芥菜型油菜脂肪酸含量的變異、相關(guān)性分析及芥酸調(diào)控基因FAE1特異引物設(shè)計(jì)

田恩堂, 李魯峰, 賈世燕, 林樹春

( 1. 貴州大學(xué) 油料作物研究所， 貴陽 550025； 2. 杭州市蕭山區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)研究所，杭州 311200； 3. 杭州市蕭山區(qū)種子管理站， 杭州 311200 )

芥菜型油菜脂肪酸含量的變異、相關(guān)性分析及芥酸調(diào)控基因FAE1特異引物設(shè)計(jì)

田恩堂1*, 李魯峰2, 賈世燕3, 林樹春1

( 1. 貴州大學(xué) 油料作物研究所， 貴陽 550025； 2. 杭州市蕭山區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)研究所，杭州 311200； 3. 杭州市蕭山區(qū)種子管理站， 杭州 311200 )

芥菜型油菜是我國蕓苔屬的三大油料作物之一，具有耐旱、抗病蟲等優(yōu)良特性；而我國是芥菜型油菜的重要起源中心，具有豐富的種質(zhì)資源。該研究從全國各地搜集了34份芥菜型油菜，在貴陽環(huán)境條件下種植，其脂肪酸含量(芥酸、油酸、硬脂酸、亞麻酸和亞油酸)表現(xiàn)出豐富的變異，并呈正態(tài)分布。結(jié)果表明：這些芥菜型油菜種質(zhì)資源的不同脂肪酸含量間的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)，芥酸和油酸間呈極顯著負(fù)相關(guān)，亞麻酸和硬脂酸呈極顯著的正相關(guān)，亞麻酸和亞油酸呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。利用這些材料的脂肪酸含量進(jìn)行主成分分析，發(fā)現(xiàn)絕大部分材料(30份，占88.2%)集中在二維圖的特定區(qū)域，只有少數(shù)其它材料散落在圖中其它區(qū)域，他們分別是SL63、棱角油菜、T6342和長(zhǎng)陽黃芥，這些變異較大的材料在芥菜型油菜的育種中可以發(fā)揮特殊作用。此外，運(yùn)用來自甘藍(lán)型油菜和甘藍(lán)的芥酸調(diào)控基因FAE1的已知序列，并設(shè)計(jì)了FAE1特異引物，而引物在全部34份芥菜型油菜種質(zhì)資源中均表現(xiàn)出了較好的擴(kuò)增效果。因此證實(shí)芥菜型油菜中至少含有一個(gè)FAE1拷貝。該研究結(jié)果對(duì)于芥菜型油菜育種在我國的開展及其未來的分子育種具有重要的指導(dǎo)意義。

芥菜型油菜， 脂肪酸， 引物設(shè)計(jì)，F(xiàn)AE1， 基因擴(kuò)增

甘藍(lán)型油菜(Brassicanapus, AACC, 2n=38)、芥菜型油菜(B.juncea, AABB, 2n=36)和白菜型油菜(B.rapa, AA, 2n=20)是我國蕓苔屬的三大油料作物(何余堂等，2002)。耐旱、耐貧瘠、黃籽、抗病蟲、可做調(diào)料和蔬菜等獨(dú)特品性是芥菜型油菜的重要特征。我國是芥菜型油菜的重要起源中心，具有豐富的種質(zhì)資源。加強(qiáng)芥菜型油菜的理論和應(yīng)用研究有利于抗性基因資源在甘藍(lán)型油菜和白菜型油菜中的應(yīng)用，及促進(jìn)山地農(nóng)業(yè)的發(fā)展和保障我國油料安全。芥菜型油菜在我國西南地區(qū)廣泛種植，如貴州、四川、云南，因部分基因型表現(xiàn)出獨(dú)特的口味，可以作為蔬菜食用，也可作為調(diào)料用芥末。脂肪酸是芥菜型油菜重要的品質(zhì)性狀，包括芥酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和亞麻酸等。其中，芥酸是油料作物重要的有害脂肪酸，大量飲食對(duì)心肌纖維、發(fā)育、生殖力等都有危害(張書芬等，2008)。我國規(guī)定甘藍(lán)型油菜新品種的芥酸含量≤3%(李培武等，2003)。而芥菜型油菜由于低芥酸種質(zhì)資源的匱乏，導(dǎo)致低芥酸芥菜型油菜品種還沒有出現(xiàn)。硬脂酸是飽和脂肪酸，長(zhǎng)期食用可降低體內(nèi)膽固醇含量(劉立俠等，2005)。油酸是單不飽和脂肪酸，具有降低膽固醇、降血糖，降酯密度等的作用(張宏軍等，2008)。此外，亞麻酸和亞油酸屬于多不飽和脂肪酸，具有抗血栓、降血壓、抗老化等功效，但如果含量過高會(huì)導(dǎo)致食用油易氧化而縮短貨架期(Tian et al, 2014)。因此，加強(qiáng)脂肪酸的研究對(duì)于指導(dǎo)芥菜型油菜的育種，增強(qiáng)人們的身體健康具有重要的意義。

