CXC類趨化因子受體4基因多態(tài)性對新輔助化療宮頸癌患者療效及預(yù)后的影響

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(1.深圳市第七人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518081；2.中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院婦科腫瘤)

·婦產(chǎn)科疾病專題·

田春芳 主任醫(yī)師

田春芳，深圳市第七人民醫(yī)院產(chǎn)科主任，主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。近年來任深圳市婦產(chǎn)科專業(yè)委員會委員，感染學(xué)組副主任委員，圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會委員，婦產(chǎn)科中西醫(yī)結(jié)合專業(yè)委員會委員，深圳市抗癌學(xué)會常務(wù)理事，是《中華現(xiàn)代婦產(chǎn)科學(xué)雜志》常務(wù)編委、《中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志》編委。汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生導(dǎo)師。近年來開展了新技術(shù)、新項(xiàng)目40余項(xiàng)，主編著作2本，發(fā)表論文40篇。獲得國家發(fā)明專利16項(xiàng)。

論文點(diǎn)評：婦科腫瘤與妊娠期糖尿病是嚴(yán)重危害婦女的健康主要疾病。本期溫展翀等發(fā)表的關(guān)于CXCR4基因多態(tài)性與宮頸癌的進(jìn)展和化療以及患者生存預(yù)后的關(guān)系，為建立宮頸癌的預(yù)防和治療大數(shù)據(jù)提供了有價(jià)值資料；何海燕關(guān)于不同類型紫杉醇治療復(fù)發(fā)性卵巢癌的臨床效果，為尋找治療卵巢癌高效低毒的納米藥物進(jìn)行了探索；劉新玉關(guān)于經(jīng)陰道三維超聲和宮腔鏡兩者在診斷子宮內(nèi)膜良惡性病變的價(jià)值，以及劉華珍等關(guān)于妊娠期糖尿病產(chǎn)婦胎盤脂聯(lián)素與血清脂聯(lián)素水平、孕婦胰島素抵抗和胎兒生長發(fā)育的相關(guān)性，這些研究為婦產(chǎn)科腫瘤和糖尿病的診斷和治療提供了有價(jià)值的參考資料，值得一讀。

CXC類趨化因子受體4基因多態(tài)性對新輔助化療宮頸癌患者療效及預(yù)后的影響

溫展翀1*,陳勍2,黃妙玲2,巴音吉力2,徐干如1，田春芳1

(1.深圳市第七人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518081；2.中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院婦科腫瘤)

目的探討CXCR4基因多態(tài)性對新輔助化療宮頸癌患者化療療效的影響以及與新輔助化療加廣泛子宮切除的宮頸癌患者的預(yù)后關(guān)系。方法選取婦科腫瘤?？剖罩蔚?2例IB2-IIB期宮頸癌患者；按照試劑盒說明書的指導(dǎo)蠟塊組織提取組織DNA；PCR擴(kuò)增基因組DNA片段；直接測序法檢測DNA片段序列，測序結(jié)果采用圖像分析軟件“Chromas2”進(jìn)行終點(diǎn)分析。結(jié)果擴(kuò)增PCR產(chǎn)物為236 bp；62例樣本中，CC基因型25例(40.3%)，CT基因型37例(59.7%)，TT基因型0例(0.0%)。T等位基因頻率為2.98%；CXCR4基因Ile138Ile位點(diǎn)沒有發(fā)現(xiàn)突變純合子；位點(diǎn)Ile138Ile在病人中的基因分布頻率與化療反應(yīng)無顯著的相關(guān)性(P=0.771)；Ile138Ile位點(diǎn)CC型和CT型分布情況在宮頸浸潤深度兩組中(P=0.025)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況兩組中(P=0.031)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在化療效果顯示，患者年齡、組織類型、FIGO分期、腫瘤分化程度、腫瘤大小、脈管浸潤、貧血情況各組中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)；CXCR4基因ATT/ATC (Ile138Ile)位點(diǎn)CC型和CT型兩組患者，三年生存率分別為86.4%、70.6%。Log-rank檢驗(yàn)結(jié)果顯示這兩個(gè)年齡組患者的無病生存率和總生存率差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論

