長吻鮠血液生理生化指標(biāo)的研究

摘要：試驗(yàn)以長吻鮠（Leiocassis longirostris）為試驗(yàn)對象，對其血液的生理生化指標(biāo)進(jìn)行了測定。結(jié)果表明，長吻鮠血液紅細(xì)胞數(shù)為（2.29±0.53）×1012個/L，白細(xì)胞數(shù)為（1.51±0.27）×1010個/L；血紅蛋白含量為（8.26±1.00） g/dL；滲透脆性測定中，開始溶血氯化鈉濃度為（0.41±0.02）%，完全溶血氯化鈉濃度為（0.32±0.03）%；血清中血糖濃度為（5.56±2.41） mmol/L；總膽固醇含量為（4.22±1.10） mmol/L；甘油三酯含量為（2.65±1.95） mmol/L；乳酸脫氫酶活性為（4 022.37±604.71）U/L；堿性磷酸酶活性為（7.66±2.98） U/L；酸性磷酸酶活性為（13.25±2.24） U/L；谷草轉(zhuǎn)氨酶活性為（106.30±22.84） U/L；谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性為（42.53±20.26） U/L；肌酐含量為（22.18±9.16） μmol/L。

關(guān)鍵詞：長吻鮠（Leiocassis longirostris）；血液；生理指標(biāo)；生化指標(biāo)

中圖分類號：Q461；S965.199 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）14-3690-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.14.037

Abstract： The research was aimed to determine the physiological and biochemical index of blood in Leiocassis longirostris. The results showed that the RBC number in the blood of Leiocassis longirostris was 2.29±0.53×1012 cell/L，while WBC number was 1.51±0.27×1010 cell/L. The HB content was 8.26±1.00 g/dL. The Osmotic fragility test of RBC showed that the concentration of NaCl was 0.41±0.02% when RBCs started to hemolyze，and the concentration of NaCl was 0.32±0.03% when RBCs hemolyzed completely. The content of the blood sugar，cholesterol and triglyceride in serum was 5.56±2.41 mmol/L，4.22±1.10 mmol/L and 2.65±1.95 mmol/L， respectively. The activity of LDH，AKP，ACP，GOT and GPT was 4022.37±604.71 U/L，7.66±2.98 U/L，13.25±2.24 U/L，106.30±22.84 U/L；and 42.53±20.26 U/L，respectively. The content of Cr was 22.18±9.16 μmol/L.

Key words：Leiocassis longirostris； blood； physiological index； biochemical index

長吻鮠（Leiocassis longirostris）屬鯰形目鲿科鮠屬。體長，吻呈錐形，并向前顯著突出。眼小，口下位，呈新月形，唇肥厚。須4對，細(xì)小。其腹部白色，體色灰白，屬于肉食性底層魚類，主要攝食水生昆蟲與小型魚類。喜歡夜晚攝食，攝食時在水體的中下層。作為大型的經(jīng)濟(jì)魚類，其肉嫩味鮮美，又無細(xì)刺，蛋白質(zhì)含量高，富含脂肪，被譽(yù)為淡水食用魚中的上品。

目前，野生長吻鮠資源較為缺乏，市場更是供不應(yīng)求。經(jīng)過人工馴化過的長吻鮠可以在池塘、湖泊中飼養(yǎng)。近年來，長吻鮠的人工養(yǎng)殖已經(jīng)在四川、湖北、安徽、廣東等省市迅速發(fā)展[1]。隨著長吻鮠水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，其疾病的流行也日益嚴(yán)重。血液是動物體內(nèi)循環(huán)的重要組成部分，它起著生理調(diào)節(jié)、物質(zhì)運(yùn)輸以及生理防御等重要功能[2]。血液生理生化指標(biāo)是魚類重要特征之一，能夠反映出魚類正常的生理狀態(tài)，也可用于評價魚類的營養(yǎng)水平、健康狀況及環(huán)境的水質(zhì)情況等[3-6]，當(dāng)魚體受到外在條件的影響而發(fā)生了生理或病理變化時，血液的生理生化指標(biāo)也必定會發(fā)生變動[7]。國內(nèi)外學(xué)者關(guān)于魚類血液指標(biāo)研究已有很多報道[8-14]，但有關(guān)于長吻鮠的報道較少，并且主要集中在長吻鮠的營養(yǎng)需要、幼魚發(fā)育等方面[15-18]。本試驗(yàn)通過測定長吻鮠的血液生理生化指標(biāo)，以增加人們對其生理生化特征的了解，為長吻鮠的魚病防治和養(yǎng)殖提供理論參考[7]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚來源與暫養(yǎng)

