超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用

摘 要：超高效液相色譜法在高通量研究和復(fù)雜混合物分離的過程研究中提供了一個(gè)非常好的平臺(tái)，特別是對(duì)藥物產(chǎn)品或者藥物制劑的分析、識(shí)別、檢測(cè)的質(zhì)量控制以及對(duì)藥物分子代謝成分等研究。在文章中，作者從超高效液相色譜技術(shù)的原理和技術(shù)點(diǎn)本質(zhì)出發(fā)，對(duì)什么是超高效液相色譜法進(jìn)行分析并解釋，對(duì)超高效液相色譜技術(shù)有哪些優(yōu)勢(shì)和缺點(diǎn)進(jìn)行描述，并對(duì)超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用做出了詳細(xì)的介紹。

關(guān)鍵詞：超高液相色譜技術(shù)；藥物分析；應(yīng)用研究

1 概述

超高效液相色譜技術(shù)在藥物分析領(lǐng)域具有分析速度快、靈敏度高、藥品的分離效率高、適用范圍更廣等特點(diǎn)，其測(cè)試全自動(dòng)化，藥品成分容易吸收且處理方法簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，使得它在市場(chǎng)中占有一定的主導(dǎo)地位。隨著社會(huì)的不斷發(fā)展以及不斷更新的科學(xué)技術(shù)，超高效液相色譜儀逐漸出現(xiàn)在人們的視野中。它擁有高效液相色譜技術(shù)的所有優(yōu)勢(shì)，而且還具有超高速、超高靈敏度和極高分辨率的性能，被人們稱為現(xiàn)代液相色譜法的另一個(gè)發(fā)展方向。研究表明，超高液相色譜技術(shù)在藥物分析領(lǐng)域的能力已經(jīng)令人信服，其卓越的性能也已被證明。在文章中，筆者從超高液相色譜技術(shù)的技術(shù)點(diǎn)本質(zhì)出發(fā)，對(duì)什么是超高效液相色譜法，超高效液相色譜技術(shù)有哪些優(yōu)勢(shì)和缺點(diǎn)進(jìn)行描述，對(duì)超高效液相色譜法在藥物分析的應(yīng)用做出了詳細(xì)的介紹。

2 什么是超高效液相色譜技術(shù)

2.1 超高效液相色譜技術(shù)的原理

超高液相色譜技術(shù)是以范德米特方程作為理論基礎(chǔ)，和高效液相色譜法的原理相同。具體公式為HETP=Ad P+B/v+Cd P2v，式中HETP代表理論塔板高度，A是渦流擴(kuò)散系數(shù)，dP代表填料顆粒的尺寸半徑，B表示分子的擴(kuò)散系數(shù)，C表示傳質(zhì)因子，v表示移動(dòng)相線速度。該公式的含義是：顆粒的粒徑越小，色譜的柱效率將更高。顆粒的粒徑不同，其最佳色譜的效果就不一樣；粒子的粒徑越小，最高柱流速將會(huì)向流速大的方向移動(dòng)；顆粒尺寸越小，其線速度的范圍就更廣泛。由此可以得出結(jié)論：降低粒徑的尺寸大小，不但可以提高色譜柱的效率，而且還可以提高速度。也就是說色譜分辨率同填料顆粒的粒徑大小成反比關(guān)系。經(jīng)過有關(guān)人員的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)填料顆粒的粒徑小于2N，m時(shí)，理論塔板高度的最低范圍將被擴(kuò)大，即小于2N，m的粒徑相比于較大的微粒能夠獲得更大的流速范圍，色譜柱的效果也會(huì)增加，可以在沒有損失的前提下增加微粒的流速和粒子的分析速度。

2.2 超高效液相色譜技術(shù)的原理的優(yōu)點(diǎn)

超高效液相色譜的分離原理與高效液相色譜技術(shù)相同，但相對(duì)來說，超高效液相色譜技術(shù)的性能較好且具有更高的速度、靈敏度和分辨率。超高效液相色譜技術(shù)在線速度較大或者高壓下環(huán)境下依然可以實(shí)現(xiàn)良好的效果，對(duì)樣品進(jìn)行高效的分離。超高效液相色譜技術(shù)使用的粒徑為1.7N，m，它比粒徑為5N，m的色譜柱提高了三倍的長(zhǎng)度。與此同時(shí)，其柱不變，就可以使得分析是在提高3倍流速下進(jìn)行的，大大縮短了分析時(shí)間。超高效液相色譜技術(shù)主要是通過減少顆粒的粒徑的方法，讓顆粒的色譜峰變窄，從而可以提高檢測(cè)的靈敏度。超高效液相色譜法與高效液相色譜法相比大大地提高了分辨率，更有利于對(duì)雜質(zhì)樣品進(jìn)行離子化，有助于對(duì)基質(zhì)雜質(zhì)進(jìn)行分離，提高檢測(cè)靈敏度。

2.3 超高效液相色譜技術(shù)的原理的缺點(diǎn)

超高效液相色譜技術(shù)雖然具有很多優(yōu)勢(shì)，但在實(shí)際的應(yīng)用過程中，也仍然存在一些問題和不足。比如說：超高效液相色譜儀器在性能方面雖然要高于高效液相色譜儀器，但是價(jià)格也會(huì)隨著大大地增長(zhǎng)，這就會(huì)限制該儀器和技術(shù)的推廣，不能達(dá)到普及應(yīng)用的目的；由于超高效液相色譜法技術(shù)對(duì)藥物分析具有較高的要求，這就使得加工精度很難把握。生產(chǎn)該機(jī)器的廠家少，進(jìn)樣的數(shù)量也少，而且還使用半環(huán)的方式注入，這就會(huì)導(dǎo)致其峰值面積的重復(fù)性較差。與此同時(shí)，因?yàn)樯V的顆粒半徑非常細(xì)微，為了避免色譜柱被樣品堵塞，對(duì)樣品的要求也比較嚴(yán)格。