油菜種質(zhì)資源脂肪酸含量的變異及不同含量之間的相關(guān)性分析在甘藍(lán)型油菜中開展較多(高志宏等，2013；黃桃翠，2014；劉念等，2014;王健勝和侯桂玲，2015；王健勝等，2015)。蔡?hào)|芳(2013)搜集192份甘藍(lán)型油菜品種和自交系的自然群體，分析不同材料的脂肪酸變異，對(duì)不同脂肪酸間的相關(guān)性及主成分進(jìn)行了分析，同時(shí)還獲得了與這些品質(zhì)性狀緊密連鎖的SSR和AFLP標(biāo)記。陳碧云(2014)對(duì)488份從全球搜集的甘藍(lán)型油菜的種質(zhì)資源進(jìn)行了脂肪酸含量變異和農(nóng)藝性狀的評(píng)價(jià)，從中發(fā)現(xiàn)了許多優(yōu)良的育種材料，同時(shí)獲得了與部分重要農(nóng)藝和品質(zhì)性狀相關(guān)聯(lián)的SNP標(biāo)記。林寶剛等(2010)對(duì)117份國外甘藍(lán)型油菜種質(zhì)資源的脂肪酸含量進(jìn)行了聚類分析, 并研究了它們之間的遺傳親緣關(guān)系, 通過分析獲得了大量?jī)?yōu)異育種材料。相對(duì)而言，芥菜型油菜中脂肪酸含量的相關(guān)研究較少。

FAE1基因是調(diào)控長(zhǎng)鏈脂肪酸芥酸合成的基因，其最早是在擬南芥的突變體中被發(fā)現(xiàn)和鑒定出來的(James & Dooner, 1990; Lemieux et al, 1990)。在甘藍(lán)型油菜中，F(xiàn)ourmann et al (1998)根據(jù)擬南芥中FAE1的基因序列設(shè)計(jì)了兼并引物， 并對(duì)此基因進(jìn)行擴(kuò)增和測(cè)序，共獲得了2個(gè)FAE1基因拷貝，分別是BN-FAE1.1和BN-FAE1.2。Barret et al (1998)

也在甘藍(lán)型油菜中擴(kuò)增出了芥酸調(diào)控基因FAE1的2個(gè)拷貝: CE7(1 647 bp，編碼506個(gè)氨基酸)和CE8(1 654 bp，編碼505個(gè)氨基酸), 同時(shí)還進(jìn)一步證實(shí)了其是甘藍(lán)型油菜中芥酸的調(diào)控基因。Das et al(2002)在白菜(B.campestris, AA, 2n=20)和甘藍(lán)(B.oleraceaCC, 2n=18)中分別克隆一個(gè)調(diào)控芥酸的FAE1基因拷貝，同時(shí)發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)拷貝與甘藍(lán)型油菜中克隆的FAE1基因有98%的序列相似性。此外，我們還需要關(guān)注芥菜型油菜中不同脂肪酸之間的相關(guān)性，如在甘藍(lán)型油菜中芥酸和油酸呈負(fù)相關(guān)(周永明和劉后利，1987)，從而指導(dǎo)芥菜型油菜的育種工作。脂肪酸調(diào)控機(jī)理研究及其生物合成途徑解析，對(duì)于從分子水平上指導(dǎo)芥菜型油菜的分子育種和充分挖掘利用其潛在的商業(yè)價(jià)值，保障人們的身體健康具有重要的意義。

本研究選用34份來自全國各地的芥菜型油菜種質(zhì)資源，在貴陽環(huán)境條件下種植并測(cè)定它們的脂肪酸含量，同時(shí)對(duì)不同脂肪酸間的相關(guān)性進(jìn)行分析，此外還對(duì)調(diào)控芥酸含量的基因進(jìn)行了初步擴(kuò)增。