CXCR4基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)Ile138Ile對宮頸癌的進(jìn)展有影響； CXCR4基因單核苷酸多態(tài)性與新輔助化療宮頸癌患者的生存預(yù)后可能無關(guān)。

趨化因子受體4； 新輔助化療； 宮頸癌； 生存預(yù)后； 化療反應(yīng)

宮頸癌是女性生殖器官三大惡性腫瘤之一，并且是導(dǎo)致女性腫瘤相關(guān)的死亡的第二因素。目前宮頸癌的治療方法依據(jù)國際婦癌聯(lián)盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO)分期的不同而有不同的治療策略，早期宮頸癌(定義為FIGO 分期的ⅠB1 期和腫瘤<4 cm者)的標(biāo)準(zhǔn)治療方法為根治性手術(shù)切除[1]。

局部晚期宮頸癌(locally advanced cervical cancer,LACC)，是指具有不良預(yù)后因素的高危宮頸癌[2]，狹義的局部晚期宮頸癌包括 FIGO臨床分期標(biāo)準(zhǔn)的 IB2-IIB期。自從上世紀(jì)八十年代開始，新輔助化療(neoadjuvant chemotherapy，NACT)開始逐漸應(yīng)用于LACC。大量研究表明NACT對局部晚期宮頸癌的治療有積極意義，近期療效肯定[3]。但化療不敏感的問題仍然尚待解決，部分患者對化療藥物的不敏感，如行NACT治療將會延誤患者進(jìn)行其它有效的治療[4]。所以，建立有效的方法來評估患者對化療的反應(yīng)以達(dá)到個(gè)體化的治療十分必要。

近年發(fā)現(xiàn)趨化因子受體4(Chemokine receptor 4,CXCR4)與惡性腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的多個(gè)環(huán)節(jié)有關(guān)。目前關(guān)于CXCR4多態(tài)性與腫瘤發(fā)生發(fā)展及腫瘤預(yù)后的研究較少，而在宮頸癌方面，有研究認(rèn)為[5]，分期越晚的宮頸癌CXCR4的表達(dá)水平越高，且CXCR4的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，但尚未見CXCR4基因單核苷酸基因多態(tài)性在宮頸癌方面的研究報(bào)道，也未見到有關(guān)CXCR4基因突變與新輔助化療宮頸癌患者的療效及遠(yuǎn)期預(yù)后相關(guān)性的報(bào)道。

1 資料與方法

1.1病例資料收集篩查2006年2月至2012年2月期間在中山大學(xué)附屬孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院住院的宮頸癌病例，納入標(biāo)準(zhǔn)如下：1)治療前病理活檢確診為宮頸癌，F(xiàn)IGO臨床分期為ⅠB2-ⅡB期；2)手術(shù)前行2～3個(gè)療程的以鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療，化療后行根治性手術(shù)治療；3)詳細(xì)的臨床病理資料；4)足夠的蠟塊標(biāo)本。排除標(biāo)準(zhǔn)為：1)入院前已接受過治療的患者；2)曾患過其他部位惡性腫瘤或同時(shí)有兩個(gè)部位的惡性腫瘤；3)資料不足以評價(jià)患者的療效或者生存預(yù)后；4)組織量少而不足以分析患者基因型改變。按上述標(biāo)準(zhǔn)，共納入62例，中位數(shù)年齡45歲(25～65歲)。按組織類型分類，鱗狀細(xì)胞癌52例，腺癌10例。其中，IB2期23例，ⅡA期24例，ⅡB15例。出院后隨訪計(jì)劃：術(shù)后2年內(nèi)每3個(gè)月隨訪一次，接下來的3年內(nèi)每半年隨訪一次，5年后每年隨訪一次。隨訪內(nèi)容包括盆腔檢查、陰道細(xì)胞學(xué)檢查、腫瘤標(biāo)志物檢查及影像學(xué)檢查。未返院隨訪的病人，每半年電話隨訪一次，記錄患者一般身體情況，外院隨訪情況，有無復(fù)發(fā)等。

