血清中AFP,GPC3，DCP和VEGF 4種腫瘤標(biāo)志物對(duì)原發(fā)性肝癌的早期診斷價(jià)值

盧凌鵬 黃艷芳

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血清中AFP,GPC3，DCP和VEGF 4種腫瘤標(biāo)志物對(duì)原發(fā)性肝癌的早期診斷價(jià)值

盧凌鵬 黃艷芳

目的 探討AFP,GPC3，DCP和VEGF 4種腫瘤標(biāo)志物對(duì)早期診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值。方法將82例原發(fā)性肝癌患者納入肝癌組，另外收集同期住院的肝硬化患者45例納入肝硬化組和健康體檢者50例納入對(duì)照組。檢測(cè)入選患者血清AFP,GPC3，DCP和VEGF濃度，ROC曲線分析4種腫瘤標(biāo)志物診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值。結(jié)果肝癌組患者血清AFP、GPC3、DCP和VEGF的濃度顯著高于肝硬化組和對(duì)照組(P<0.05)；肝硬化組患者血清GPC3濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。4種腫瘤標(biāo)志物診斷原發(fā)性肝癌的敏感度由高到低依次為VEGF(0.817)、GPC3(0.812)、DCP(0.724)和AFP(0.534)；特異度由高到低依次為GPC3(0.707)、VEGF(0.692)、DCP(0.665)和AFP(0.653)。其中GPC3和VEGF的敏感度和特異性顯著高于DCP和AFP(P<0.05)，但GPC3與VEGF之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。聯(lián)合檢測(cè)的敏感度和特異度為0.852和0.800，顯著高于任何一種標(biāo)志物(P<0.05)。ROC結(jié)果顯示聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積(AUC)為0.818，高于任一種標(biāo)志物單獨(dú)檢測(cè)的AUC。結(jié)論血清GPC3、DCP和VEGF的檢測(cè)可協(xié)助AFP診斷原發(fā)性肝癌，聯(lián)合4種標(biāo)志物檢測(cè)可顯著提高原發(fā)性肝癌的檢出率。

原發(fā)性肝癌；甲胎蛋白；磷脂?；嫉鞍拙厶?3；異常凝血酶原；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1399～1401)

原發(fā)性肝癌是消化系統(tǒng)常見(jiàn)惡性腫瘤之一，早期診斷困難，治療難度大，疾病進(jìn)展快，死亡率高，預(yù)后極差。研究表明80%的原發(fā)性肝癌患者存在肝硬化疾病基礎(chǔ)，因此對(duì)于肝硬化患者的定期篩查有利于原發(fā)性肝癌的早期診斷。常用的肝癌腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白(alpha-fetoprorein，AFP)靈敏度和特異度不高，尋找可以替代或彌補(bǔ)AFP不足的肝癌腫瘤標(biāo)志物是肝癌早期診斷的重要工作。本研究通過(guò)檢測(cè)原發(fā)性肝癌患者血清中AFP，磷脂?；嫉鞍拙厶?3(glypican-3，GPC3)，異常凝血酶原(desrcarboxyprothrombin，DCP)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)濃度水平，探討4種標(biāo)志物對(duì)于早期診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2012年12月至2015年12月收治的原發(fā)性肝癌患者82例納入肝癌組，其中男性55例，女性27例；年齡27～81歲，平均(46.7±7.5)歲。另外收集同期住院的肝硬化患者45例納入肝硬化組和健康體檢者50例納入對(duì)照組。肝硬化組患者男性27例，女性18例；年齡32～79歲，平均(47.5±6.6)歲。對(duì)照組男性30例，女性20例；年齡18～80歲，平均(48.0±7.0)歲。肝癌組患者均為初治，由術(shù)后病理診斷確診為原發(fā)性肝癌。3組一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

所有入選患者于清晨空腹抽取靜脈血5 ml，3 000 r/min離心20 min分離血清。AFP檢測(cè)采用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)及配套試劑。GPC3、DCP采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自武漢優(yōu)爾生生物有限公司。VEGF采用ELISA檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自美國(guó)安迪生物工程有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示并進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示并進(jìn)行t檢驗(yàn)，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，特異性、靈敏度的評(píng)估采用ROC曲線，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 4種血清標(biāo)志物在3組血清中的濃度比較

肝癌組患者血清AFP、GPC3、DCP和VEGF的濃度顯著高于肝硬化組和對(duì)照組(P<0.05)；肝硬化組患者血清GPC3濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，其他腫瘤指標(biāo)的濃度在肝硬化組患者和對(duì)照組患者間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組腫瘤標(biāo)志物的血清濃度比較(±s)

