皮膚惡性黑色素瘤手術(shù)聯(lián)合免疫療法的臨床研究

王華斌

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皮膚惡性黑色素瘤手術(shù)聯(lián)合免疫療法的臨床研究

王華斌

目的 探討在皮膚惡性黑色素瘤手術(shù)治療中聯(lián)合免疫治療的臨床療效。方法回顧性分析收治的皮膚惡性黑色素瘤患者52例，根據(jù)治療方式不同分為治療組33例和對照組19例。兩組患者均行根治手術(shù)治療；對照組在根治術(shù)后直接進(jìn)行移植皮修復(fù)。治療組在根治術(shù)后應(yīng)用免疫療法。比較兩組患者整個治療過程所需時間和出血量；比較治療后第1年、第2年和第3年患者生存率；檢測兩組血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平。結(jié)果治療組患者整個治療過程平均所需時間和出血量分別為(2.25±0.43)h和(595.78±149.72)mL，與對照組(2.34±0.51)h和(604.27±155.33)mL比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)；治療后，治療組患者第2和第3年的生存率明顯高于對照組(P<0.05)；治療組治療后MMP-2和MMP-9水平均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論在皮膚惡性黑色素瘤手術(shù)治療中采取免疫療法可提高治療效果、提高術(shù)后生存率和降低血清MMP-2 和MMP-9含量，值得臨床應(yīng)用。

皮膚惡性黑色素瘤；免疫療法；基質(zhì)金屬蛋白酶-2；基質(zhì)金屬蛋白酶-9

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1553～1555)

皮膚惡性黑色素瘤是黑色素細(xì)胞相關(guān)惡性腫瘤，在西方國家皮膚癌死亡首因[1]，在我國范圍內(nèi)黑色素瘤發(fā)病率增速較快，具有致死性強(qiáng)、易轉(zhuǎn)移和對單純放化療不敏感等特點(diǎn)；該病在我國的發(fā)病率較低，但隨著我國人口疾病譜的變化，其發(fā)病率、死亡率正逐年升高，已對人們的健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅[2]。對惡性黑色素瘤采取免疫療法已用于臨床各科疾病的治療，本研究中回顧性分析本室2010年4月至2012年7月收治的皮膚惡性黑色素瘤患者52例，結(jié)果證實在皮膚黑色素瘤手術(shù)治療中采取聯(lián)合免疫療法治療療效更佳，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2010年4月至2012年7月收治的皮膚惡性黑色素瘤患者52例，根據(jù)手術(shù)根治術(shù)后處理方式不同分為治療組33例和對照組19例。其中治療組男性20例，女性13例；年齡30～60歲，平均(42.1±7.7)歲；病程7個月～5年，平均(2.5±0.9)年；足底部22例，面部4例，上肢2例，下肢3例，胸部1例，肩部1例。創(chuàng)口面積：1.2 cm×1.7 cm～5.2 cm×5.6 cm。表淺擴(kuò)散型20例，雀斑樣型8例，結(jié)節(jié)型5例；Clark分級：Ⅰ級1例，Ⅱ級9例，Ⅲ級13例，Ⅳ級7例，Ⅴ級3例。治療組男性12例，女性7例；年齡32～62歲；平均(44.4±7.8)歲；病程9個月～5.6年，平均(2.6±0.7)年；足底部13例，面部2例，上肢1例，下肢1例，胸部1例，肩部1例。創(chuàng)口面積：1.1 cm×1.7 cm～5.1 cm×5.5 cm；表淺擴(kuò)散型14例，雀斑樣型3例，結(jié)節(jié)型2例；Clark分級：Ⅰ級1例，Ⅱ級3例，Ⅲ級9例，Ⅳ級5例，Ⅴ級1例。兩組一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

兩組患者均行根治手術(shù)治療，具體方法為：手術(shù)均在全麻下進(jìn)行，沿原發(fā)病灶1.5～2.0 cm范圍切除病灶，切除深度約至深筋膜。對照組在根治術(shù)后，經(jīng)病理檢查證實切緣及腫塊深面無腫瘤浸潤后，直接進(jìn)行移植皮修復(fù)。治療組：在根治術(shù)后第3 d起，給予α-2b干擾素聯(lián)合白介素-2進(jìn)行免疫治療；具體方法：α-2b干擾素，300萬單位/次；白介素-2，100萬單位/次；分別肌肉注射15次。術(shù)后第3個月和第6個月，再給予上次相同方法各治療一次。

1.3 觀察指標(biāo)

術(shù)中情況比較：記錄和比較兩組患者整個治療過程所需時間和出血量。

對所有患者術(shù)后3年內(nèi)進(jìn)行隨訪，分別記錄和比較治療后第1年、第2年和第3年患者生存率。

檢測兩組血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平，均采用酶聯(lián)免疫法檢測，MMP-9試劑盒為上海樊克生物科技有限公司產(chǎn)品，批號FK-pk0069；MMP-9試劑盒為上海冠東生物科技有限公司產(chǎn)品，批號BMH075。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 17.0軟件分析，計量資料用表示，分析采取配對t檢驗，計數(shù)資料分析采取χ2檢驗分，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療所需時間和術(shù)中出血量比較