1 材料與方法

1.1 材料

本研究選用的34份芥菜型油菜種質(zhì)資源分別來自貴州(6份)、四川(6份)、云南(6份)、湖北(4份)、重慶(3份)、湖南(2份)、陜西(2份)、河南(1份)、江蘇(1份)、江西(1份)、內(nèi)蒙古(1份)、西藏(1份)(表1)，并且具有豐富的表型變異和品質(zhì)性狀變異。我們于2014年10月份將這34份芥菜型油菜種質(zhì)資源種植于貴州大學(xué)農(nóng)場(chǎng)，每份材料播種2行，每個(gè)材料于開花期隨機(jī)選取3個(gè)單株套袋自交并收取自交種子。

1.2 方法

每份芥菜型油菜取3 g飽滿的種子，利用近紅外方法測(cè)定其種子的脂肪酸含量。每份材料重復(fù)測(cè)定2次，并取其均值作為該材料最終分析用數(shù)據(jù)。脂肪酸含量以%表示。

在苗期，采集全部材料的幼嫩葉片提取DNA(Somers et al，1998)。根據(jù)美國國立生物技術(shù)信息中心 (NCBI，National Center for Biotechnology Information, 網(wǎng)址為http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)的基因序列信息，分別搜索到芥酸調(diào)控的關(guān)鍵基因“FAE1”的關(guān)聯(lián)序列，然后利用引物設(shè)計(jì)軟件Primer Premier 6設(shè)計(jì)其特異引物，并在全部34份研究材料中進(jìn)行了PCR擴(kuò)增。PCR產(chǎn)物在2%的瓊脂糖膠上檢測(cè)并照相。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

所得的數(shù)據(jù)利用SPSS 20軟件進(jìn)行分析，包括描述性統(tǒng)計(jì)、正態(tài)分布圖、相關(guān)性分析等。

2 結(jié)果與分析

2.1 群體性狀變異

來自貴陽以外的34份芥菜型油菜種質(zhì)資源群體在貴陽環(huán)境條件下的重要脂肪酸：芥酸、油酸、硬脂酸、亞油酸和亞麻酸含量變異豐富，均呈現(xiàn)正態(tài)分布(圖版Ι)。從圖版Ι可以看出，此群體材料的芥酸含量均值為52.5%，變異系數(shù)為6.3%；油酸含量均值為12.4%，變異系數(shù)為27.1%；硬脂酸含量均值為0.1%，變異系數(shù)為175.6%；亞油酸含量均值為16.0%，變異系數(shù)為8.7%；亞麻酸含量均值為9.2%，變異系數(shù)為2.7%。

從表2可以看出，芥酸含量在44%～48%間的材料有3份，占全部材料的8.8%；芥酸含量在48%～52%間的材料有9份，占全部材料的26.5%；芥酸含量在52%～56%間的材料有18份，占全部材料的52.9%；芥酸含量在56%～60%間的材料有4份，占全部材料的11.8%。硬脂酸含量在0.0%～0.2%間的材料有21份，占全部材料的61.8%；硬脂酸含量在0.2%～0.4%間的材料有8份，占全部材料的23.5%；硬脂酸含量大于0.4%的材料有4份，占全部材料的11.8%。亞油酸含量在13%～15%間的材料有10份，占全部材料的29.4%；亞油酸含量在15%～17%間的材料有16份，占全部材料的47.1%；亞油酸含量大于17%的材料有8份，占全部材料的23.5%。油酸含量在6%～10%間的材料有8份，占全部材料的23.5%；油酸含量在10%～14%間的材料有15份，占全部材料的44.1%；油酸含量在14%～18%間的材料有8份， 占全部材料的23.5%；油酸含量大于18%的材料有3份，占全部材料的8.8%。亞麻酸含量在8.4%～8.7%間的材料有1份，占全部材料的2.9%；油酸含量在8.7%～9.0%間的材料有5份，占全部材料的14.7%；油酸含量在9.0%～9.3%間的材料有14份，占全部材料的41.2%；油酸含量大于9.3%的材料有14份，占全部材料的41.2%。

表 2 貴陽環(huán)境條件下芥菜資源材料脂肪酸含量變異情況統(tǒng)計(jì)表

圖版 Ⅰ 芥菜型油菜種質(zhì)資源群體脂肪酸含量的正態(tài)分布 A. 芥酸； B. 油酸； C. 硬脂酸； D. 亞油酸； E. 亞麻酸。Plate Ⅰ Normal distribution of the fatty acids of B. juncea germplasm resoures A.Erucic acid； B. Oleic acid； C. Stearic acid； D. Linoleic acid； E. Linolenic acid.

