海鮮菇優(yōu)良菌株篩選和栽培營養(yǎng)條件的優(yōu)化研究*

謝春芹，賈 君，凡軍民，陳 庶（江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 句容 212400）

〈育種與馴化〉

海鮮菇優(yōu)良菌株篩選和栽培營養(yǎng)條件的優(yōu)化研究*

謝春芹，賈 君，凡軍民，陳 庶
（江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 句容 212400）

為了研究6個海鮮菇菌株的菌絲生長情況，在相同的栽培條件下，將性狀優(yōu)良的菌株栽培到3種不同配方的培養(yǎng)基中，測定不同菌株間的親緣關(guān)系、菌絲生長速度、現(xiàn)蕾、子實體形狀和產(chǎn)量。結(jié)果表明，不同的菌株間菌絲生長速度差異不顯著，同一菌株在不同配方培養(yǎng)基中的菇形和產(chǎn)量存在一定差異。其中來自福建農(nóng)林大學(xué)的海鮮菇菌株在配方Ⅲ的培養(yǎng)基中，菇形優(yōu)美、產(chǎn)量高，商品菇的生物轉(zhuǎn)化率達95．6%。

海鮮菇；菌株；篩選；營養(yǎng)條件

海鮮菇 [Hypsizygus marmoreus（Peck）H．E．Bigelow]，隸屬于擔子菌亞門（Basidiomycotina） 層菌綱（Hymenomycetes）傘菌目（Agaricales）白蘑科（Tricholomataceae）玉蕈屬（Hypsizigus），又稱真姬菇、斑玉蕈，菇形美觀，質(zhì)地脆嫩，營養(yǎng)豐富，因具有蟹香味而聞名，是近年來風(fēng)靡菌類市場的珍稀菇種[1]。每100克鮮海鮮菇中含水分88%、粗蛋白3．0 g、粗脂肪0．08 g、粗纖維1．03 g、碳水化合物7．4 g、灰分0．70 g、維生素B10．64 mg、維生素B25．84 mg、維生素B6186．99 mg、維生素C 13．8 mg。海鮮菇中的蛋白質(zhì)含17種氨基酸，占干重13．27%，包括人體所必需8種氨基酸，經(jīng)常食用海鮮菇的人可以預(yù)防衰老，延長壽命，而且海鮮菇具有抗癌、防癌、提高免疫力等功效，是一種低熱量、低脂肪的保健食品[1-3]。

目前，國內(nèi)外研究人員對于海鮮菇的研究涉及范圍較廣，但其研究重點仍在培養(yǎng)條件和營養(yǎng)組分方面[2]，該試驗進行了不同栽培營養(yǎng)條件對海鮮菇出菇生長影響的研究，以期為海鮮菇高效、優(yōu)質(zhì)的工廠化栽培提供實踐和理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 菌種及來源

供試6株海鮮菇菌種分別來自江蘇、福建、上海和山東的大學(xué)和研究所（表1）。

表1 海鮮菇菌株和來源Tab．1 Strains and source of Hypsizygus marmoreus

1.2 菌株生長性狀的測定

1．2．1 母種培養(yǎng)基配方和制備

試驗采用加富PDA培養(yǎng)基，按常規(guī)方法進行平板培養(yǎng)基的制備[4]。

1．2．2 接種與培養(yǎng)

按無菌操作要求將保藏的菌種接種在加富PDA培養(yǎng)基平板上，然后將平板放入人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為溫度22℃，空氣相對濕度（RH）60%～70%，避光[5-6]。

1.3 優(yōu)良菌株栽培培養(yǎng)基的選擇

1．3．1 栽培培養(yǎng)基配方

根據(jù)海鮮菇對營養(yǎng)的需求特點，試驗設(shè)計3種海鮮菇工廠化栽培配方，見表2。

表2 海鮮菇工廠化栽培配方Tab．2 Factorization cultivation formula of Hypsizygus marmoreus

1．3．2 培養(yǎng)基的配制與裝袋

根據(jù)配方中各組分的配比，準確稱取各營養(yǎng)成分，按常規(guī)方法進行拌料[7]，采用單開口折角聚丙烯塑料袋進行裝料，栽培袋的規(guī)格為17 cm×33 cm× 0．005 cm，利用雙沖壓裝袋機裝料，每袋裝濕料1．2 kg，料高15 cm左右，最后套上套環(huán)，蓋上透氣型防水塑料蓋。

1．3．3 培養(yǎng)基的滅菌與接種

裝好料的栽培袋立即進行滅菌，原則上從拌料到滅菌不超過4 h，采用高壓蒸汽滅菌，在121℃～125℃條件下滅菌2 h。

滅菌結(jié)束后，將菌包及時移入專用的冷卻室內(nèi)進行機械強制冷卻，待料溫降至25℃以下時即可接種。按工廠化接種操作要求，每袋接入1支木條菌種，并用菌種填滿孔穴、料面與袋口之間的空隙[4-7]。

1．3．4 菌絲培養(yǎng)

