1 501份中段尿標本分離病原菌及其耐藥性

謝 強(XIE Qiang)，曹明杰(CAO Ming-jie)，陳 玲(CHEN Ling)，徐添天(XU Tian-tian)

(滁州市第一人民醫(yī)院，安徽 滁州 239000)

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1 501份中段尿標本分離病原菌及其耐藥性

謝 強(XIE Qiang)，曹明杰(CAO Ming-jie)，陳 玲(CHEN Ling)，徐添天(XU Tian-tian)

(滁州市第一人民醫(yī)院，安徽 滁州 239000)

目的 了解某院中段尿標本分離病原菌及其對抗菌藥物的耐藥性，為臨床抗菌治療提供實驗室參考依據(jù)。方法對該院2012年10月1日—2015年9月30日臨床送檢的中段尿標本分離病原菌進行鑒定和藥敏試驗，應用WHONET 5.6軟件對藥敏結(jié)果進行分析。結(jié)果1 501份中段尿標本共檢出病原菌658株，其中革蘭陽性菌151株，占22.95%，以凝固酶陰性葡萄球菌和腸球菌為主；革蘭陰性菌456株，占69.30%，其中大腸埃希菌占45.44%；真菌51株，占7.75%。病原菌對常用抗菌藥物耐藥性差異較大，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株的檢出率分別為52.84%、41.67%和33.33%，ESBLs菌株的耐藥性高于非產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株。結(jié)論該院中段尿標本分離的病原菌以大腸埃希菌為主，分離菌株對常用抗菌藥物耐藥嚴重。

尿培養(yǎng)； 病原菌； 耐藥性； 抗藥性，微生物； 合理用藥

尿路感染是臨床上常見的泌尿系統(tǒng)感染性疾病之一，與男性相比，女性更容易患泌尿系統(tǒng)感染。文獻[1-2]報道，約40%～50%的女性一生中至少患1次泌尿系統(tǒng)感染，隨著年齡的增長，不管是男性還是女性，患泌尿系統(tǒng)感染的概率都在增高。中段尿培養(yǎng)是診斷泌尿系統(tǒng)感染的重要手段[3]。為了解泌尿系統(tǒng)感染病原菌的種類、分布及其耐藥性，回顧性分析本院2012年10月1日—2015年9月30日送檢中段尿標本分離的病原菌及其耐藥性，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 本院2012年10月1日—2015年9月30日1 501份臨床送檢的中段尿標本分離的病原菌，去除同一患者的重復菌株。

1.1.2 試劑與儀器 MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動細菌分析儀和其配套的NC50和PC33鑒定藥敏卡，法國生物梅里埃公司的API板條。

1.1.3 質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC 25923，糞腸球菌ATCC 29213，大腸埃希菌ATCC 25922，肺炎克雷伯菌ATCC 700603，銅綠假單胞菌ATCC 27853。

1.2 方法

1.2.1 標本采集和培養(yǎng) 標本的采集與培養(yǎng)參照第3版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行。

1.2.2 菌株鑒定和藥敏試驗 中段尿培養(yǎng)的陽性標準：以革蘭陰性菌菌落數(shù)≥105CFU/mL、革蘭陽性菌菌落數(shù)≥104CFU/mL。培養(yǎng)陽性的標本再采用MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動細菌分析儀和其配套的NC50和PC33鑒定藥敏卡進行細菌鑒定和藥敏試驗。所有菌株的藥敏結(jié)果均根據(jù)美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)2012判斷標準[4]進行判斷。藥敏結(jié)果中的中介歸入耐藥。真菌鑒定采用梅里埃API板條進行鑒定。

1.2.3 超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測 MicroScan WalkAway 96 PLUS全自動細菌分析儀根據(jù)藥敏結(jié)果自動判斷產(chǎn)ESBLs。

1.3 統(tǒng)計方法 應用WHONET 5.6軟件對藥敏結(jié)果進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布 2012年10月1日—2015年9月30日該院共送檢中段尿標本1 501份，分離病原菌658株。其中革蘭陽性菌151株，占22.95%；革蘭陰性菌456株，占69.30%；真菌51株，占7.75%。見表1。

2.2 主要革蘭陽性菌的耐藥情況 56株CNS中檢出耐甲氧西林CNS (MRCNS)45株，占80.36%。其中主要的革蘭陽性球菌對抗菌藥物的藥敏結(jié)果見表2。

2.3 主要革蘭陰性菌的耐藥情況 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌中超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的檢出率分別為52.84%、41.67%和33.33%。上述產(chǎn)ESBLs菌株對大多數(shù)抗菌藥物的耐藥率明顯高于非產(chǎn)ESBLs菌株。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對常用抗菌藥物的耐藥率見表3，其余革蘭陰性桿菌的具體藥敏結(jié)果見表4。

表1 臨床1 501份中段尿標本分離病原菌及構(gòu)成

表2 主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的藥敏結(jié)果(%)

/：未檢測

表3 大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對抗菌藥物的耐藥率(%)

-：天然耐藥

表4 其他革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的藥敏結(jié)果(%)