試驗(yàn)魚于2014年8月1日購于天津薊縣藍(lán)科水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，共32尾，平均體長（18±3） cm/尾，平均體重（150±30） g/尾，置于塑料箱中暫養(yǎng)，氣石24 h不間斷充氣。

1.2 生理生化指標(biāo)測定方法

血細(xì)胞計數(shù)采用血球計數(shù)板法。

紅細(xì)胞脆性測試方法如下：取10個小試管，分別加入10 mL不同質(zhì)量濃度（0.25%、0.30%、0.35%、0.40%、0.45%、0.50%、0.55%、0.60%、0.65%、0.90%）的氯化鈉低滲溶液，每個小試管再加入混有肝素的血液一滴，輕輕搖勻，靜置1～2 h，根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同，判斷紅細(xì)胞的脆性。

血糖、甘油三酯、總膽固醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）、肌酐、乳酸脫氫酶等指標(biāo)的測定，均使用南京建成生物工程研究所出產(chǎn)的試劑盒及其附帶方法。

1.3 數(shù)據(jù)處理方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用Excel 2007進(jìn)行統(tǒng)計處理，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 血液生理指標(biāo)

由表1可見，正常長吻鮠血液中紅細(xì)胞為（2.29±0.53）×1012個/L，而白細(xì)胞數(shù)相對較少，為（1.51±0.27）×1010個/L，分散在紅細(xì)胞之間；血紅蛋白含量為（8.26±1.00） g/dL；滲透脆性測定中，開始溶血氯化鈉濃度為（0.41±0.02）%，完全溶血氯化鈉濃度（0.32±0.03）%。

2.2 血液生化指標(biāo)

由表2可見，正常長吻鮠血清中的血糖濃度為（5.56±2.41） mmol/L；總膽固醇含量為（4.22±1.10） mmol/L；甘油三酯含量為（2.65±1.95） mmol/L；肌酐含量為（22.18±9.16） μmol/L。乳酸脫氫酶活性為（4 022.37±604.71） U/L；堿性磷酸酶活性為（7.66±2.98） U/L；酸性磷酸酶活性為（13.25±2.24） U/L；谷草轉(zhuǎn)氨酶活性為（106.30±22.84） U/L；谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性為（42.53±20.26） U/L。乳酸脫氫酶活性遠(yuǎn)高于其他酶類，堿性磷酸酶活性最低。

3 小結(jié)與討論

3.1 長吻鮠血液細(xì)胞數(shù)與血紅蛋白含量

魚類血細(xì)胞參數(shù)是血液指標(biāo)的重要組成部分，參數(shù)特征可以用來反映魚體健康狀況以及生存環(huán)境情況。血紅蛋白是紅細(xì)胞中負(fù)責(zé)運(yùn)載氧的一種蛋白質(zhì)，它和紅細(xì)胞的主要功能是攜帶與運(yùn)輸氧氣，以滿足魚類正常的生命活動的需要。所以紅細(xì)胞數(shù)值與血紅蛋白含量直接反映了機(jī)體的耐低氧能力[19]。另外，魚類營養(yǎng)狀況對其血液指標(biāo)產(chǎn)生重要影響。錢云霞等[6]對養(yǎng)殖鱸魚的饑餓試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)饑餓對鱸魚血液生理生化指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響。鱸魚在饑餓2周后，紅細(xì)胞的數(shù)目便開始顯著下降。南方鯰魚饑餓后，紅細(xì)胞數(shù)與血紅蛋白含量急劇下降[12]。在本試驗(yàn)中，長吻鮠紅細(xì)胞數(shù)目為（2.29±0.53）×1012個/L，血紅蛋白含量為（8.26±1.00） g/dL。趙海鵬[20]對野生長吻鮠的研究結(jié)果中，紅細(xì)胞數(shù)目為（1.85±0.53）×1012個/L，血紅蛋白含量為（4.75±0.56） g/dL。由此看出，養(yǎng)殖的長吻鮠的紅細(xì)胞數(shù)目與血紅蛋白含量都比野生長吻鮠的高。這可能是由于長吻鮠在養(yǎng)殖條件下餌料比較充足，營養(yǎng)豐富；而野生長吻鮠可能經(jīng)常受到饑餓與營養(yǎng)不良的影響，血液的運(yùn)輸氧的能力下降，代謝水平降低。

