B超檢查奶牛同期發(fā)情和超數(shù)排卵期卵巢發(fā)育研究

雪雅妮

（青海省海西州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，青海 海西 817099）

B超檢查奶牛同期發(fā)情和超數(shù)排卵期卵巢發(fā)育研究

雪雅妮

（青海省海西州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，青海 海西 817099）

選取AMI-900型獸用B超，對(duì)20頭成年奶牛的同期發(fā)情與超數(shù)排卵期時(shí)卵巢的發(fā)育情況進(jìn)行觀察。在同期發(fā)情期開(kāi)始的第2d，卵巢直徑增大到最大值，第3d恢復(fù)常態(tài)后緩慢增長(zhǎng)，之后在第6d再一次達(dá)到最大。超數(shù)排卵期內(nèi)，卵巢的增長(zhǎng)速度快，并在第3d達(dá)到最大值。其形態(tài)也由開(kāi)始的多形態(tài)達(dá)到最后呈長(zhǎng)圓形或是類圓形。在同期發(fā)情期內(nèi)卵泡的增長(zhǎng)速度平穩(wěn)，并在第5d達(dá)到最大。在超數(shù)排卵期內(nèi)卵泡的增長(zhǎng)速度增快，且卵泡壁也在此時(shí)逐漸變薄，從4mm減小到2mm。沖胚時(shí)卵巢縱橫徑分別在63±3.3mm，52±2.4mm范圍內(nèi)時(shí)胚胎的可用率最高，達(dá)到76.3%，但卵巢縱橫徑分別在72±3.5mm，58±4.2mm范圍內(nèi)時(shí)，黃體數(shù)與沖胚數(shù)均為最大值，分別為14.6±3.3個(gè)及10.5±2.6個(gè)。所以通過(guò)B超檢測(cè)奶牛的卵巢發(fā)育是有效可行的。

B超；同期發(fā)情；超數(shù)排卵；奶牛

超聲影像診斷出現(xiàn)于上世紀(jì)70年代，對(duì)奶牛生殖具有深遠(yuǎn)意義，使奶牛的繁殖能力得到了充分的提高，增加了奶牛的養(yǎng)殖數(shù)量。本文通過(guò)對(duì)卵巢進(jìn)行B超監(jiān)測(cè),觀察奶牛同期發(fā)情和超數(shù)排卵期卵巢發(fā)育，使胚胎移植更加高效。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)器械 AMI-900型獸用B超；四柱欄保定架；電子直腸線陣探頭以及數(shù)碼相機(jī)等。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選擇20頭年齡在16個(gè)月以上的成年黑白花奶牛，均健康狀況良好。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 在同期發(fā)情的第1天與第13天下午，每頭受體牛接受氯前列烯醇0.4mg肌肉注射，供體牛在同期發(fā)情的第1天下午接受氯前列烯醇0.4mg肌肉注射，第14天下午接受氯前列烯醇0.6mg肌肉注射。奶牛的同期發(fā)情日設(shè)為零天，自母牛的發(fā)情周期開(kāi)始后的第9～12日，肌肉注射促卵泡素，連續(xù)注射5d，于每天早7:00和晚19:00分別注射一次，每次使用劑量遞減，總注射劑量為1600IU/頭，并在奶牛發(fā)情輸精之前采取促黃體素40IU/頭靜脈注射。

1.4 實(shí)驗(yàn)藥品 上海計(jì)劃生育研究所出產(chǎn)的劑量為每支0.2mg的氯前列烯醇；寧波市激素制品廠出產(chǎn)的劑量為每支200iu的促卵泡素及劑量為每支100IU的促黃體素。

1.5 B超檢查方法 檢查時(shí)間選在奶牛同期發(fā)情的前1d和開(kāi)始發(fā)情后的第2～6d，沖胚日及超數(shù)排卵的第1天和第3天，主要觀察奶牛卵巢、卵泡以及黃體的縱橫徑和形態(tài)。使用四柱欄保定架將奶牛固定，將探頭消毒，在處理清洗直腸糞便之后，再用手將探頭送入直腸，對(duì)卵巢展開(kāi)檢查。在熒屏上顯示出清晰、典型的卵巢、卵泡或是黃體圖像之后，將該圖像凍結(jié)，對(duì)其縱、橫直徑進(jìn)行測(cè)量。