接種完后將菌包整筐置于養(yǎng)菌室內(nèi)，保持溫度為23℃～25℃，空氣相對濕度為60%～70%，通風(fēng)2次·d-1～3次·d-1，在完全黑暗的條件下進行培養(yǎng)。接種后約40 d左右菌絲即可吃透培養(yǎng)料，但此時菌絲稀疏細弱、養(yǎng)分積累少，還需繼續(xù)培養(yǎng)50 d左右促使菌絲養(yǎng)分的充分積累，當料面出現(xiàn)淡黃色水珠，袋壁菌絲顏色由潔白轉(zhuǎn)為黃白色，出現(xiàn)粗壯菌絲束時標志著菌絲已達到生理成熟，即可搔菌出菇[7-8]。

1．3．5 搔菌與出菇管理

將已完成生理成熟菌包的海綿蓋和套環(huán)撥掉，袋口向外翻卷至料面上方2 cm～3 cm，用消毒過的搔菌耙去除料面厚0．5 cm左右老菌皮，隨之蓋上無防布，并噴水增濕，空氣相對濕度保持在85%～95%，溫度為13℃～16℃，從第3天～第5天開始，每天光照300 lx～500 lx，連續(xù)照射8 h～10 h，一般10 d左右，料面上即出現(xiàn)原基，按常規(guī)管理 25 d左右[8]，當菇柄長至13 cm～15 cm，菇蓋直徑2 cm～3 cm時即可采收。

采收時，一手抓住菌包，一手握住菌柄將整叢菇擰下。在16℃左右的包裝間去雜切根后分級包裝。

1．3．6 測定項目

（1）不同菌株菌絲長勢的測定

接種后，每2天測量1次菌絲的生長量，每次均在同一時間測量，并對各配方培養(yǎng)基上菌絲生長情況進行觀察比較，依據(jù)菌絲濃密、菌絲顏色等將菌絲長勢劃分3級，即＋＋＋：菌絲濃密，濃白；＋＋：菌絲稀疏，白色；＋：菌絲長勢弱。菌絲生長速度：采用十字交叉法測定平均直徑。

（2）同一菌株在不同配方中產(chǎn)量的測定

以單個菌袋的新鮮子實體來表示，測量方法為將采收的子實體切根后，用電子稱稱量，并計算出生物轉(zhuǎn)化率[9]。生物轉(zhuǎn)化率為子實體鮮重除以培養(yǎng)料干重乘以100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 來源不同菌株間的親緣關(guān)系

從江蘇、福建、上海和山東地區(qū)共引進海鮮菇品種6個，通過菌株間的拮抗試驗對所引進品種的親緣關(guān)系進行鑒定，見圖1。

由圖1可見，來源不同的菌株間沒有明顯的拮抗現(xiàn)象，說明各地區(qū)在生產(chǎn)上使用的海鮮菇菌株間的親緣關(guān)系很近。

2.2 不同菌株在同一培養(yǎng)基上的菌絲生長性狀

將來源不同海鮮菇菌株接種到加富PDA平板培養(yǎng)基上，在相同的條件下，比較不同菌株的菌絲生長情況，通過定期測量菌株菌絲的日生長速度，觀察菌絲的長勢情況，見表3。

表3 6個菌株菌絲活性比較Tab．3 Comparison of hyphae activity among six strains

圖1 不同菌株間菌絲的拮抗Fig．1 Antagonism phenomenon of hyphae among different strains

由表3可見，相同的培養(yǎng)條件下，福建九湖食用菌研究所引進的海鮮菇菌株，其菌絲日生長速度較快，而山東壽光、江蘇高郵和福建農(nóng)林大學(xué)引進的菌株菌絲濃密、潔白。

2.3 不同栽培養(yǎng)配方培養(yǎng)基對海鮮菇生長的影響

2．3．1 不同栽培養(yǎng)配方培養(yǎng)基對海鮮菇菌絲生長的影響

將上述試驗中菌絲生長速度快且濃密的來自福建農(nóng)林大學(xué)的菌株，栽培到3種不同配方培養(yǎng)基中，在相同的條件下進行培養(yǎng)，不同配方培養(yǎng)基中菌絲生長存在一定差異，見圖2。

由圖2可見，3種配方中，海鮮菇菌株在配方Ⅱ培養(yǎng)基中生長速度最慢，從接種到菌絲滿袋需42 d，而在配方Ⅰ和配方Ⅲ中，則需要40 d。

2．3．2 不同栽培配方培養(yǎng)基對海鮮菇現(xiàn)蕾的影響

將來自福建農(nóng)林大學(xué)菌株，栽培到3種不同配方培養(yǎng)基中，在相同條件下進行培養(yǎng)，不同配方培養(yǎng)基中海鮮菇現(xiàn)蕾時間存在一定的差異，見圖3。

圖2 海鮮菇菌株在3種栽培配方培養(yǎng)基中菌絲生長情況Fig．2 Hyphae growth of Hypsizygus marmoreus strains in three kinds of culture medium formula