白細(xì)胞是機(jī)體與疾病斗爭的“衛(wèi)士”，它擔(dān)負(fù)著許多重任，具有吞噬異物并且產(chǎn)生抗體的作用。還具有抗御病原入侵、機(jī)體傷病的損傷治愈、對疾病的免疫抵抗能力等。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)不適時，便啟動機(jī)體的免疫防御機(jī)制，通過升高白細(xì)胞數(shù)量增加自身抵抗力，來維持機(jī)體基本生命活動。白細(xì)胞參數(shù)存在性別差異，趙明薊等[11]對鯉和草魚的研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞在性腺已經(jīng)成熟或接近成熟時才表現(xiàn)出兩性差異。長吻鮠的白細(xì)胞數(shù)量為（1.51±0.27）×1010個/L，黃顙魚[21]的白細(xì)胞數(shù)為（3.38±0.25）×1010個/L，二者生活習(xí)性相似，但長吻鮠的白細(xì)胞比黃顙魚少得多。這可能是長吻鮠的免疫力、抗病力差，更容易患病的重要原因之一。

3.2 長吻鮠血液紅細(xì)胞脆性

紅細(xì)胞的膜對低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱之為紅細(xì)胞的滲透脆性。紅細(xì)胞膜對低滲溶液的抵抗力越大，紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生破碎，也就是紅細(xì)胞滲透脆性越小。有關(guān)紅細(xì)胞滲透脆性指標(biāo)的測定較少。在本試驗(yàn)中，長吻鮠紅細(xì)胞開始出現(xiàn)溶血時氯化鈉濃度為（0.41±0.02）%，完全溶血時氯化鈉溶度為（0.32±0.03）%。瓦氏黃顙魚[22]剛?cè)苎獣r對應(yīng)的氯化鈉濃度是（0.45±0.01）%，完全溶血時對應(yīng)的氯化鈉濃度是（0.27±0.01）%。這表明長吻鮠紅細(xì)胞對低滲溶液的抵抗力與瓦氏黃顙魚相近，這可能與它們的生活習(xí)性相似有關(guān)。

3.3 長吻鮠血液中血糖、總膽固醇、甘油三酯和肌酐的含量

糖、脂肪、蛋白質(zhì)是魚類獲得能量的重要來源。葡萄糖是許多組織的必需燃料，是機(jī)體維持基本生命活動的保證。魚體的血糖濃度容易受到外界刺激而變化。鱸魚在饑餓7 d后血糖濃度顯著降低，之后保持相對穩(wěn)定[6]。魚類在受傷或患病的時候，血糖濃度也會變化，如患有敗血癥的鰱魚其血糖濃度顯著升高[23]。長吻鮠與鳙魚[24]、草魚[24]血糖、甘油三酯等生化指標(biāo)見表3。由表3可知，長吻鮠的血糖濃度最低，草魚的血糖濃度最高。林光華等[25]認(rèn)為，魚類的活動性和食性影響它的血液指標(biāo)的高低。一般活動性越強(qiáng)的魚類，血糖含量越高。養(yǎng)殖的長吻鮠多靜臥于池底，活動性較弱，需要較少能量來維持運(yùn)動，草魚力大性剛，性情活潑，活動性較強(qiáng)。因而，血糖濃度與魚類的生活習(xí)性息息相關(guān)。