2 結(jié) 果

2.1 卵巢超聲圖像情況

卵巢的長(zhǎng)度在發(fā)情期前后逐漸變大，其寬度也逐漸增 大，但其寬度的增大速度不均，其直徑在第2天加大到最長(zhǎng)， 但在第3天即可恢復(fù)到一個(gè)新的狀態(tài)。當(dāng)?shù)降?天時(shí)，卵巢 的縱橫徑長(zhǎng)再次緩慢增長(zhǎng)，如表1所示。處于超數(shù)排卵期的 卵巢，其直徑的增長(zhǎng)速度逐漸加快。在同期發(fā)情之前，多數(shù)卵 巢的形狀為類三角形、長(zhǎng)圓形或是類圓形，但隨著卵巢的生 長(zhǎng)發(fā)育，其形狀逐漸轉(zhuǎn)變成長(zhǎng)圓形、類圓形。清晰的卵巢邊界 也變得模糊。

2.2 卵泡超聲圖像的變化

卵泡在同期發(fā)情的過(guò)程中，增大速度較為緩慢，卵泡壁 幾乎無(wú)變化，但卵泡于超數(shù)排卵期的增大速度加大，并在第12天直徑達(dá)到最大，卵泡壁迅速變薄，且最薄可達(dá)2mm。如 表2所示。此外，卵泡壁邊緣變得更加清晰，且回聲對(duì)比度增 加到最強(qiáng)。多數(shù)同期發(fā)情期的卵泡呈現(xiàn)長(zhǎng)圓形、類圓形,有少 數(shù)呈現(xiàn)圓三角形，至超數(shù)排卵的第3d多數(shù)為類圓形，有少數(shù) 呈長(zhǎng)圓形。

2.3 黃體的超聲圖像

在同期發(fā)情開(kāi)始之前，黃體呈現(xiàn)出不規(guī)則形狀，其體積大 小約為10mm×10mm，多數(shù)黃體內(nèi)存在低回聲區(qū)。黃體的數(shù)量 在沖胚時(shí)增多，且形狀呈現(xiàn)出長(zhǎng)圓形,其體積大小約為24mm ×20mm，其邊界由清晰變?yōu)槟：谟跋裰谐霈F(xiàn)弱回聲。

2.4 沖胚日卵巢發(fā)育的情況與沖胚數(shù)的關(guān)系

沖胚日時(shí)，卵巢的形狀因受到外源激素的影響，逐漸成長(zhǎng)為圓形或是類圓形。黃體數(shù)量越多，沖胚數(shù)量越多，從而可用 胚數(shù)量也就越多，但胚胎的可用率和卵巢縱橫徑的大小不存 在明顯關(guān)系，只在卵巢縱橫徑分別在63±3.3mm，52±2.4mm范圍內(nèi)時(shí)胚胎的可用率為76.3%，達(dá)到最大。如表3所示。

表1 發(fā)情前后奶牛的卵巢變化

表2 超排處理卵巢的變化

表3 沖胚日卵巢發(fā)育的情況與沖胚數(shù)的關(guān)系

3 討論

卵巢是雌性動(dòng)物的重要器官，其主要具有分泌激素和排卵的生理發(fā)育作用，奶牛的發(fā)情期中會(huì)出現(xiàn)2個(gè)或是3個(gè)卵泡的發(fā)育波，每一個(gè)發(fā)育波的時(shí)間約為8～10d。在卵泡發(fā)育波時(shí)期內(nèi)，卵巢上會(huì)同時(shí)出現(xiàn)許多小卵泡，之后會(huì)出現(xiàn)優(yōu)勢(shì)卵泡，在優(yōu)勢(shì)卵泡的發(fā)育過(guò)程中，其他卵泡會(huì)被迫退化到初始狀態(tài)。優(yōu)勢(shì)卵泡不僅對(duì)其他卵泡的正常發(fā)育起到阻礙作用，對(duì)以后的卵泡發(fā)育波也會(huì)產(chǎn)生影響。因此，除第一波外，第二、三波中的卵泡均無(wú)法全部發(fā)育排卵，能夠發(fā)育成優(yōu)勢(shì)卵泡的數(shù)量?jī)H占小部分。有統(tǒng)計(jì)顯示，在原始卵泡總數(shù)中，真正可以發(fā)育成熟并正常排卵的只占0.1%～0.2%，任何一個(gè)能夠最終排卵的卵泡均需通過(guò)三個(gè)階段的發(fā)展：（1）征集：在全部生長(zhǎng)卵泡中，只有一部分會(huì)率先進(jìn)入快速發(fā)育的階段；（2）選擇：在這些率先進(jìn)入快速發(fā)育的卵泡中，僅有一部分被選中可以繼續(xù)發(fā)育，進(jìn)而產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)卵泡；（3）優(yōu)勢(shì)化：這些被選中的優(yōu)勢(shì)卵泡中僅有一個(gè)或是幾個(gè)可以迅速發(fā)育最終排卵，其他卵泡則會(huì)被其抑制。