表1 3組腫瘤標(biāo)志物的血清濃度比較(±s)

注：*為與對(duì)照組比較，P<0.05；#為與肝硬化和對(duì)照組比較，P<0.05。

腫瘤標(biāo)志物肝癌組肝硬化組對(duì)照組AFP/(μg·L-1)112．6±25．4#12．3±9．610．7±8．6GPC3/(ng·L-1)249．3±40．5#212．2±23．1*132．9±15．4DCP/(mAu·mL-1)426．7±245．6#118．2±32．741．6±12．8VEGF/(pg·mL-1)802．7±638．6#465．2±403．5165．8±174．4

2.2 4種腫瘤標(biāo)志物診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值比較

4種腫瘤標(biāo)志物診斷原發(fā)性肝癌的敏感度由高到低依次為VEGF(0.817)、GPC3(0.812)、DCP(0.724)和AFP(0.534)；特異度由高到低依次為GPC3(0.707)、VEGF(0.692)、DCP(0.665)和AFP(0.653)。其中GPC3和VEGF的敏感度和特異性顯著高于DCP和AFP(P<0.05)，但GPC3與VEGF之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。四者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度和特異度為0.852和0.800，顯著高于任何一種標(biāo)志物(P<0.05)，見(jiàn)表2。ROC結(jié)果顯示聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積(AUC)為0.818，高于任一種標(biāo)志物單獨(dú)檢測(cè)的AUC，見(jiàn)圖1。

圖1 4種腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)原發(fā)性肝癌的ROC曲線

表2 4種腫瘤標(biāo)志物的診斷原發(fā)性肝癌的價(jià)值比較

3 討論

惡性腫瘤是威脅人類(lèi)生命的嚴(yán)重疾病，惡性腫瘤死亡率已占據(jù)我國(guó)人類(lèi)疾病譜的第1位。原發(fā)性肝癌是全球第六大腫瘤，我國(guó)是世界上肝癌高發(fā)區(qū)之一，發(fā)病率為20.37/10萬(wàn)，位于常見(jiàn)腫瘤的第3位。目前原發(fā)性肝癌的治療尚缺乏有效手段，早期以手術(shù)為主，術(shù)后復(fù)發(fā)率高，容易沿血管及淋巴管發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，預(yù)后差。由于原發(fā)性肝癌早期癥狀和體征不明顯或缺乏特異性，導(dǎo)致早期診斷率較低，患者就醫(yī)時(shí)常為中晚期，喪失治療機(jī)會(huì)。研究顯示，早中期原發(fā)性肝癌可手術(shù)治療，小肝癌手術(shù)切除術(shù)后5年生存率可達(dá)60%以上，大肝癌術(shù)后5年生存率則不足40%。同時(shí)，由于原發(fā)性肝癌對(duì)放療和化療均不敏感，預(yù)后總體較差。在目前治療尚無(wú)更好策略之際，對(duì)高危人群的有效篩選和早期診斷，是提高生存率、降低病死率的有效途徑。AFP是目前篩選、檢測(cè)和隨訪原發(fā)性肝癌最常用的腫瘤標(biāo)志物，但在分化程度好的原發(fā)性肝癌或退行發(fā)育的原發(fā)性肝癌中可能僅有輕度或沒(méi)有AFP水平升高，對(duì)于腫瘤直徑小于1 cm的微小腫瘤病灶的檢出率仍不高，30%～40%早期、可切除性原發(fā)性肝癌患者中血清AFP可以沒(méi)有明顯升高，而良性或特殊疾病等情況下AFP可為陽(yáng)性[1-2]，因此，對(duì)于原發(fā)性肝癌的診斷、特別是早期診斷還沒(méi)有可靠的血清學(xué)指標(biāo)。

