非小細(xì)胞肺癌中c-myc表達(dá)與其臨床特征的相關(guān)性分析

楊先國 戈 偉 王建國 陳桂明 蔡 鵬 喻劉楊

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·基礎(chǔ)研究·

非小細(xì)胞肺癌中c-myc表達(dá)與其臨床特征的相關(guān)性分析

楊先國 戈 偉 王建國 陳桂明 蔡 鵬 喻劉楊

目的 探討c-myc表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)臨床特征的相關(guān)性。方法選取75例NSCLC患者，采用免疫組化法檢測(cè)75例NSCLC組織以及30例癌旁正常組織中c-myc蛋白水平。結(jié)果NSCLC組織中c-myc表達(dá)陽性率顯著高于癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。c-myc陽性表達(dá)與腫瘤病理類型、臨床分期、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)，而與患者性別、年齡、腫瘤位置、腫瘤直徑、胸腔積液、吸煙史等無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論NSCLC組織中c-myc表達(dá)與其臨床特征指標(biāo)具有一定的關(guān)系。

非小細(xì)胞肺癌；c-myc；腺癌；臨床分期；高分化癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1393～1395)

目前諸多研究均認(rèn)為肺癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟、多基因改變的過程。癌基因激活，抑癌基因、DNA修復(fù)基因的突變或缺失與肺癌的發(fā)生發(fā)展有著十分密切的關(guān)系[1]?；谠撉闆r，肺癌分子生物學(xué)成為當(dāng)前腫瘤學(xué)研究的重要方向。c-myc是原癌基因myc家族中的一員，研究發(fā)現(xiàn)c-myc基因在多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[2]。本研究即旨在探討非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)表達(dá)c-myc與患者臨床特征的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取75例NSCLC患者，其中男性51例、女性24例；年齡49～73歲，中位年齡63歲；腫瘤發(fā)生在左肺43例，右肺32例；腫瘤直徑≥3.0 cm 52例，<3.0 cm 23例；病理類型：鱗癌36例，腺癌35例，大細(xì)胞癌4例；臨床分期Ⅰ～Ⅱ期48例，Ⅲ～Ⅳ期27例；腫瘤分化程度高分化13例，中分化39例，低分化23例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性49例，陰性36例；胸腔積液陽性15例，陰性60例；有吸煙史56例，無吸煙史19例。此外，另選取30例患者經(jīng)病理證實(shí)的癌旁正常組織作為對(duì)照。

1.2 研究方法

步驟如下：①切片脫蠟至水。②3%過氧化氫液(H2O2)室溫孵育10～15 min，去除內(nèi)源性過氧化物酶。③在0.01 M的磷酸鹽緩沖液(PBS)中洗滌玻片3次，每次3 min。④在0.01 M 的檸檬酸鹽緩沖液(CAS)中浸泡玻片，微波爐加熱12 min，修復(fù)抗原。⑤在室溫環(huán)境中冷卻玻片，PBS洗滌，洗滌過程中注意輕微震蕩數(shù)秒，每次3 min。⑥滴加第一抗體，孵育30 min后用0.01 M的 PBS連續(xù)洗滌3次，每次5 min。⑦滴加EnVision系統(tǒng)，37 ℃孵育30 min，0.01 M 的PBS洗滌3次，每次5 min。⑧二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色：配制DAB顯色劑后顯色3～5 min，蒸餾水終止顯色。⑨蘇木精復(fù)染：在蘇木精溶液中浸泡1 min，復(fù)染細(xì)胞核，鹽酸酒精分化后氨水返藍(lán)1～3 min。⑩酒精梯度脫水干燥，二甲苯透明后中性樹膠封片。

1.3 結(jié)果判斷

陽性染色程度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：棕褐色3分、棕黃色2分、淺黃色1分、污染色0分。染色細(xì)胞百分率評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：高倍鏡下選擇10個(gè)具有代表性的視野，染色陽性細(xì)胞數(shù)占該視野內(nèi)癌細(xì)胞總數(shù)的百分比≥51%為3分、26%～50%為2分、10%～25%為1分、<10%為0分。兩者乘積≤1分為陰性，≥2分為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SAS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料用百分率表示，計(jì)數(shù)資料比較采用R×C表χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 NSCLC組織與癌旁正常組織中c-myc蛋白陽性率比較

75例NSCLC組織c-myc蛋白陽性率為62.67%(47/75)，30例癌旁正常組織c-myc蛋白陽性率為16.67%(5/30)。NSCLC組織中c-myc蛋白陽性表達(dá)率顯著高于癌旁正常組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 c-myc蛋白表達(dá)與NSCLC臨床特征的相關(guān)性

c-myc蛋白表達(dá)與NSCLC病理類型、臨床分期、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)，而與患者性別、年齡、腫瘤位置、腫瘤直徑、胸腔積液、吸煙史等因素?zé)o顯著相關(guān)(P>0.05)，見表1。