治療組患者整個治療過程平均所需時間和出血量分別為(2.25±0.43)h和(595.78±1495.72)mL，明顯少于對照組的(2.34±0.51)h和(604.27±155.33)mL，比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 兩組患者生存率比較

治療組治療后第1年患者生存率高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療組第2和第3年生存率明顯高于對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組3年內(nèi)生存率比較(例，%)

2.3 兩組血清MMP-2和MMP-9含量比較

兩組治療后血清MMP-2和MMP-9含量均明顯下降(P<0.0，P<0.01)；治療組治療后MMP-2和MMP-9含量均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2 兩組血清MMP-2和MMP-9含量比較

3 討論

皮膚黑色素瘤為最常見皮膚惡性腫瘤，隨著大氣臭氧層破壞加強(qiáng)，其發(fā)病率呈明升高，且遠(yuǎn)超于其他惡性腫瘤[3]。初步分析其可能與紫外線的過渡照射密切相關(guān)[4]。此外，調(diào)查發(fā)現(xiàn)該病多見于男性，男性多見于背部，女性多見于上肢和腿部。本研究中病例呈現(xiàn)年齡最小30歲，好發(fā)于足底部，病理分級以Ⅲ級為主等特點(diǎn)。

皮膚黑色素瘤惡性程度高，好轉(zhuǎn)移，預(yù)后多不理想，臨床盡早進(jìn)行手術(shù)根治是最理想療法。但對于病灶切除范圍多大更有利于臨床根治一直存在爭議。以往常認(rèn)為切除病灶邊緣越寬，效果越好；因此，以5 cm邊緣灶是過去常用的切除標(biāo)準(zhǔn)[5]。國內(nèi)學(xué)者也認(rèn)為，皮膚黑色素瘤的手術(shù)根治術(shù)在病灶切除深度方面更為重要[6]。參照國內(nèi)外最新標(biāo)準(zhǔn)，本研究沿原發(fā)病灶1.5～2.0 cm范圍切除病灶，切除深度約至深筋膜，取得良好效果。

應(yīng)用免疫療法治療各種腫瘤的臨床研究不斷發(fā)展，在黑色素瘤的治療中也已被證實療效良好。針對惡性黑色素瘤的免疫治療制劑也有多種，如伊匹單抗等[7]。在目前的臨床研究中，在黑色素手術(shù)治療中同時給予免疫治療的確切療效及可能作用機(jī)制仍需進(jìn)一步探討[8]。本研究中筆者在常規(guī)手術(shù)治療后，加用免疫制劑α-2b干擾素聯(lián)合IL-2治療取得良好效果；α-2b干擾素和IL-2為多肽類活性分子，均由活化的間質(zhì)細(xì)胞或免疫細(xì)胞(如單核/巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞以及B淋巴細(xì)胞等)合成分泌[9]。研究證實，α-2b干擾素與IL-2可調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化成熟，參與免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)，促進(jìn)創(chuàng)傷愈合以及腫瘤消長等作用[9]。

本研究結(jié)果顯示：兩組患者整體治療過程中手術(shù)操作所需時間一致，比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而治療后對患者的生存影響結(jié)果發(fā)現(xiàn)，加用α-2b干擾素聯(lián)合IL-2后患者的第2和第3年的生存率明顯高于對照組(P<0.05)，以上提示在皮膚黑色素瘤手術(shù)根治中采取α-2b干擾素聯(lián)合IL-2對于疾病的整個治療過程具有重要意義。

腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移是一個動態(tài)的、復(fù)雜的過程，在這一過程中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)家族發(fā)揮了重要的作用調(diào)節(jié)作用[10]。目前已經(jīng)證實，MMP-2 和MMP-9在肺癌、胃癌、乳腺癌和頭頸部癌等惡性腫瘤中均高表達(dá)，且與腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和預(yù)后差密切相關(guān)[11-12]。但MMP-2 和MMP-9在皮膚黑色素瘤患者外周血中的表達(dá)卻少見報道。MMP-和MMP-9 均可降解細(xì)胞外基質(zhì)及基膜中的膠原和彈力蛋白等成分，破壞基膜，從而腫瘤細(xì)胞侵襲結(jié)締組織，引起小血管和淋巴管而發(fā)生轉(zhuǎn)移[13]。

本組研究顯示，手術(shù)聯(lián)合α-2b干擾素和IL-2治療后患者血清MMP-2和MMP-9水平均明顯低于治療前和對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；提示在皮膚黑色素瘤手術(shù)根過程中，采用α-2b干擾素聯(lián)合IL-2免疫治療可經(jīng)免疫作用，增強(qiáng)自身抗腫瘤能力，間接清除手術(shù)腔內(nèi)滲液和組織碎塊，這些可能是聯(lián)合免疫療法治療降低患者血清MMP-2和MMP-9水平的重要因素所在，而通過降低患者血清MMP-2和MMP-9水平可能與免疫療法發(fā)揮抑制腫瘤生長密切相關(guān)。

[1] Lyth J,Eriksson H,Hansson J,et al.Trends in cutaneous malignant melanoma in Sweden 1997-2011:thinner tumours and improved survival among men〔J〕.Br J Dermatol,2015,172(3):700-706.

