包蟲病的診斷方法與預(yù)防措施概述

張 旭，趙 莉，張壯志，張魯安*

（1.新疆兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊830063；2.新疆畜牧科學(xué)院，新疆烏魯木齊830000）

包蟲病的診斷方法與預(yù)防措施概述

張 旭1，趙 莉2，張壯志2，張魯安1*

（1.新疆兵團畜牧獸醫(yī)工作總站，新疆烏魯木齊830063；2.新疆畜牧科學(xué)院，新疆烏魯木齊830000）

綜述包蟲病的相關(guān)診斷技術(shù)和預(yù)防措施研究進展。以細粒棘球絳蟲的生活史、包蟲病的流行現(xiàn)狀、包蟲病的檢測和診斷技術(shù)以及包蟲病預(yù)防與控制等方面的研究進展進行綜述。隨著新的診斷技術(shù)的發(fā)展為包蟲病的預(yù)防和控制奠定了基礎(chǔ)，也使得包蟲病患者的早期診斷治療措施有了重大突破；同時包蟲病預(yù)防疫苗在動物實驗中也收到良好的保護效果，驅(qū)蟲藥物的更新與研發(fā)更加深入。目前，在中國包蟲病大面積高發(fā)，國力民力有限，難以付出巨大的投入，也是控制工作中的主要制約因素，探索出簡便易行、投入量少、收效快的防控技術(shù)措施，也急待解決。

包蟲?。患毩＜蚪{蟲；診斷方法；預(yù)防控制

10.16863 /j.cnki.1003-6377.2016.06.005

包蟲病是因細粒棘球絳蟲（Echinococcus granulosus）的中絳期幼蟲寄生在中間宿主的內(nèi)臟而引起的疾病，是一種可以引起牧區(qū)人民身體健康的寄生蟲病，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)的發(fā)展。棘球?qū)俜?種[1]，其中細粒棘球絳蟲（E.granulosus）的分布范圍最廣，危害也最為嚴(yán)重[2]。本文將以細粒棘球絳蟲的生活史、包蟲病的流行現(xiàn)狀、包蟲病的檢測和診斷技術(shù)以及包蟲病預(yù)防與控制等方面的研究進展作一綜述。

1 細粒棘球絳蟲的生活史

細粒棘球絳蟲的終末宿主主要是肉食性的哺乳動物，其中最為主要的是狐貍以及犬類；中間宿主則主要是駱駝、羊、牛等偶蹄類動物，人類也是中間宿主[3]。當(dāng)哺乳動物誤食細粒棘球絳蟲的蟲卵時，孵化出的六鉤蚴也會隨血液循環(huán)侵入到肝臟等其他的組織。被感染的動物常因組織器官受損而喪失活動能力，嚴(yán)重者會發(fā)生死亡[4]。

2 包蟲病的流行現(xiàn)狀

細粒棘球絳蟲具有較為廣泛的宿主適應(yīng)性，在世界上各大洲的牧場都有出現(xiàn)，但其還是主要分布在北半球，亞洲的北部、歐洲和北美洲的大部分區(qū)域都是其主要的流行區(qū)域，中國也是細粒棘球絳蟲在世界上流行最為嚴(yán)重的國家之一。在中國由于細粒棘球絳蟲引起的疾病多發(fā)生在西藏自治區(qū)、內(nèi)蒙古自治區(qū)的呼倫貝爾草原地區(qū)、新疆維吾爾自治區(qū)的北部、青海省的南部高原、四川省的甘孜地區(qū)、甘肅省[5]。另外，在東北3省、河南省、山東省、安徽省、湖北省、貴州省和云南省等也有散發(fā)的病例[6]。據(jù)不完全統(tǒng)計分析，全國大約有50～60萬人口患有包蟲病，新疆維吾爾自治區(qū)是包蟲病高發(fā)的西部省區(qū)之一，1990年的人體細粒棘球蚴病的年發(fā)病率為0.0087％，有的縣甚至高達0.042％[7]。

3 包蟲病的主要診斷方法以及檢測技術(shù)

3.1 中間宿主的診斷和檢測技術(shù)

卡松尼皮內(nèi)試驗雖然快捷、敏感，但是因為受到多種因素的影響，導(dǎo)致特異性低[8]。免疫印跡實驗?zāi)軌驒z測到囊性的包蟲病患者血清中的識別抗原的抗原帶，敏感性比較高，而且特異性達到了76.0％[9]。用間接血凝試驗來監(jiān)測包蟲囊液含有的特異性IgM抗體，它的敏感率和特異性都高，并且具有交叉反應(yīng)率低的特點[10]。而ELISA方法[11]可以同時檢測同一時間段中的包蟲病患者血清的IgA、IgG和IgM。