3 討論

肺癌是呼吸系統(tǒng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤。近年來，全球肺癌發(fā)病率以及死亡率急驟升高，因此有關(guān)肺癌的基礎(chǔ)以及臨床研究日益受到關(guān)注。盡管目前對(duì)肺癌發(fā)病機(jī)制的研究取得了長足的進(jìn)步，但是臨床治療肺癌的效果仍然不盡如人意，肺癌的5年生存率仍然處于較低水平[3]。隨著研究的深入，分子生物學(xué)在肺癌研究領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，這不僅給肺癌研究提供了許多新方法、新技術(shù)，而且還使肺癌的診療進(jìn)入一個(gè)新的階段。許多肺癌研究者從分子的角度描述肺癌發(fā)生、發(fā)展的規(guī)律，并嘗試用分子手段去預(yù)測(cè)、診斷、治療肺癌[4]。

表1 NSCLC組織中c-myc蛋白表達(dá)與其臨床病理特征的相關(guān)性分析(例，%)

目前臨床根據(jù)生物學(xué)特性的不同常將肺癌分為小細(xì)胞肺癌(SCLC)、NSCLC兩大類，其中后者約占所有肺癌患者的80%～85%[5]，因此NSCLC是肺癌研究的重中之重。c-myc是原癌基因myc家族中的一員，它位于第8號(hào)染色體，在細(xì)胞生長、分化、凋亡過程中發(fā)揮調(diào)控作用，因此c-myc可以影響細(xì)胞周期的進(jìn)程[6]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，c-myc擴(kuò)增、過度表達(dá)可以導(dǎo)致c-myc原癌基因激活，后者與許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著十分密切的聯(lián)系。郭艷萍等[7]研究報(bào)道，正常宮頸黏膜上皮、宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變、宮頸鱗癌c-myc表達(dá)陽性率分別為25.00%、52.50%、82.50%，宮頸鱗癌組織表達(dá)c-myc與患者組織學(xué)分級(jí)、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床特征有關(guān)。王立成等[8]報(bào)道，原發(fā)性肝癌組織、癌旁正常組織c-myc表達(dá)陽性率分別為62.79%、16.28%，原發(fā)性肝癌組織表達(dá)c-myc與患者病理分化程度、血清甲胎蛋白水平有關(guān)。李春燕等[9]報(bào)道，基底細(xì)胞樣乳腺癌組織、非基底細(xì)胞樣乳腺癌組織、正常乳腺組織c-myc表達(dá)陽性率分別為73.17%、53.96%、2.00%，基底細(xì)胞樣乳腺癌組織表達(dá)c-myc與患者臨床分期、淋巴結(jié)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。

在上述研究背景下，NSCLC與c-myc關(guān)系的研究得到逐步開展。在本研究中，通過對(duì)NSCLC患者臨床資料的全面收集，結(jié)果顯示NSCLC組織表達(dá)c-myc陽性率顯著高于癌旁正常組織，且c-myc表達(dá)與NSCLC患者病理分型、臨床分期、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床特征指標(biāo)有一定的關(guān)系，這與其他諸多研究報(bào)道[10-11]一致。由此可見，NSCLC組織表達(dá)c-myc與患者諸多臨床特征指標(biāo)具有一定的關(guān)系，但是這種關(guān)系其中的具體機(jī)制有待進(jìn)一步詳細(xì)研究。

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(編輯：吳小紅)

Analysis of Relationship between C-myc Expression and Clinical Characteristics of Non-small Cell Lung Cancer

YANGXianguo,GEWei,WANGJianguo,etal.People'sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,430060

Objective To investigate the relationship between c-myc expression and clinical characteristics of non-small cell lung cancer(NSCLC).Methods 75 patients with NSCLC were selected,and the c-myc protein in 75 NSCLC tissues and 30 adjacent normal tissues was detected by immunohistochemical method.Results The positive rate of c-myc in NSCLC tissues was significantly higher than that of adjacent normal tissues(P<0.05).The positive expression of c-myc was correlated with tumor pathological type,clinical stage,tumor differentiation and lymph node metastasis (P<0.05),but was not correlated with gender,age,tumor location,tumor diameter,pleural effusion,and smoking history (P>0.05).Conclusion There is a certain relationship between c-myc expression in NSCLC tissues and many clinical characteristic indexes.

Non-small cell lung cancer(NSCLC);C-myc protein;Adenocarcinoma;Clinical stage;Highly differentiated carcinoma;Lymph node metastasis

430060 武漢大學(xué)人民醫(yī)院(楊先國，戈 偉)；448000 荊門市第二人民醫(yī)院(王建國，陳桂明，蔡 鵬，喻劉楊)

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.09.001

R734.2

A

1001-5930(2016)09-1393-03

2015-11-04

2015-12-10)