1.2患者的治療方案及評價(jià)上述病人治療前由婦科腫瘤專家行盆腔檢查，影像學(xué)檢查包括盆腔MRI或CT或婦科B超。新輔助化療方案為順鉑60 mg/m2，紫杉醇60 mg/m2或135 mg/m2，均采用靜脈途徑化療1～2個(gè)療程，每個(gè)療程間隔時(shí)間為10天或21天，每療程結(jié)束后7～10天評估療效，評估方法包括體格檢查和影像學(xué)檢查。有效者繼續(xù)行第2個(gè)療程，效果不明顯甚至進(jìn)展者則在第1個(gè)療程結(jié)束后行廣泛全子宮切除加盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)，部分患者行腹主動脈旁淋巴結(jié)切除或活檢，術(shù)后根據(jù)病理采取輔助同期放化療?；煰熜О凑展腆w腫瘤療效評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST guideline 1.1版)[6]：完全緩解(CR)：腫瘤完全消失；部分緩解( PR)：腫瘤體積縮小>30%；疾病穩(wěn)定或無變化(SD)：腫瘤體積縮小<30% 或增大<20%；進(jìn)展(PD)：腫瘤體積增大>20%；統(tǒng)計(jì)分析以CR+PR為有效。根據(jù)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，其中CR6例，PR35例，SD20例，PD1例。

1.3術(shù)后病理資料分析62例患者術(shù)后病理資料顯示，腫瘤高中分化34例，低分化28例；腫瘤直徑以4 cm為界值，直徑<4 cm 有18例，≥4 cm有44例；腫瘤浸潤深度≤1/2有22例，>1/2有40例。脈管浸潤陽性42例，陰性20例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移37例。見表 1。

表12CRP+1444C/TPCR反應(yīng)體系

試劑用量NucleaseFreewater7uLPrimer(10ummol/L)2uLPrimer(10ummol/L)2uLPremixTaqPolymerase12.5uLTemplateDNA1.5uLTotalVolume25uL

1.4實(shí)驗(yàn)方法及步驟

1.4.1 蠟塊DNA提取 從病理科申請患者的蠟塊組織，按照 QIAamp DNA FFPE Tissue Kit 試劑盒(Qiagen Inc.,Hilden,Germany)說明書的指導(dǎo)提取組織 DNA。

1.4.2 PCR引物設(shè)計(jì) 參照文獻(xiàn)[6]設(shè)計(jì)引物，引物序列為5′-TCATCTACACAgTCAACCTCTACAgC-3′(前向)和 5′-CAAAgATgAAgTCgggAATAgTCAgC-3′(逆向)。擴(kuò)增出的CXCR4基因目標(biāo)序列為236 bp。

1.4.3 PCR擴(kuò)增蠟塊基因組DNA 采用Takara公司的Premix Tag酶，反應(yīng)體系依次加入下列底物：

反應(yīng)參數(shù)為： 先94 ℃預(yù)變性7 min， 然后94 ℃變性1 min， 55 ℃復(fù)性30 s， 72 ℃延伸1 min，共35個(gè)循環(huán)，72 ℃延伸7 min。PCR產(chǎn)物 4 ℃短時(shí)保存，-20 ℃長期保存。

1.4.4 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物 稱取瓊脂糖6g加入0.5×TAE 30 mL混勻，微波爐加熱溶解直至瓊脂糖溶解透明，待膠溫度下降至約 60℃左右將其倒于制膠板中，插入梳子待其凝固即用。取PCR產(chǎn)物5 uL，加10×Loading Buffer 0.5 uL 和 SYBR safe DNA Gel Stain 工作液0.5 uL，點(diǎn)樣于2%的瓊脂糖凝膠的加樣孔中，100V電壓，常溫電泳30分鐘。紫外光透射儀加filter濾光器下觀察圖像，使用凝膠成像系統(tǒng)成像。