超數(shù)排卵指的是通過(guò)外源性激素促使非優(yōu)勢(shì)卵泡的發(fā)育，從而實(shí)現(xiàn)多個(gè)卵泡發(fā)育，且排出的卵子具有相同的受精能力，也被簡(jiǎn)稱為“超排”。本次研究結(jié)果顯示，卵泡自同期發(fā)情的前1d出現(xiàn)平穩(wěn)增長(zhǎng)，于同期發(fā)情期的第5d時(shí)達(dá)到最大，之后下降，于第6天降到最小。在超數(shù)排卵期時(shí)，卵巢受到外源激素的刺激作用，改變了奶牛機(jī)體中的內(nèi)分泌條件，從而影響了卵巢的形狀。

在胚胎移植的整個(gè)過(guò)程中，卵巢作為外源激素的受體，其發(fā)育程度、質(zhì)地等狀況均對(duì)外源激素的效果發(fā)揮存在影響。黃體的形成能夠有效證明卵巢的排卵情況，對(duì)胚胎的形成數(shù)也可起到?jīng)Q定作用。從表3可以看出，黃體數(shù)、沖胚數(shù)以及可用胚數(shù)在沖胚日和卵巢大小呈現(xiàn)正線性關(guān)系。有研究在奶牛超數(shù)排卵時(shí)期觀察卵巢上的黃體數(shù)量及狀態(tài)來(lái)預(yù)測(cè)超數(shù)排卵情況，發(fā)現(xiàn)該時(shí)期卵巢上黃體體積明顯增大，能占卵巢空間的一半左右，且具有較好的彈性，此時(shí)，可得到較高的沖胚數(shù)與可用胚數(shù)。所以，通過(guò)對(duì)卵巢與黃體變化的研究可以有效的提高胚胎移植的成功率。本研究顯示，B超檢查奶牛同期發(fā)情和超數(shù)排卵期卵巢發(fā)育狀況，可實(shí)現(xiàn)對(duì)超排情況的預(yù)測(cè)。

本研究中共有4例奶牛出現(xiàn)卵巢囊腫，有2例無(wú)胚胎沖，其余2例中，1例奶牛沖出囊胚1枚，而另1例奶牛沖出桑葚胚3枚。卵巢囊腫屬于獸醫(yī)中常見(jiàn)的不孕癥，主要有黃體囊腫與卵泡囊腫兩種，一般情況下通過(guò)直腸檢查與觀察奶牛的臨床表現(xiàn)即可分辨出來(lái)。黃體囊腫是一些奶牛在發(fā)情開(kāi)始后，無(wú)法正常排卵，導(dǎo)致卵泡液聚集并發(fā)生黃體化。若卵巢上存在這類黃體化的卵泡，會(huì)對(duì)奶牛體內(nèi)的正常激素分泌機(jī)制造成影響，使得奶牛長(zhǎng)時(shí)間處于假孕狀態(tài)。與黃體囊腫相比，卵泡囊腫具有較低的治愈率，且其有很高的復(fù)發(fā)率，難以根治。黃體囊腫有很多的發(fā)病原因，這可能是和奶牛的激素分泌不正常，出現(xiàn)多卵泡發(fā)育，導(dǎo)致黃體功能不健全，無(wú)法生成正常的促黃體素水平，使得卵泡交替發(fā)育，進(jìn)而缺乏功能黃體，導(dǎo)致排卵出現(xiàn)異常致使卵泡液囤積，出現(xiàn)卵泡腔異常增大的現(xiàn)象。

從略）

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2016．07.021

雪雅妮（1985～），青海省德令哈市人，大專，助理畜牧師，研究方向?yàn)槠贩N選育，畜禽品種改良技術(shù)，動(dòng)物纖維物理性能的分析工作