3 超高效液相色譜技術(shù)在藥物分析領(lǐng)域的應(yīng)用

3.1 制劑藥物分析

在進(jìn)行藥物分析時(shí)，往往樣品的含量非常少，在進(jìn)行分析分離時(shí)非常困難，所浪費(fèi)的時(shí)間也比較多。因此，我們迫切需要一個(gè)能夠提高分析速度，提升分離效率的技術(shù)，其應(yīng)該具有靈敏度高、精確度高的特點(diǎn)。超高效液相色譜技術(shù)在解決這些問題時(shí)，就提供了強(qiáng)有力的支持，逐步顯示出其具有良好的發(fā)展前景。對(duì)A1z、AzZ和A3z這三種化合物的研究分析中，在保證分析效果相同的前提下，使用超高效液相色譜技術(shù)可以大大地縮短分析時(shí)間，其精度和靈敏度也相比于其他技術(shù)要好很多。超高效液相色譜技術(shù)適合用于常規(guī)藥物的分析，使用混合模式的固相萃取和超高效液相色譜技術(shù)同時(shí)使用測(cè)定相應(yīng)的藥物成分。其最終的分析結(jié)果可以達(dá)到美國(guó)食品和藥物管理局在精度和準(zhǔn)確度方面的要求。

3.2 生物基質(zhì)中藥物的分析

藥物代謝涉及到藥物人體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄，包括對(duì)藥物及其在復(fù)雜基質(zhì)中的代謝物的分離，以及對(duì)痕量分析的結(jié)構(gòu)鑒定。目前，生物體的體液系統(tǒng)中含有非常多的相對(duì)分子質(zhì)量相同、保留時(shí)間相同的復(fù)雜成分。與此同時(shí)，藥物正在向著低劑量的方向發(fā)展，這就會(huì)給現(xiàn)有技術(shù)提出難度，使得常規(guī)的分離技術(shù)和痕量成分的檢測(cè)難以滿足在精度方面的要求。能否在許多具有相同保留時(shí)間的干擾組分影響下，快速識(shí)別出代謝產(chǎn)物依賴于高效的色譜分離和敏感度極高的分辨質(zhì)譜技術(shù)。超高效液相色譜技術(shù)在藥物代謝產(chǎn)物分析中，就充分體現(xiàn)了高敏感性和專屬性特性，并且可以在同一時(shí)間段內(nèi)對(duì)多種組分濃度進(jìn)行測(cè)定，可以達(dá)到樣品分析測(cè)量高效率的要求。

3.3 中藥質(zhì)量控制

中藥中含有多種復(fù)雜結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分，使用超高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行分析時(shí)，能夠迅速地檢測(cè)多種化學(xué)成分，具有速度快、靈敏度高的特點(diǎn)，因此在中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥化工分析和質(zhì)量控制中具有良好的應(yīng)用前景。通過對(duì)比超高效液相色譜技術(shù)和高效液相色譜技術(shù)對(duì)淫羊藿、冬蟲夏草、三七、丹參等中藥的藥物分析結(jié)果，超高效液相色譜技術(shù)不僅體現(xiàn)在速度更快的分析時(shí)間，更重要的是超高效液相色譜技術(shù)可以使得小顆粒填料后的分離度也得到了提高。使用超高效液相色譜技術(shù)測(cè)定淫羊藿黃酮類成分時(shí)，與高效液相色譜技術(shù)相比分離程度得到了大大的改善。在中國(guó)中醫(yī)藥的多種組分分析過程中，其化合物種類多、數(shù)量不明確、含量差異也比較大的特點(diǎn)一直是技術(shù)分析的瓶頸問題。現(xiàn)在將超高效液相色譜技術(shù)引入多組分的中國(guó)醫(yī)藥分析中，可以建立一個(gè)更有利的分析平臺(tái)。

4 結(jié)束語

超高效液相色譜技術(shù)是近年來一種新型的技術(shù)。在近幾年的使用過程中，人們發(fā)現(xiàn)超高效液相色譜技術(shù)在藥物分析領(lǐng)域正在發(fā)揮著越來越大的優(yōu)勢(shì)，廣泛開闊了現(xiàn)代色譜技術(shù)的應(yīng)用前景。其注射體積小、耗電少、快速分離的特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于天然和合成藥物組合物的分析技術(shù)、藥物的代謝產(chǎn)物分析等，是一種更有效、更準(zhǔn)確、更精細(xì)的一種分析技術(shù)。盡管超高效液相色譜的儀器成本高，樣本量也較少，容易出現(xiàn)色柱堵塞，對(duì)使用技術(shù)的要求也更高等缺點(diǎn)和不足，但是隨著技術(shù)的發(fā)展和填料注入技術(shù)的不斷改進(jìn)，藥物分析的方法也在逐步變化中。我們相信超高效液相色譜技術(shù)將會(huì)在藥物的分析中扮演越來越重要的角色，不斷推動(dòng)藥物分析的發(fā)展，更好地造福人類。

參考文獻(xiàn)

[1]印成霞.超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用研究[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2013，23.

[2]霍玉榮.超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用進(jìn)展[J].首都食品與醫(yī)藥，2016，10.

[3]張濤.超高效液相色譜法在藥物分析中的應(yīng)用思路構(gòu)建[J].中國(guó)衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2015，9.