圖3 海鮮菇菌株在3種栽培配方培養(yǎng)基中現(xiàn)蕾情況Fig．3 Budding of Hypsizygus marmoreus strains in three kinds of culture medium formula

由圖3可見，3種配方中，海鮮菇菌株在配方Ⅱ的培養(yǎng)基中現(xiàn)蕾需要的時間最長，從菌絲滿袋到現(xiàn)蕾需15 d，而在配方Ⅰ和配方Ⅲ中，則需要12 d。2．3．3 不同栽培配方培養(yǎng)基對海鮮菇產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率的影響

將來自福建農(nóng)林大學(xué)菌株，栽培到3種不同配方培養(yǎng)基中，在相同條件下進行培養(yǎng)，不同配方培養(yǎng)基中海鮮菇產(chǎn)量存在明顯的差異，見表4。

表4 海鮮菇菌株在3種栽培配方培養(yǎng)基中子實體生長情況Tab．4 Fruiting bodies of Hypsizygus marmoreus strains in three kinds of culture medium formula

由表4可見，3種配方中，海鮮菇菌株在配方Ⅱ的培養(yǎng)基中鮮菇產(chǎn)量最低，生物轉(zhuǎn)化率為73．98%，而在配方Ⅲ中鮮菇產(chǎn)量最高，生物轉(zhuǎn)化率為81．53%。

3 小結(jié)與討論

3.1 來源不同菌株間的菌絲生長差異不顯著

來源不同的菌株在相同加富PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，其菌絲生長速度差異不顯著，由此可見，目前生產(chǎn)所用不同菌株在母種培養(yǎng)期對營養(yǎng)條件的需求差異不大。

3.2 不同配方栽培的海鮮菇產(chǎn)量存在一定差異

對同一菌株，在工廠化栽培中不同的栽培配方對海鮮菇的菌絲生長、現(xiàn)蕾、產(chǎn)量、菇形有一定的影響，生產(chǎn)上宜選用棉籽殼54%、粗木屑15%、麩皮20%、玉米粉5%、豆粕5%、石膏粉1%，pH7～8的配方作為海鮮菇栽培配方。

綜上所述，不同來源海鮮菇菌株的菌絲在母種培養(yǎng)階段對營養(yǎng)的需求差異不明顯，但在工廠化栽培中，對栽培營養(yǎng)的需求有一定的差異。因此，生產(chǎn)上要根據(jù)不同的菌株選用不同的栽培配方，以獲得高產(chǎn)。

[1]黃毅．圖解海鮮菇袋式栽培技術(shù)（一）[J]．食藥用菌，2015，23（3）：143-146．

[2]暴增海，楊飛，王增池．不同營養(yǎng)條件對海鮮菇菌絲生長量的影響[J]．北方園藝，2006（6）：180-181．

[3]阮夢玲，阮毅，余金菊．海鮮菇高產(chǎn)袋栽技術(shù)[J]．食用菌，2011，19（3）：51-52．

[4]盧享瓊．海鮮菇工廠化高效栽培技術(shù)[J]．食用菌，2013（4）：65-66．

[5]張亞麗，趙書光，賈金川，等．海鮮菇工廠化高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)袋式栽培技術(shù)[J]．上海蔬菜，2015（5）：93-94．

[6]吳瓊峰，詹位梨．海鮮菇工廠化高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培技術(shù)[J]．福建農(nóng)業(yè)科技，2013（9）：49-51．

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[8]白雪萍，趙麗，田鑫．海鮮菇栽培環(huán)境因子監(jiān)控系統(tǒng)設(shè)計[J]．中國農(nóng)機化學(xué)報，2016，37（5）：66-70．

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Research on Good Strains Screening and Cultivation Nutrition Conditions Optimization of Hypsizygus marmoreus

XIE Chun-qin,JIA Jun,FAN Jun-min,CHEN Su
（Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry,Jurong 212400,China）

In order to study the hyphae growth of 6 Hypsizygus marmoreus strains in the same cultivation conditions,the characters of superior strains was cultivated in three different medium,the genetic relationship among different strains,growing rate of hyphae,mushrooms in the early growth,shape of fruiting bodies and yield were determined．The results showed that the growth rate of hyphae was not significant difference among different strains,and mushroom shape and yield were different for the same strain in the different media．Among of them,the mushroom shape of H.marmoreus strains from Fujian Agriculture and Forestry University was graceful,high output,and the biological conversion of commodity mushroom reached 95．6%in formulaⅢ．

Hypsizygus marmoreus;strains;screening;nutritional conditions

S646.9

A

1003-8310（2017）01-0010-04

10．13629/j．cnki．53-1054．2017．01．003

江蘇省農(nóng)業(yè)三新工程項目（SXGC（2015）313）；2014年度江蘇省省教育廳“青藍工程”支助項目。

謝春芹（1976-），女，碩士，副教授，主要從事食（藥）用菌教學(xué)與科研。E-mail:xiechunqin＠163．com

2016-11-12