NSE、PCT、S100β及NPY水平均明顯高于重度組和輕度組（P ＜0.05）。結論動態(tài)監(jiān)測手足口病患兒血清、腦脊液中NSE、PCT、S100β及NPY水平變化，可了解患兒的神經(jīng)元受損及病情情況，故對重癥手足口病的早期發(fā)現(xiàn)及及時干預具有一定的臨床意義。

手足口??；神經(jīng)元烯醇化酶；降鈣素原；S100β蛋白；神經(jīng)肽

手足口病是一種由腸道病毒引起的急性傳染病，其發(fā)病急，傳染性強，多發(fā)生于學齡前兒童，且在＜3歲兒童中發(fā)病率最高[1]。手、足及口腔等部位出現(xiàn)斑丘疹、皰疹是其主要臨床表現(xiàn)。近10年來，我國手足口病發(fā)生率呈升高趨勢，且重癥病例數(shù)逐年增多，部分重癥患兒臨床病情進展快，神經(jīng)系統(tǒng)受累及因此引發(fā)神經(jīng)源性肺水腫、肺出血等繼發(fā)性并發(fā)癥而病死、病殘，對兒童的生命健康造成了嚴重影響[2]。所以尋找一種可靠的快速判斷病情的指標，對手足口病的防治具有積極意義。血清神經(jīng)元烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）、降鈣素原（procalcitonin,PCT）、S100β蛋白及神經(jīng)肽Y（neuropeptide Y,NPY）水平能較好地反映神經(jīng)細胞損傷情況。本研究收集2015年3月‐2016年12月在本院小兒科就診治療的手足口病患兒血液樣本，檢測血清及腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平，對比不同病情狀態(tài)下各項血清及腦脊液指標的差異，以分析血清NSE、PCT、S100β及NPY水平與病情的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2015年3月‐2016年12月在本院兒科就診的手足口病患兒112例。患兒選擇標準：① 診斷符合手足口病診斷標準[3]。輕度：不伴中樞神經(jīng)系感染。重度：伴神經(jīng)系統(tǒng)受累表現(xiàn)，如頭痛、嘔吐;精神差、嗜睡、驚厥、譫妄；眼球震顫、共濟失調(diào)、肢體抖動，肌陣攣、眼球運動障礙；無力或急性弛緩性麻痹。有腦膜刺激征，腱反射減弱或消失體征。危重：伴有呼吸困難、發(fā)紺、血性泡沫痰、肺部啰音、休克等循環(huán)和呼吸功能不全表現(xiàn)及頻繁抽搐、昏迷、腦疝中樞系統(tǒng)功能受累表現(xiàn)。②月齡≤36個月的患兒。③發(fā)病時間＜48 h。排除標準：①有急、慢性肝炎的患兒；② 有先天性疾病的患兒；③因其他疾病所致心臟損害的患兒；④合并其他腸道疾病的患兒。根據(jù)病情程度分為輕度組、重度組、危重組。輕度組48例，其中男31例，女17例；月齡為8～36個月，平均（17.3±7.6）個月，發(fā)病時間為5～47 h，平均（30.2±3.5）h。重度組40例，其中男27例，女13例；月齡為7～35個月，平均（16.9±7.8）個月，發(fā)病時間為4～47 h，平均（31.4±3.7）h。危重組24例，其中男16例，女8例；月齡為8～35個月，平均（16.7±8.0）個月，發(fā)病時間為7～46 h，平均（31.5±3.9）h。3組性別、月齡、發(fā)病時間對比差異無統(tǒng)計學意義（P ＜0.05），符合可比性的研究要求，均經(jīng)家長或監(jiān)護人知情同意。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑 羅氏ECL1010全自動化學發(fā)光儀（瑞士羅氏公司）；全自動電化學發(fā)光儀（北京中西遠大科技有限公司）。NSE、S100試劑盒購自上海拜力生物科技有限公司。PCT、NPY試劑盒購自上海恒遠生物技術有限公司。

1.2.2 標本采集及檢測 采集患兒入院后24 h內(nèi)空腹外周靜脈血5 ml，同時進行腰椎穿刺取患兒腦脊液2 ml。血標本加入含有肝素抗凝的離心管內(nèi)，置于水平離心機上，室溫下離心10～15 min（3 000 r/min），獲取上層清液，將腦脊液及血清標本置于-80℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。NSE、S100用電化學發(fā)光法檢測，NPY采用放射免疫發(fā)光法檢測，PCT采用免疫熒光法檢測。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS21.0軟件進行數(shù)據(jù)處理。符合正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（±s）表示，3 組間比較采用方差分析，兩兩比較采用SNK檢驗。P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 3組血清NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1及NPY水平比較情況

重度組血清NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1（soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1）及NPY水平均明顯高于輕度組（P ＜0.05），危重組血清 NSE、PCT、S100β、可溶性血管間黏附分子1（sVCAM-1）及NPY水平均明顯高于重度組和輕度組（P ＜0.05），見表1。

2.2 3 組腦脊液 NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平比較情況

重度組腦脊液NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平均明顯高于輕度組（P ＜0.05），危重組腦脊液NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平均明顯高于重度組和輕度組（P ＜0.05），見表2。

表1 3組血清NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平比較情況 （±s）

注：1）與輕度組比較，P ＜0.05；2）與重度組及輕度組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) NSE/(pg/ml) PCT/(ng/ml) S100β/(μg/L) NPY/(μg/L)輕度組 48 16.3±7.1 0.6±0.3 4.6±1.2 114.8±38.2重度組 40 27.6±8.31） 1.2±0.21） 10.7±4.81） 242.0±57.31）危重組 24 38.2±11.32） 1.9±0.42） 23.4±5.82） 367.5±61.62）F值 34.188 15.547 19.725 48.271 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