性狀Trait芥酸Erucicacid油酸Oleicacid硬脂酸Stearicacid亞油酸Linoleicacid油酸Oleicacid-0．70??(P=0．00)硬脂酸Stearicacid-0．28(P=0．11)0．34(P>0．05)亞油酸Linoleicacid-0．15(P=0．38)-0．10(P=0．56)-0．21(P=0．24)亞麻酸Linolenicacid0．12(P=0．48)0．10(P=0．59)0．50??(P=0．00)-0．36?(P=0．04)

注： **. 在 0.01 水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)。*. 在 0.05 水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)。

Note: **.Significant correlation at 0.01 level.*. Significant correlation at 0.05 level.

圖版 Ⅱ 芥菜型油菜種植資源材料主成分分析聚類圖Plate Ⅱ PCA analysis of 34 B. juncea accessions

2.2 相關(guān)性分析

對(duì)芥菜型油菜群體的芥酸、油酸、硬脂酸、亞麻酸和亞油酸含量間的相關(guān)性進(jìn)行了分析(表3)。由表3可知，芥酸和油酸間表現(xiàn)出極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.70。亞麻酸和硬脂酸表現(xiàn)出極顯著的正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.50。亞麻酸和亞油酸呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.36。此外，芥酸與硬脂酸、芥酸與亞油酸、油酸與亞油酸、硬脂酸與亞油酸之間均呈負(fù)相關(guān)，但相關(guān)性不顯著。油酸與硬脂酸、芥酸與亞麻酸、油酸與亞麻酸之間均呈正相關(guān)，且相關(guān)性不顯著。

2.3 聚類分析

以芥菜型油菜群體材料的脂肪酸含量(芥酸、硬脂酸、亞油酸、油酸和亞油酸)為主要參考指標(biāo)，對(duì)34份材料進(jìn)行了主成分分析。其中，主成分因子1(PCA1)能解釋群體材料40.0%的表型變異，而主成分因子2(PCA2)能解釋群體材料31.7%的表型變異，二者一起可以解釋群體材料71.7%的表型變異。

以PCA1為X軸，以PCA2為Y軸做散點(diǎn)圖(圖版Ⅱ)。從圖版Ⅱ可以發(fā)現(xiàn)，絕大部分材料(30份，占88.2%)集中在圖中虛線圓圈所示的區(qū)域，而少數(shù)其它材料散落在圖中，他們分別是T6342(圖中編號(hào)：8)、長(zhǎng)陽黃芥(10)、SL63(19)和棱角油菜(22)。這些變異較大的脫離群體的材料，在芥菜型油菜的育種中可以發(fā)揮特殊作用。

2.4 FAE1基因引物設(shè)計(jì)

蕓苔屬的芥酸、油酸、硬脂酸、亞麻酸和亞油酸處在同一個(gè)代謝調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中(Jadhav et al，2005)(圖版Ⅲ)。其中， 芥酸主要受基因FAE1的調(diào)控， 為深入研究芥菜型油菜中芥酸調(diào)控的分子機(jī)理及克隆芥酸調(diào)控基因，我們特意選取甘藍(lán)型油菜(GU325731.1)和來自甘藍(lán)(HM362927.1)中FAE1基因的表達(dá)序列并設(shè)計(jì)了FAE1基因的特異引物(正義鏈:5′-CAACAAGGAGACGATGAGA-3′；反義鏈:5′-CAACAAGGAGACGATGAGA-3′)。同時(shí)，利用此引物對(duì)群體中芥菜型油菜的種質(zhì)資源進(jìn)行了PCR擴(kuò)增， 瓊脂糖膠顯示此引物在全部34份材料中都能擴(kuò)增出378 bp的條帶來，且效果較好(圖版Ⅲ：B中的第1～34泳道)。甘藍(lán)型油菜包含A和C基因組，而甘藍(lán)只含有C基因組。因此，以上引物在芥菜型油菜中擴(kuò)增的FAE1拷貝的一部分等同于蕓苔屬C基因組上的FAE1拷貝。本研究也證實(shí)， 芥菜型油菜中至少含有一個(gè)FAE1基因拷貝。

圖版 Ⅲ 脂肪酸代謝調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及FAE1基因片段的擴(kuò)增 A. 脂肪酸代謝調(diào)控網(wǎng)絡(luò)；B. FAE1基因片段的擴(kuò)增, 數(shù)字1-34分別代表34份芥菜型油菜種質(zhì)資源。Plate Ⅲ Metabolism network for fatty acids and the amplification of FAE1 gene A. Metabolism network for fatty acids； B. Amplification of FAE1 gene，number 1-34 indicates the 34 accessions of B. juncea.