總膽固醇是血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和，是脂肪在血液中存在的一種形式。膽固醇在生物學(xué)中起著重要作用，是一些激素和酶類的合成原料，魚類正常生命活動的必需物質(zhì)[26]。甘油三酯是魚類脂類代謝的主要物質(zhì)，體脂高的魚類血脂一般也高，血脂與體脂有正相關(guān)性[27]。肌酐主要是肌酸與磷酸肌酸代謝的最終產(chǎn)物，因此，肌酐含量與肌肉活動密切相關(guān)[28]。肌酐的產(chǎn)量一定，而且不會在過濾后被腎小管重吸收，它的排泄量能夠反映出腎臟的機(jī)能。當(dāng)腎臟發(fā)生病變時，肌酐排泄受阻，血液中肌酐含量顯著升高[29]。由表3可見，長吻鮠甘油三酯與總膽固醇含量與草魚較為接近，高于鳙魚。肌酐含量排序?yàn)轺~>草魚>長吻鮠。長吻鮠為養(yǎng)殖魚類，比較容易獲取餌料，活動量較少，因而肌酐含量少。正由于活動量少，消耗的能量較低，所以貯存的脂肪較多，總膽固醇與甘油三酯含量較高。與此相對應(yīng)，鳙魚為濾食性魚類，主要以浮游動物為食，需要長時間活動來濾取食物，活動量較大，因而血清中肌酐含量較高，總膽固醇與甘油三酯含量低。至于總膽固醇、甘油三酯含量與肌酐的具體關(guān)系有待更深入的研究。

3.4 長吻鮠血液生化指標(biāo)

堿性磷酸酶是一種重要的代謝調(diào)控酶，直接參與磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移，并且也是魚類溶酶體酶的重要組成部分，在免疫過程中發(fā)揮重要作用[9]。酸性磷酸酶是巨噬細(xì)胞溶酶體的標(biāo)志酶，在血液與血細(xì)胞中起重要的機(jī)體防御功能[30]。血細(xì)胞進(jìn)行吞噬過程中，會伴隨著酸性磷酸酶的釋放。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶在蛋白質(zhì)代謝中起重要的作用，是魚類生命活動中不可缺少的酶類之一。它們是存在于線粒體中的重要的氨基酸轉(zhuǎn)氨酶，血清中它們的活性一般不高。谷草轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟中，它能夠反映出肝臟的生理狀態(tài)[31]。當(dāng)組織發(fā)生病變或者組織受損較為嚴(yán)重時，谷丙轉(zhuǎn)氨酶便會釋放到血液中，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量便會顯著提高。它是肝細(xì)胞壞死的最具有特異性和應(yīng)用最廣泛的指標(biāo)[32]。

從圖1可以看出，長吻鮠與黃顙魚除堿性磷酸酶活性有差異外，其他酶活性均比較接近?？赡苡捎陂L吻鮠與黃顙魚都屬于底層肉食性魚類，生活習(xí)性相似的原因。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李育培，程霄玲，刁曉明.長吻鮠的營養(yǎng)需要[J].江西飼料，2007（5）：15-18.

[2] 張 芹，宋 威，陳 杰.斑點(diǎn)叉尾鮰血液學(xué)指標(biāo)研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，50（7）：1447-1449.

[3] BISAL G A， BENGTSON D A. Description of starving condition in summer flounder paralichthys dentatus early history stage[J]. Fishy Bulletin，1995，93：217-230.

[4] HARKRISHNAN R，RANI M N，BALASUNDARAM C. Hematological and biochemical parameters in commom carp，Cyprinus carpio，following herbal treatment for Aeromonas hydrophila infection[J].Aquaculture，2003，221（1-4）：41-50.

[5] 周 玉，楊文場，楊振國，等.魚類血液學(xué)指標(biāo)研究的進(jìn)展[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，2001，10（2）：163-165.

[6] 錢云霞，陳惠群，孫江飛.饑餓對養(yǎng)殖鱸魚血液生理生化指標(biāo)的影響[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2002，9（2）：133-136.

[7] 喬偉亮，魏 東，劉 穎，等.真鯛血液生理生化指標(biāo)的研究[J].畜牧與飼料科學(xué)，2010，31（5）：62-64.