[2] 袁 藝,范 清.負(fù)壓封閉引流技術(shù)在腫瘤病人難愈性傷口治療中的應(yīng)用〔J〕.長江大學(xué)學(xué)報,2010,7(3):57-58.

[3] Markovic SN,Erickson LA,Rao RD,et al.Malignant melanoma in the 21st century,part 1:epidemiology,risk factors,screening,prevention,and diagnosis〔J〕.Mayo Clin Proc,2007,82(3):364-380.

[4] Strouse JJ,Fears TR,Tucker MA,et al.Pediatric melanoma:risk factor and survival analysis of the surveillance,epidemiology and end results database〔J〕.J Clin Oncol,2005,23(21):4735-41.

[5] 李薈元.惡性黑素瘤的最新動態(tài)(四)〔J〕.中國美容醫(yī)學(xué),2008,17(4):595-597.

[6] 劉 毅,蘇志紅,劉蔓華,等.兩種治療足跟與足跖部皮膚惡性黑色素瘤手術(shù)的遠(yuǎn)期療效評價〔J〕.腫瘤防治研究,2001,28(3):217-219.

[7] 孫 瑤,陳湘磊.黑色素瘤內(nèi)科治療的新進(jìn)展〔J〕.醫(yī)學(xué)與哲學(xué),2015,36(1):12-13.

[8] 羅小美,陳繼冰,牛立志.靶向免疫治療聯(lián)合放射治療在晚期黑色素瘤中的研究進(jìn)展〔J〕.中國腫瘤臨床,2015,42(4):255-258.

[9] 劉 毅,張 誠,張鮮英,等.手術(shù)聯(lián)合免疫療法治療皮膚惡性黑色素瘤的療效分析〔J〕.腫瘤防治研究,2012,39(4):442-445.

[10] Clavel C,Polette M,Doco M,et al.Immunolocalization of matrix metallo-proteinases and their tissue inhibitor in human mammary pathology〔J〕.Bull Cancer,1992,79(3):261-270.

[11] Che YL,Luo SJ,Li G,et al.The C3G/Rap1 pathway promotes secretion of MMP-2 and MMP-9 and is involved in serous ovarian cancer metastasis〔J〕.Cancer Lett,2015,359(2):241-249.

[12] Araújo RF Jr,Lira GA,et al.Prognostic and diagnostic implications of MMP-2,MMP-9,and VEGF-α expressions in colorectal cancer〔J〕.Pathol Res Pract,2015,211(1):71-77.

[13] Shi H,Liu L,Liu LM,et al.Inhibition of tumor growth by β-elemene through downregulation of the expression of uPA,uPAR,MMP-2,and MMP-9 in a murine intraocular melanoma model〔J〕.Melanoma Res,2015,25(1):15-21.

(編輯：吳小紅)

Clinical Study of Immunotherapy in Operation Treatment for Cutaneous Malignant Melanoma

WANGHuabin.HubeiUmorHospital,Wuhan,430079

Objective To study the clinical value of immunotherapy in operation treatment for cutaneous malignant melanoma.Methods 52 cases of cutaneous malignant melanoma were randomly divided into the treatment group and the control group by different operation treatment.The control group was treated by free tissue flap transplantation after tumor resection.The treatment group was treated by immunotherapy during operation treatment,and then free tissue flap transplanatation.Time and amount of bleeding of whole treatment course were compared between the 2 groups.1-,2- and 3-year survival rates were compared .Serum levels of MMP-2 and MMP-9 were detected of the 2 groups.Results Time and amount of bleeding of whole treatment course in the treatment group were(2.25±0.43)h and (595.78±149.72)mL,which were lower than (2.34±0.51)h and (604.27±155.33)mL in the control group(P>0.05).After treatment,2- and 3-year survival rates of the treatment group were obviously higher than those of the control group(P<0.05).Serum levels of MMP-2 and MMP-9 in the treatment group were remarkably lower than those of the control group (P<0.01).Conclusion In operation treatment of cutaneous malignant melanoma,immunotherapy could increase efficacy,improve survival rate,and decrease serum levels of MMP-2 and MMP-9,it is worthy of clinical application.

Cutaneous malignant melanoma；Immunotherapy；MMP-2；MMP-9

430079 湖北省腫瘤醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.09.051

R739.5

A

1001-5930(2016)09-1553-03

2015-10-08

2016-04-05)