1.4.5 PCR產(chǎn)物序列測定 經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR成功的產(chǎn)物交廣州艾基生物技術(shù)有限公司測序服務(wù)部(ABI 3730xl激光熒光測序儀)測序。所得數(shù)據(jù)以圖像分析軟件“Chromas2”進(jìn)行終點(diǎn)分析,通過檢測不同等位基因所標(biāo)示的熒光強(qiáng)度,判斷各待測樣本基因分型為野生純合子、突變純合子還是雜合子。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法①本文所有統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均采用SPSS20．0統(tǒng)計(jì)軟件分析。②單核苷酸基因多態(tài)性與臨床病理參數(shù)關(guān)系的分析采用Pearson χ2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)法。③無病生存時(shí)間(DFS)為從明確診斷到復(fù)發(fā)、死亡或者最后一次隨訪的時(shí)間。總生存時(shí)間(OS)為從明確診斷到無論任何原因死亡的時(shí)間。生存結(jié)局用 Kaplan-Meier生存曲線估計(jì)，生存曲線的差異分析采用 Log-rank檢驗(yàn)。④多因素生存分析采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型。以上所有的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均以P≤0.05 為界值。

2 結(jié) 果

2.1入組情況在隨訪期間，4例失訪。在對有隨訪資料的病例樣本進(jìn)行DNA提取實(shí)驗(yàn)后，其中3例樣本因組織量不足提取失敗。

2.2 PCR擴(kuò)增結(jié)果擴(kuò)增PCR產(chǎn)物為236 bp，序列為：TCATCTACACAGTCAACCTCTACAGCCAAAGATGAAGTCGGGAATAGTCAGCTCATCTACACAGTCAACCTCTACAGCAGTGTCCTCATCCTGGCCTTCATCAGTCTGGACCGCTACCTGGCCATCGTCCACGCCACCAACAGTCAGAGGCCAAGGAAGCTGTTGGCTGAAAAGGTGGTCTATGTTGGCGTCTGGATCCCTGCCCTCCTGCTGACTATTCCCGACTTCATCTTTG。

經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后在紫外線成像系統(tǒng)得到圖片如圖1。

圖1 CXCR4基因的PCR產(chǎn)物的電泳圖 M:為Mark,1～6：為目的基因

2.3基因測序結(jié)果CC基因型25例(40.3%)，CT基因型37例(59.7%)，TT基因型0例。T等位基因頻率為2.98%。圖像分析軟件“Chromas2”終點(diǎn)分析結(jié)果如圖2。

圖2 CXCR4基因ATT/ATC (Ile138Ile)位點(diǎn)測序圖 其中圖C/C為野生型純合子；圖C/T為雜合子，顯示出 T 和 C堿基兩種峰

2.4基因分布頻率與患者化療效果、臨床病理特征的關(guān)系62例宮頸癌患者CXCR4基因 ATT/ATC (Ile138Ile)位點(diǎn)分布情況與患者化療效果、臨床病理特征的關(guān)系結(jié)果見表2。

從表2可知，Ile138Ile位點(diǎn)CC型和CT型分布情況在宮頸浸潤深度兩組中(P=0.025)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況兩組中(P=0.031)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而在化療效果、患者年齡、組織類型、FIGO分期、腫瘤分化程度、腫瘤大小、脈管浸潤、貧血情況各組中差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

2.5生存預(yù)后分析在隨訪期間，62例宮頸癌患者中有15例出現(xiàn)宮頸癌復(fù)發(fā)，15例復(fù)發(fā)中有12例死亡?？傮w無病生存率為75.8%(47/62)，總生存率80.6%(50/62)。62例患者三年無病生存率76.8%(43/56)，三年總生存率為73.2%(41/56)?？傠S訪時(shí)間介于7～73個(gè)月；死亡者生存時(shí)間介于7～31個(gè)月，死亡者中位生存時(shí)間為18個(gè)月。結(jié)合生存曲線(圖3)可以看出，患者在最初兩年內(nèi)生存曲線下降最快，隨訪期內(nèi)復(fù)發(fā)的患者均發(fā)生在術(shù)后兩年內(nèi)，也就是說患者在術(shù)后兩年內(nèi)復(fù)發(fā)、死亡率較高。