表2 3組腦脊液NSE、PCT、S100β、sVCAM-1及NPY水平比較情況 （±s）

注：1）與輕度組比較，P ＜0.05；2）與重度組及輕度組比較，P ＜0.05。

組別 例數(shù) NSE/(pg/ml) PCT/(ng/ml) S100β/(μg/L) NPY/(μg/L)輕度組 48 16.9±7.5 0.7±0.4 4.7±1.3 115.1±38.6重度組 40 28.0±8.41） 1.3±0.51） 10.8±4.61） 243.4±57.21）危重組 24 39.1±11.62） 2.0±0.62） 24.0±6.32） 368.2±62.32）F值 34.724 15.867 20.072 48.345 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

3 討論

手足口病患兒一般會在發(fā)病后約1周痊愈，但仍有部分患兒病情進展迅速，可在極短時間內(nèi)累及中樞神經(jīng)，引起神經(jīng)源性肺水腫等并發(fā)癥，是導致患兒病死病殘的主要原因。目前，尚無針對手足口病的有效疫苗，抗炎治療手足口病的療效并不佳。大量研究表明，由新型腸道病毒71型（enterovirus 71,EV71）感染引起的手足口病病情進展極快，可在短期內(nèi)進展至重癥、危重型手足口病，這是由于EV71可通過逆向軸漿運輸機制直接損害神經(jīng)細胞，并通過誘導釋放多種炎癥細胞因子間接損傷神經(jīng)細胞，尤其對腦干部位具有極強的攻擊能力，可見，該病毒對神經(jīng)系統(tǒng)的侵襲性極強[4]。目前，普遍觀點認為，神經(jīng)細胞受損是手足口病發(fā)生的關鍵，一定發(fā)生腦干腦炎，患兒可出現(xiàn)中樞性交感神經(jīng)興奮癥狀，并可繼發(fā)神經(jīng)性肺水腫、肺出血等嚴重并發(fā)癥，嚴重者可致死，極少數(shù)存活患兒會遺留某些神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，如中樞性低通氣障礙綜合征、四肢癱瘓等[5]。流行病學研究發(fā)現(xiàn)，手足口病是我國兒童病死、病殘率最高的急性傳染病[6]。因此，如何對重癥手足口病進行早期識別并采取及時的干預措施，對降低該類疾病的病死率、病殘率具有重要意義。

NSE是神經(jīng)細胞分泌的一種特殊蛋白酶，主要分布于腦神經(jīng)細胞核神經(jīng)內(nèi)分泌細胞胞質(zhì)中[7]。正常生理條件下，人類腦脊液及血循環(huán)中NSE含量極低，當神經(jīng)細胞損傷時，受損的神經(jīng)細胞會釋放NSE并經(jīng)血腦屏障進入腦脊液和血循環(huán)，使腦脊液和血清NSE水平升高，因此可作為神經(jīng)元損傷的敏感性和特異性指標。周綱等[8]研究發(fā)現(xiàn)，急性腦損傷患者的腦脊液和血清NSE水平較正常明顯升高，且與疾病嚴重程度和預后有關。S100β蛋白是一種偏酸性鈣結合蛋白，是神經(jīng)組織蛋白之一，分別于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質(zhì)細胞中。有研究報道，S100β蛋白能特異性反映腦組織的損傷程度，其在腦脊液及血清水平隨腦損傷程度的加重而升高，故可作為腦損傷的早期診斷、病情監(jiān)測及預后評估[9]。NSE和S100β分別存在于神經(jīng)元細胞的胞漿內(nèi)，只有神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細胞受損，使細胞膜的完整性被破壞后，兩者才從相應的細胞中漏出，并通過受損的血腦屏障進入腦脊液和外周血，因此均可作為神經(jīng)元損傷的敏感性和特異性生物學指 標。

PCT是降鈣素的前體，正常情況下，其水平較低，當感染發(fā)生時，其水平明顯升高。與傳統(tǒng)的炎癥指標比較，PCT在發(fā)病早期即發(fā)生明顯改變，靈敏度及特異度高均較高，對病情的早期評估、預后判斷均有極高的價值[10]。腦脊液中PCT水平升高表明顱內(nèi)感染的存在。

NPY屬胰多肽家族成員，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及外周神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布。近年來，大量研究報道，在一些腦組織疾病中，包括腦炎、缺血缺氧性腦病及腦出血等，患者血漿及腦脊液中NPY均明顯升高，其機制可能是，疾病早期機體處于應激狀態(tài)，交感神經(jīng)-兒茶酚胺系統(tǒng)異常激活，引起NPY大量釋放，進入腦脊液和血循環(huán)，引起其水平升高；病毒感染侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使機體免疫反應被激活而釋放一系列炎癥因子，引起血管炎性改變，活化血小板而釋放NPY；顱內(nèi)壓升高、腦水腫等均可致機體釋放應激性激素，加劇NPY水平的升 高[11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，隨著手足口病病情嚴重程度的增加，患兒血清、腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平逐漸增加，提示血清、腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平可作為手足口病患兒神經(jīng)損傷及病情嚴重程度的評估指標。

總而言之，動態(tài)監(jiān)測手足口病患兒血清、腦脊液NSE、PCT、S100β及NPY水平變化，可了解患兒的神經(jīng)元受損及病情情況，故對重癥手足口病的早期發(fā)現(xiàn)及及時干預具有一定的臨床意義。

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R725.1 文獻標識碼：B

10.19338/j.issn.1672-2019.2017.11.013

2017-07-18

（張立芳 編輯）