乳膠凝集實驗是一種較為理想的包蟲病檢測方法[12]，但由于包蟲可以分泌許多體表可溶性抗原的影響，導(dǎo)致在進行抗體的檢測時會呈現(xiàn)出陰性的結(jié)果[13]。通過逆轉(zhuǎn)錄PCR來擴增特異mRNA的方法則可以大大提高血清學(xué)方法檢測感染棘球絳蟲特異性抗體的陽性率[14]。

應(yīng)用超聲波[15]、X線[16]、B超[17]、CT[18]、MRI[19]可以檢查到患有包蟲病的包囊，發(fā)現(xiàn)病變臟器的不同形態(tài)變化，區(qū)分膽結(jié)石和包蟲子囊阻塞膽管，甚至可以區(qū)別單房型和多房型包蟲囊腫。使用血清學(xué)檢查，再結(jié)合B超檢查，包蟲病的準(zhǔn)確率更可高達94％。

3.2 終末宿主的診斷和檢測技術(shù)

氫溴酸檳榔堿進行驅(qū)蟲以及剖檢是兩種檢查細粒棘球絳蟲蟲體感染的主要方法，但某些終末宿主對氫溴酸檳榔堿不敏感，同時會造成環(huán)境污染和對操作者也有感染包蟲病的風(fēng)險。利用麥克馬斯特氏法不但可以進行細粒棘球絳蟲的感染診斷，同時也可以初步估計終末宿主體內(nèi)細粒棘球絳蟲的感染量或者感染程度。但是，犬帶科絳蟲蟲卵十分相似，進行鑒別診斷十分困難，只能確定犬寄生有犬帶科絳蟲，不能區(qū)分具體蟲種。

糞抗原夾心ELISA方法可以檢測感染細粒棘球絳蟲糞樣中蟲卵的代謝抗原[20-24]。在中國一些地區(qū)的細粒棘球絳蟲流行病學(xué)調(diào)查工作中已經(jīng)開始應(yīng)用該種檢測方法。同樣使用copro-PCR方法來檢測在糞樣（copro-DNA）中的蟲體DNA也是非常新穎的。

地高辛標(biāo)記探針雜交的PCR技術(shù)同樣具有敏感性高、特異性強、操作簡便、檢測快速的特點，特別是Im-PCR技術(shù)，在特異性抗原濃度低至2 ng都能被檢測出來[25]，而Northern雜交技術(shù)、RNA酶的保護性分析都至少需要5mg的RNA，所以此方法是目前所有免疫定量方法都所不能及的。但與Real-time PCR和RT－DDPCR檢測相比較，后者需要的RNA要更加的少，在定量終點分析的方面精準(zhǔn)性要低[26]。

目前檢測血清中特異抗體最為普遍的還是ELISA方法，可以檢測到感染細粒棘球絳蟲的血清中的特異抗體—Em2循環(huán)抗體[27]。分子生物學(xué)方面被用來確定基因表達的最新方法則是Real－Time PCR，可以檢測到免疫后的基因表達水平、確定各種基因表達量的多少、分析免疫效應(yīng)分子之間的關(guān)系。

4 包蟲病的預(yù)防和控制

包蟲病疫苗已經(jīng)研發(fā)成功，合成疫苗的材料是體外培養(yǎng)六鉤蚴的代謝產(chǎn)物，或者是致弱的活蟲。這種方法在進行理論的研究、或者疫苗研發(fā)的效果評價是可以的，但是進行大范圍的推廣應(yīng)用，首先就必須解決能夠供應(yīng)制備疫苗所需要的六鉤蚴，因此就必須有大量的持續(xù)感染絳蟲成蟲的犬，以及羊或者其它的中間宿主。在新西蘭制備免疫所有羊只的疫苗就要飼養(yǎng)25萬只犬，以及大量的中間宿主。所以該疫苗的制備方法顯然是不切合實際的[28]。原頭蚴的體外培養(yǎng)研究，建立體外培養(yǎng)的平臺，就可以不用受制與細粒棘球絳蟲的特異性抗原，從而為研制包蟲病疫苗開展免疫預(yù)防奠定基礎(chǔ)，同時也能觀察到原頭蚴的發(fā)育和代謝，為篩選驅(qū)蟲藥物提供有利的條件[29]。

把細粒棘球蚴的原頭蚴進行勻漿后得到純凈的可溶性抗原免疫試驗犬，免疫一次就能夠抑制74.1％的孕節(jié)產(chǎn)生，免疫三次能夠抑制100％的孕節(jié)產(chǎn)生[30]，機體也產(chǎn)生對細粒棘球絳蟲較強的抗感染能力。用EgM9蛋白免疫接種犬后，也可以使腸道內(nèi)蟲體發(fā)育遲緩，減卵率達97.7％。腸道內(nèi)蟲體發(fā)育遲緩使得蟲卵產(chǎn)生減少，這樣就切斷了細粒棘球絳蟲的生活史，達到了控制包蟲病的目的，在流行病學(xué)上具有重要的意義。