表262例宮頸癌患者CXCR4基因ATT/ATC(Ile138Ile)位點(diǎn)分布情況與患者化療效果、臨床病理特征的關(guān)系

例數(shù)Ile138Ile位點(diǎn)多態(tài)性(%)CCCTP中位年齡0.960 ≤45歲321319 >45歲301218病理類型0.281 鱗癌522329 其它類型1028FIGO分期0.916 IB2231013 IIA24915 IIB1569腫瘤分化0.712 高中分化341321 低分化281216腫瘤大小0.32 <4cm1899 ≥4cm441628肌層浸潤0.025 ≤1/222139 >1/2401228脈管浸潤0.971 Yes421725 No20812淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0.031 Yes25619 No371918貧血0.719 有(Hb<110g/L)24915 無(Hb≥110g/L)381622化療效果0.664* CR624 PR351421 SD20812 PD110化療效果(合并)0.771 CR+PR411625 SD+PD21912

其中*：結(jié)果來自Kruskal-Wallis檢驗(yàn)

圖3 62例宮頸癌患者的生存曲線

用Kaplan-Meier單因素生存分析計(jì)算宮頸癌患者CXCR4基因ATT/ATC (Ile138Ile)位點(diǎn)基因型分布情況、化療效果、臨床病理參數(shù)的各個(gè)分組的生存率并繪制成圖，并用log-rank檢驗(yàn)分別分析患者無病生存率、總生存率差別有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表3)。

由上可知，Kaplan-Meier單因素生存分析和log-rank檢驗(yàn)表明：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況是影響宮頸癌患者生存的預(yù)后相關(guān)因素(P=0.049)。

綜上，單因素生存分析表明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響患者生存預(yù)后的因素(P=0.049)見表3、圖4。CXCR4基因ATT/ATC位點(diǎn)基因型分布頻率與患者生存預(yù)后無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)，見表1。在多因素的分析中，未能得出有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的結(jié)果。

3 討 論

3.1 CXCR4基因單核苷酸多態(tài)性對腫瘤的影響近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)趨化因子及其受體在惡性腫瘤的增殖轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，一方面，趨化因子可抑制腫瘤細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解，從而達(dá)到促進(jìn)腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的效應(yīng)[7,8]；另一方面，趨化因子及其受體共同作用可趨化腫瘤細(xì)胞定向遷移，協(xié)助腫瘤細(xì)胞粘附至內(nèi)皮細(xì)胞、穿透血管內(nèi)皮，并在促進(jìn)血管、淋巴管形成和腫瘤逃逸等方面均起著幫助作用[9-10]。自2001年Muller,等[11]首先報(bào)道人乳腺癌細(xì)胞系和組織中高表達(dá)CXCR4以來，目前已發(fā)現(xiàn)CXCR4至少在23種不同的惡性腫瘤中表達(dá)，并與這些疾病的區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。

在基因多態(tài)性(SNP)方面，Lee，等[12]研究顯示，攜帶CXCR4突變基因T會導(dǎo)致非小細(xì)胞肺癌的易感，攜帶TT基因型的非小細(xì)胞肺癌病人與其它基因型病人相比分期較晚，且生存預(yù)后較差。Teng,等[13]研究表明，口腔癌病人攜帶CXCR4突變基因T分別與分期較晚和淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)。然而，有其它研究[12,14]未能得出CXCR4多態(tài)性與腫瘤預(yù)后相關(guān)的結(jié)論。

表362例宮頸癌患者的單因素(log-rank)生存分析

UnivariateSurvivalAnalysisDFSat3year(%)P+OSat3year(%)P++中位年齡0.1080.176 ≤45歲82.286.2 >45歲63.066.7病理類型0.6100.982 鱗癌74.578.7 其它類型66.766.7FIGO分期0.5000.366 IB270.075.0 IIA68.268.2 IIB85.792.9腫瘤分化0.7380.810 高中分化71.077.4 低分化76.076.0腫瘤大小0.7120.304 <4cm75.087.5 ≥4cm72.572.5肌層浸潤0.3720.141 ≤1/278.989.5 >1/270.370.3脈管浸潤0.5690.205 Yes71.173.7 No77.883.3淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移0.0850.049 Yes60.965.2 No81.884.8貧血0.8530.370 有(Hb<110g/L)75.078.1 無(Hb≥110g/L)71.975.0化療效果0.9340.593 CR83.383.3 PR71.978.1 SD72.272.2 PD100100.0化療效果(合并)0.9720.495 CR+PR78.973.7 SD+PD72.272.2 Ile138Ile位點(diǎn)多態(tài)性0.4780.232 CC77.386.4 CT70.670.6