-：天然耐藥；/：未檢測

3 討論

醫(yī)院檢驗科2012年10月1日—2015年9月30日共收到中段尿培養(yǎng)標本1 501份，檢出病原菌658株，陽性率43.84%，高于蔡輝等[5]的報道。該醫(yī)院3年中分離的病原菌以革蘭陰性菌為主，占69.30%，病原菌以大腸埃希菌(45.44%)為主，其次為肺炎克雷伯菌和變形桿菌屬細菌；革蘭陽性菌中以腸球菌屬(10.18%)和CNS(8.51%)為主，其中腸球菌屬中以糞腸球菌(5.01%)和屎腸球菌(4.56%)為主；真菌以白假絲酵母菌(4.56%)為主。此結(jié)果與國內(nèi)外有關(guān)文獻[5-8]報道一致。

本組調(diào)查結(jié)果顯示，大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的檢出率分別為52.84%和41.67%，低于國內(nèi)的有關(guān)報道[6,9]。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的非產(chǎn)ESBLs株對碳青霉烯類抗生素的耐藥率高于產(chǎn)ESBLs株，可能與非產(chǎn)ESBLs株的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌產(chǎn)生的碳青霉烯酶有關(guān)。在非產(chǎn)ESBLs株中分別檢出產(chǎn)碳青霉烯酶的大腸埃希菌2株和產(chǎn)碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌3株。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的產(chǎn)ESBLs株對除碳青霉烯類抗生素以外的其他監(jiān)測藥物的耐藥率均高于非產(chǎn)ESBLs株。產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對碳青霉烯類抗生素耐藥率<5.00%，對含β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率為 6.33%，對氨基糖苷類抗生素阿米卡星的耐藥率也為6.33%，而對青霉素類、頭孢菌素類、喹諾酮類和氨曲南的耐藥率>70%，所以臨床治療過程中對于產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的泌尿系統(tǒng)感染患者可以選擇含β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的抗生素。非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥率<3.00%，對含β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率僅為1.42%，對頭孢菌素類的耐藥率均<15%，對氨曲南的耐藥率為8.51%，對喹諾酮類抗菌藥物的耐藥率>30%，所以臨床治療過程中對于非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的泌尿系統(tǒng)感染患者選擇第二、三代頭孢菌素可以取得很好的治療效果。值得注意的是，本組大腸埃希菌對喹諾酮類抗菌藥物的耐藥率較高，可能與臨床醫(yī)生常經(jīng)驗性選擇喹諾酮類抗菌藥物治療泌尿系統(tǒng)感染，產(chǎn)生耐藥性有關(guān)。因此，臨床醫(yī)生在經(jīng)驗性選擇抗菌藥物時應避免選擇喹諾酮抗菌藥物。產(chǎn)ESBLs肺炎克雷伯菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥率為5.00%，對含β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率為20.00%，對青霉素類、頭孢菌素類、喹諾酮類、復方磺胺甲口惡唑和氨曲南耐藥率較高；非產(chǎn)ESBLs株對碳青霉烯類藥物的耐藥率為10.71%，對β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的抗生素哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率為14.29%，對除青霉素類外監(jiān)測抗菌藥物的耐藥率均<36.00%。其余腸桿菌科細菌對碳青霉烯類抗生素較敏感。非發(fā)酵菌中，以銅綠假單胞菌和不動桿菌屬細菌檢出為主，銅綠假單胞菌對碳青霉烯類抗生素最敏感，敏感率為91.67%；而不動桿菌屬細菌對常用抗菌藥物耐藥率較高，非發(fā)酵菌中多重耐藥菌檢出率較高，應引起臨床醫(yī)生的重視。

本院中段尿培養(yǎng)的革蘭陽性菌以腸球菌屬和CNS為主。腸球菌屬和CNS對呋喃妥因、萬古霉素和利奈唑胺的敏感率最高，僅檢出4株呋喃妥因耐藥的屎腸球菌和1株萬古霉素耐藥的糞腸球菌。屎腸球菌對高濃度慶大霉素的耐藥率>65%，提示有>60%的屎腸球菌對慶大霉素聯(lián)合氨芐西林無協(xié)同作用。由于呋喃妥因價格便宜且腸球菌對其敏感性較高，臨床發(fā)現(xiàn)泌尿系統(tǒng)感染腸球菌時經(jīng)驗性用藥首選呋喃妥因。隨著抗菌藥物的廣泛應用及各種侵入性治療的廣泛開展，一般認為由非致病性CNS引起的醫(yī)院感染明顯增多，且存在較高比例的多重耐藥。本組監(jiān)測結(jié)果顯示，CNS中MRCNS的檢出率為80.36%，高于有關(guān)文獻[10]報道。CNS對利奈唑胺和萬古霉素均敏感，對奎奴普丁/達福普汀和利福平較敏感。目前，真菌引起的泌尿系統(tǒng)感染也越來越多，本組調(diào)查結(jié)果顯示，由真菌引起的泌尿系統(tǒng)感染占7.75%。

綜上所述，泌尿系統(tǒng)感染的致病菌以革蘭陰性菌為主，尤其是大腸埃希菌，且存在多重耐藥性，臨床應重視病原學檢查，根據(jù)藥敏結(jié)果選擇抗菌藥物，從而提高治療的效果。

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(本文編輯：孟秀娟)

Distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from 1 501 urine specimens

( The First People’s Hospital of Chuzhou, Chuzhou 239000, China)

10.3969/j.issn.1671-9638.2016.12.018

2016-03-20

謝強(1982-)，男(漢族)，安徽省滁州市人，檢驗師，主要從事細菌耐藥研究。

謝強 E-mail:xieqiang0912@163.com

R969.3

B

1671-9638(2016)12-0968-04