[8] 楊紅生，楊干榮，王 輝.饑餓對大鯢血液的影響[J].河南師范大學(xué)學(xué)報，1993，2（1）：43-46.

[9] 白東清，魏 東，馬樹敏，等.長絲鱸血液部分生理生化指標(biāo)測定[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（2）：755-757.

[10] 林光華，張豐旺，翁世驄.草魚血液的研究[J].動物學(xué)報，1985， 31（4）：336-343.

[11] 趙明薊，蘇澤谷，黃文郁，等.池養(yǎng)鯉魚和草魚血液指標(biāo)的研究[J].水生生物學(xué)集刊，1979，13（4）：453-464.

[12] 陳曉耘.饑餓對南方鯰幼魚血液的影響[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2002（2）：167-169.

[13] ESCAFFRE A M，INFANTE J Z. Nutritional value of soy protein concentrate for larvae of common carp（Cyprinus carpio）based on growth performance and digestive enzyme activities[J].Aquacuture，1997，153（1/2）：63-80.

[14] 靳曉敏，葛慕湘，孔凡里，等.烏鱧血液指標(biāo)的研究[J].河北漁業(yè)，2006（2）：21-24.

[15] 李玉培，程霄玲，刁曉明.長吻鮠的營養(yǎng)需要量[J].江西飼料，2007（5）：15-18.

[16] 張耀光，何學(xué)福.長吻鮠幼魚發(fā)育的研究[J].水生生物學(xué)報，1991，15（2）：153-160.

[17] 金 麗.長吻鮠循環(huán)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)及血細(xì)胞發(fā)生[D].重慶：西南師范大學(xué)，2005.

[18] 陳 斌，彭 淇，梁 文，等.長吻鮠幼魚日糧中常量營養(yǎng)物質(zhì)適宜需求量的研究[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報，2013，28（2）：179-184.

[19] 王躍群，尹 忠，柏 斌.泥鰍的血液指標(biāo)研究[J].湖南師范大學(xué)學(xué)報，1996，19（3）：71-75.

[20] 趙海鵬.長吻鮠血液生理、生化指標(biāo)和血流變特性初步研究[D].重慶：西南師范大學(xué)，2005.

[21] 孫紅梅.饑餓對黃顙魚血液指標(biāo)及免疫機(jī)能的影響[D].長春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.

[22] 石 丹，銀 龍，鐵槐茂，等.瓦氏黃顙魚血液生理指標(biāo)與外周血細(xì)胞組成及顯微結(jié)構(gòu)[J].四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2015，33（1）：78-83.

[23] 米瑞芙，陶秉春，王曉梅，等.鰱敗血癥血液生理指標(biāo)的變化[J].淡水漁業(yè)，1993，23（4）：16-19.

[24] 溫安祥，周定剛.幾種不同食性魚類部分血液生化指標(biāo)的比較研究[J].四川動物，2005，24（4）：518-522.

[25] 林光華，張豐旺，洪一江，等.團(tuán)頭魴和日本白鯽血液的比較研究[J].動物學(xué)報，1996，42（3）：260-268.

[26] 程 春.黃鱔血液生理生化指標(biāo)的研究[D].南昌：江西農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014.

[27] 常 青，熊邦喜，龍良啟.池養(yǎng)鰻鱺血液生化成分分析[J].水利漁業(yè)，1997，92（5）：16-18.

[28] 韓娜娜，史成銀.血液指標(biāo)在魚類學(xué)研究中的應(yīng)用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（33）：18877-18878.

[29] PATRICHE T，PATRICHE N，BOCIOC E.Serum biochemical parameters of farmed carp（Cyprinus carpio）[J].Aquaculture，2011，4（2）：137-140.

[30] 劉樹青，江曉路，牟海靜，等.免疫多糖對對蝦血清酶活性的影響[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，1999，6（3）：111-113.

[31] KAPLAN A，OZABO L L. Chemistry Interpretation and Technique[M].London：London Henry Kumnton Publishers，1979. 109-111.

[32] 黃琪瑣，劉麗燕，范麗萍.異育銀卿溶血性腹水病的病理生理研究[J].水產(chǎn)學(xué)報，1992，16（4）：316-321.