3 討論與結(jié)論

環(huán)境條件可以顯著地影響油菜的品質(zhì)性狀，例如溫度(錢鈞，2004)、生態(tài)區(qū)差異(王月等，2015)、氣候條件(付三雄等，2014; 黃華磊等，2015)、栽培因素(趙繼獻(xiàn)，2014)等。而貴陽地區(qū)具有獨(dú)特的氣候條件，如夏季涼爽和年降水量大，不同來源的芥菜型油菜在貴陽環(huán)境下肯定會(huì)表現(xiàn)出不同于其來源地的特性。因此，盡可能多地搜集國內(nèi)外的有關(guān)種質(zhì)資源，加速所收集種質(zhì)資源在不同地區(qū)的及不同環(huán)境條件下的篩選工作(謝永俊和曾彪，2007)，是芥菜型油菜育種開展的基本工作。本研究從全國13個(gè)省市搜集了34份芥菜型油菜的種質(zhì)資源，在貴陽環(huán)境條件下，這些材料表現(xiàn)出了豐富的脂肪酸變異，并獲得部分可以用于芥菜育種工作的優(yōu)異材料。此外，我們還應(yīng)加強(qiáng)變異種質(zhì)資源的人工創(chuàng)造工作，其方法包括：生化試劑(如EMS)(孫妍妍等，2015)、物理因素(如紫外照射)、分子工程(洪林等，2012；馬忠?guī)r，2013)和太空育種等。

芥酸、油酸、硬脂酸、亞麻酸和亞油酸的碳原子數(shù)目都超過18個(gè)，均為超長(zhǎng)鏈脂肪酸，且處在同一脂肪酸合成網(wǎng)路中。本研究發(fā)現(xiàn)芥菜型油菜的脂肪酸中芥酸和油酸含量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系、亞麻酸和硬脂酸含量呈顯著正相關(guān)關(guān)系、亞麻酸和亞油酸含量呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，這與甘藍(lán)型油菜等其它油料作物中獲得的結(jié)論相一致(謝立華等，2004；林濤等，2015；溫娟, 2015)。不同脂肪酸間錯(cuò)綜復(fù)雜的相關(guān)性(劉興媛等，1981)，有利于油菜特定的育種目標(biāo)的開展，如低芥酸和硬脂酸育種，高油酸育種，適中的亞麻酸和亞油酸育種 (涂金星等，2007)。主成分分析作為研究不同種質(zhì)資源表型相似性的一種重要工具，可以用于劃分種質(zhì)資源的類群和鑒別特異的育種材料(劉海卿等，2015；塔娜等，2015；王健勝等，2015)。本研究通過主成分分析，獲得了不同種質(zhì)資源的相似性關(guān)系，同時(shí)獲得了部分優(yōu)良的育種材料。除了表型數(shù)據(jù)可以用于主成分分析外，基于分子標(biāo)記的基因型數(shù)據(jù)也可以用于不同種質(zhì)資源在基因組水平上的相似性研究，這些分子標(biāo)記技術(shù)包括：AFLP、SSR、RFLP、SNP、RAPD。

芥酸是由油酸經(jīng)過2次碳鏈延長(zhǎng)最終合成的，其合成的每一步均需要FAE1基因的參與。FAE1基因在擬南芥中有1個(gè)拷貝(James & Dooner, 1990; Lemieux et al, 1990)，在甘藍(lán)型油菜中有2個(gè)拷貝(Fourmann et al，1998；Barret et al，1998), 在白菜和甘藍(lán)中有1個(gè)拷貝(Das et al, 2002)。本文選取了來自甘藍(lán)型油菜和甘藍(lán)的FAE1基因已知序列，設(shè)計(jì)并獲得了能快速高效應(yīng)用的PCR引物并證實(shí)芥菜型油菜中至少存在一個(gè)FAE1拷貝。研究芥菜型油菜中FAE1基因的分子特性和調(diào)控機(jī)理對(duì)于芥酸的分子育種具有重要意義。例如，在甘藍(lán)型油菜中FAE1基因的超表達(dá)，可以將芥酸的含量由47%提高到60%(淮東欣, 2015); 而FAD2基因也被證實(shí)可以影響甘藍(lán)型油菜中芥酸的含量，轉(zhuǎn)FAD2基因株系可以將芥酸含量提高13.15%(陳松等，2015)。隨著更多芥菜調(diào)控基因的獲得，分子設(shè)計(jì)育種將在未來發(fā)揮越來越大的作用。