經(jīng)過對誘食藥餌配方的改良加工，應(yīng)用制藥新工藝中的新型掩味技術(shù)，研發(fā)出“愛普銳克—食肉動物自動吞食片”[31-32]，家/牧犬的自動吞食率提高到了95％，驅(qū)蟲率也能達到100％，該藥既降低了驅(qū)蟲藥投喂過程中的危險，又達到驅(qū)蟲的目的。

長期以來，各個國家都在堅持綜合防控治理（詳見圖1），堅持“以預(yù)防為主要方面，預(yù)防重于治療”的基本方針指導(dǎo)下控制包蟲病，實施屠宰管制、家/牧犬的驅(qū)蟲管理等綜合防控措施，雙向的切斷細粒棘球絳蟲循環(huán)鏈的方法，使得綿羊棘球蚴的感染率大幅下降[33-36]。雖然防控工作都獲得了良好的效果，但是歷經(jīng)時間漫長，消耗代價相當(dāng)昂貴，難度也十分巨大。

圖1 各國控制成年綿羊棘球蚴病進展示意圖

在新疆的呼圖壁縣和溫宿縣通過以家/牧犬的驅(qū)蟲管理為中心的控制措施[37]。每只犬每月驅(qū)蟲一次，同時配合人員的培訓(xùn)、宣傳教育、組織的領(lǐng)導(dǎo)監(jiān)督等，使得兩縣的犬細粒棘球絳蟲感染率下降為0，較防控手段實施以前，綿羊子代的感染率下降了85％，防控工作取的重大突破，這些都足以證明以消滅包蟲病傳染源為主的控制策略是成功的。

對人而言，不管是手術(shù)摘除包囊還是口服阿苯噠唑類、甲苯咪唑類藥物都會對機體產(chǎn)生較大的損傷，對易感動物而言，使用抗寄生蟲藥物雖然能減少感染的機率，但仍然需要反復(fù)多次的投喂藥物，藥物有效濃度降低后動物又會再次被感染。所以有效的控制包蟲病的流行最有效的方法還是使用疫苗。通過目前對Eg95的大量研究表明，其對中間宿主的是具有保護力的[38]。從做好包蟲病的有效預(yù)防和控制的角度看，作為終末宿主的犬在此病的循環(huán)鏈中是非常重要的一個環(huán)節(jié)，所以檢測并撲殺感染細粒棘球絳蟲的犬，研制更方便、高效的犬用預(yù)防細粒棘球絳蟲感染的疫苗急需得到更新。利用包囊生發(fā)層和原頭蚴的殺傷技術(shù)手段，對改變目前的防控原理，突破控制周期的限定，也具有很大的研究意義。目前，在我國包蟲病大面積高發(fā)，國力民力有限，難以付出巨大的投入，也是我們控制工作中的主要制約因素，探索出簡便易行、投入量少、收效快的防控技術(shù)措施，也急待解決。

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The Diagnosis of Hydatid Disease And Preventive M easures

ZHANG Xu1，ZHAO Li2，ZHANG Zhuang-zhi2，ZHANG Lu-an1*
（1.Animal Hushandry and Veterinary Station of Xinjiang Production and Construction Corps,Urumqi830063, China；2.Veterinary Research Institute,Xinjiang Academy of Animal Science,Urumqi830000 China）

Research progress of diagnosis technology and related preventive measures of hydatid disease.In the life history of Echinococcus granulosus hydatid disease,epidemic situation,hydatid disease detection and diagnosis technology of hydatid disease prevention and control and other aspects of the research are reviewed in this paper.With the development of new diagnostic techniques have laid the foundation for the prevention and control of hydatid disease,make early diagnosis and treatmentmeasures of hydatid disease has been a major breakthrough in the prevention of hydatid disease vaccine;at the same time also received a good protective effect in animal experiments,update and research of anthelmintic drugsmore in-depth.At present, in our country a large area of high incidence of hydatid disease,their strength is limited,it is difficult to pay a huge investment,we also control the main restricting factors in the work,explore prevention measures is simple,less investment,fasteffect,also need to be solved.

Hydatid disease;Echinococcus granulosus;diagnosis;prevention and control

S855.9

A

1003－6377（2016）06－0021-05

支撐項目：兵團英才專項基金

張旭（1984-），男，獸醫(yī)碩士，獸醫(yī)師，主要從事動物疫病預(yù)防控制及檢測工作。E-mail：59951178@qq.com

簡介：張魯安（1971-），男，獸醫(yī)碩士，推廣研究員，主要從事動物疫病預(yù)防控制工作。E-mail：59951178@qq.com

2016-09-20，

2016-09-25