GPC3是一種膜性硫酸乙酰肝素糖蛋白，影響多種生物效應(yīng)分子，進(jìn)而在細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育和癌變過(guò)程中起到關(guān)鍵作用[3-5]。GPC3在人體胎肝、胎盤(pán)等組織中高表達(dá)，但在正常成人肝臟中無(wú)表達(dá)，在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值評(píng)估成為當(dāng)今熱門(mén)研究課題之一[6-8]。Liu等[9]研究顯示AFP聯(lián)合GPC3診斷HCC的敏感度(79.54%)顯著優(yōu)于AFP單獨(dú)檢測(cè)(65.91%)及GPC3單獨(dú)檢測(cè)(61.36%)，有利于肝癌的早期發(fā)現(xiàn)。大部分病例中，GPC3水平的升高與AFP水平之間無(wú)相關(guān)關(guān)系，二者在HCC的診斷上相互獨(dú)立具有互補(bǔ)性。DCP是近年來(lái)研究較熱的肝癌腫瘤標(biāo)志物，其表達(dá)主要與肝細(xì)胞缺氧及低維生素K濃度引起凝血酶原合成異常有關(guān)，能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與遷移，大量研究顯示肝癌患者血清中DCP出現(xiàn)異常升高[10]。VEGF與惡性腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)，肝細(xì)胞可通過(guò)分泌大量的VEGF以促進(jìn)血管生成和血管通透性增加，加速腫瘤的生長(zhǎng)增殖。

本研究檢測(cè)了82例原發(fā)性肝癌患者血清AFP、GPC3、DCP和VEGF,結(jié)果顯示，相比于非原發(fā)性肝癌患者，肝癌患者血清4種腫瘤標(biāo)志物出現(xiàn)顯著升高，其中GPC3和VEGF的診斷敏感度和特異性較高。在肝硬化患者的血清中，血清AFP、GPC3、DCP和VEGF水平也出現(xiàn)了升高，但是與健康對(duì)照組患者比較，只有GPC3的升高與對(duì)照組有顯著差異，而其他3種腫瘤標(biāo)志物的升高無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。ROC曲線分析表明GPC3的AUC略高于其他3種標(biāo)志物，達(dá)到0.718，但是聯(lián)合4種標(biāo)志物檢測(cè)，其診斷優(yōu)勢(shì)明顯突顯出來(lái)，其敏感度和特異度為0.852和0.800，曲線下面積達(dá)到0.818，顯著高于任何一種標(biāo)志物的單獨(dú)檢測(cè)，可見(jiàn)聯(lián)合4種標(biāo)志物檢測(cè)遠(yuǎn)遠(yuǎn)提高了原發(fā)性肝癌的檢出率。

綜上所述，血清GPC3、DCP和VEGF的檢測(cè)可協(xié)助AFP診斷原發(fā)性肝癌，聯(lián)合4種標(biāo)志物檢測(cè)可顯著提高原發(fā)性肝癌的檢出率。

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(編輯：甘 艷)

Value of Serum AFP,GPC3,DCP and VEGF Concentration in the Early Diagnosis of Primary Hepatocellular Carcinoma

LULingpeng,HUANGYanfang.ShanghaiSeventhPeople'sHospital,Shanghai,200137

Objective To investigate the effect of AFP,GPC3,DCP and VEGF in the early diagnosis of primary hepatocellular carcinoma.Methods 82 cases of primary liver cancer patients were selected as liver cancer group,45 cases of liver cirrhosis were liver cirrhosis group and 50 healthy subjects were the control group.Serum AFP,GPC3,DCP,and VEGF concentration of the patients were detected.Value of 4 kinds of tumor markers in the diagnosis of primary liver cancer was detected by ROC curve.Results The concentration of serum APF,GPC3,DCP and VEGF in liver cancer group were significantly higher than those of cirrhosis group and the control group (P<0.05).Concentrations of serum GPC3 in liver cirrhosis group was significantly higher than the control group (P<0.05).The sensitivity of tumor markers in the diagnosis of primary liver cancer from high to low were VEGF (0.817),GPC3 (0.812),DCP (0.724) and AFP (0.534),and the specificity from high to low were GPC3 (0.707),VEGF (0.692),DCP (0.665) and AFP(0.653).The sensitivity and specificity of GPC3 and VEGF were significantly higher than those of DCP and AFP (P<0.05),but there had no significant difference between GPC3 and VEGF (P>0.05).The sensitivity and specificity were 0.852 and 0.800 of combined detection,which were significantly higher than those of any kind of markers (P<0.05).ROC results showed that the area under the curve of joint detection (AUC) was 0.818,which was higher than that of any single marker detection AUC.Conclusion Detection of serum GPC3,DCP and VEGF,AFP can assist in the diagnosis of primary hepatocellular carcinoma,combined with 4 kinds of markers can significantly improve the detection rate of primary liver cancer.

Primary hepatocellular carcinoma；AFP；GPC3；DCP；VEGF

200137 上海市第七人民醫(yī)院(盧凌鵬)；200137 上海市浦東新區(qū)高橋社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心(黃艷芳)

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.09.003

R735.7

A

1001-5930(2016)09-1399-03

2016-04-11

2016-07-29)