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Variation of fatty acids of Brassica juncea germplasm，correlation analysis and design of specific primer ofFAE1 gene for the control of erucic acid

TIAN En-Tang1*, LI Lu-Feng2, JIA Shi-Yan3, LIN Shu-Chun1

( 1. Oil Crops Research Institute of Guizhou University, Guizhou University, Guiyang 550025, China; 2. Agricultural ScienceandTechnologyInstituteofXiaoshanDistrictofHangzhouCity, Hangzhou 311200, China; 3.SeedControlstationofXiaoshanDistrictofHangzhouCity, Hangzhou 311200, China )

Brassicajuncea(AABB, 2n=36) is one of the 3rd Brassica oil rape (the other two oil rapes are:B.rapaandB.napus) in China, the species has many desirable traits, such as strong drought resistance and strong resistance to disease and pest. As the important origin ofB.junceaworldwide, China has rich valuable germplasm resources. In this study, we collected 34B.junceaaccessions from all over China, and planted all these accessions with three randomalized replications in Guiyang environment. The fatty acids, including erucic acid, oleic acid, linolenic acid, linoleic acid and stearic acid, was detected by NIR method in this study. All the detected fatty acids showed quantitative and normal distribution in Guiyang environment. Furthermore, we analyzed the correlations among the five above detected fatty acids, the erucic acid and oleic acid are significantly negatively correlated, the linolenic acid and stearic acid are significantly negative correlated, the linolenic acid and linoleic acid are negative correlated. To classify the 34 accessions for better utilization inB.junceabreeding, the principal component analysis (PCA) was used and the results indicated that most of the 34 accessions (30 accessions, about 88.2%) located on one same area, only several other accessions, that was SL63, Lengjiao YC, T6342 and Changyanghuangjie, located on the separate areas. These scattered accessions had special values inB.junceabreeding for their very different traits when comparied with the other accessions. Besides, we BLAST twoFAE1 gene sequences in NCBI website fromB.napus(AACC, 2n=38) andB.oleracea(CC, 2n=18), respectively, which were further used for designing specific primer forFAE1 gene, responsible for the regulation of erucic acid in Brassica species. The primer showed a good amplyfication in the all the 34B.junceaaccessions. So, this study proves that theB.junceagenome contains at least oneFAE1 copy. In conclusion, the study detected the fatty acid content of 34B.junceaaccessions in Guiyang environment and also provides the usefulFAE1 primer for the future gene clone inB.juncea, all of which are valuble in the futureB.junceamolecular breeding of China.

Brassicajuncea, fatty acids, primer design,FAE1, gene amplification

10.11931/guihaia.gxzw201512001

2015-12-01

2016-05-04

國家自然科學(xué)基金(31560422)；貴州省科學(xué)技術(shù)基金(黔科合J字 [2015]2052號(hào))；國家教育部留學(xué)回國人員科研啟動(dòng)基金(教外司留 [2015]1098號(hào))；貴州大學(xué)博士人才引進(jìn)基金(貴大人基合字 [2014]14號(hào))；貴州省作物學(xué)省級(jí)重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)計(jì)劃項(xiàng)目(黔學(xué)位合字ZDXK [2014]8號(hào)) [Supported by the National Natural Science Foundation of China (31560422); Science and Technology Foundation of Guizhou Province of China ([2015]2052); Scientific Research Foundation for Returned Scholars, Ministry of Education of China ([2015]1098); Talent Introducing Foundation of Guizhou University ([2014]14); the Plan of Agronomy Priority Major Construction of Guizhou Province of China ([2014]8)]。

田恩堂(1979-)，男，山東濰坊人，博士，副教授，主要從事油菜分子育種工作，(E-mail)erictian121@163.com。

Q943

A

1000-3142(2016)12-1445-08

田恩堂, 李魯峰, 賈世燕， 等. 芥菜型油菜脂肪酸含量的變異、相關(guān)性分析及芥酸調(diào)控基因FAE1特異引物設(shè)計(jì) [J]. 廣西植物， 2016， 36(12):1445-1452

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*通訊作者