P+:P來自無病生存率log-rank 檢驗(yàn)；P++:P來自總生存率 log-rank 檢驗(yàn)

圖4 62例宮頸癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的生存曲線

3.2 CXCR4基因單核苷酸多態(tài)性與宮頸癌預(yù)后的關(guān)系研究顯示[14-15]，CXCR4在宮頸癌組織中的表達(dá)明顯高于在正常宮頸組織中的表達(dá)，分期越晚的宮頸癌CXCR4蛋白的表達(dá)水平越高，提示CXCR4在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。另外，CXCR4的表達(dá)還與宮頸癌細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。Yang,等[16]研究發(fā)現(xiàn)高表達(dá)CXCR4的宮頸腺癌患者比弱表達(dá)或不表達(dá)CXCR4的宮頸腺癌患者更容易發(fā)生盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，故CXCR4還可能提示宮頸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的潛能。Kodaman,等[17]也得出類似的研究結(jié)論，并認(rèn)為CXCR4是盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立影響因素。本研究在生存預(yù)后分析中發(fā)現(xiàn)，根據(jù)單因素生存分析表明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是影響患者生存預(yù)后的因素(P=0.049)，提示CXCR4可能在宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用。

3.3 CXCR4基因單核苷酸多態(tài)性與化療反應(yīng)的關(guān)系腫瘤組織的耐藥性是腫瘤化療的主要難題之一，其中一個(gè)重要機(jī)制就是腫瘤細(xì)胞對低氧狀態(tài)的耐受[18-19]。研究顯示：腫瘤內(nèi)缺氧可通過CXCR4增加腫瘤細(xì)胞的侵襲、遷移和附著力。在女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中，CXCR4對化療反應(yīng)的影響尚不明了。在CXCR4蛋白表達(dá)的研究中，Nakai,et al[20]發(fā)現(xiàn)高表達(dá)CXCR4蛋白的病例有更好的化療效果。在本實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)CXCR4基因的多態(tài)性位點(diǎn)的分布頻率與行以鉑類為基礎(chǔ)的新輔助化療患者的化療反應(yīng)之間不存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)系。

盡管本研究盡力做到實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)有的完整性，但是本文仍有幾點(diǎn)不足之處，首先，由于本實(shí)驗(yàn)為回顧性研究，所有的臨床數(shù)據(jù)均為回顧性資料，盡管近最大努力保證了臨床數(shù)據(jù)的完整性。但是難免存在病例失訪及部分?jǐn)?shù)據(jù)無法收集而產(chǎn)生的數(shù)據(jù)不全。第二，樣本量較少，檢驗(yàn)效能不高，得出假陰性的可能性較大，故實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解讀應(yīng)謹(jǐn)慎。

據(jù)文獻(xiàn)回顧可知，本研究第一次在行新輔助化療的宮頸癌患者中研究了CXCR4基因多態(tài)性對患者生存預(yù)后影響；第一次在宮頸癌病例中探討了CXCR4基因多態(tài)性與新輔助化療的療效關(guān)系；全面地探討了CXCR4基因多態(tài)性與局部晚期宮頸癌患者的無病生存率、總生存率和臨床參數(shù)的關(guān)系，使本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果結(jié)論更加具有說服力。

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CXCR-4genePolymorphismandtheResponseinCervicalCancerPatientsTreatedwithNeoadjuvantChemotherapyMajor

WEN Zhanchong,CHEN Qing,HUANG Miaoling,et al

(DepartmentofObstetricsandGynecology，theSeventhPeople’sHospitalofShenzhenCity,Shenzhen,Guangdong518081,China)

ObjectiveTo explore the influence of CXCR-4 gene polymorphism on the chemotherapeutic response and prognosis of cervical cancer patients who

NACT followed radical surgery.Methods62 patients were enrolled in this study；Samples were recruited from the formalin-fixed,paraffin-embedded surgical specimens.DNA was extracted using the QIAamp DNA FFPE Tissue Kit；PCR of paraffin block genomic DNA；Direct sequence of DNA:All PCR products were further purified for commercial sequencing.ResultsThe length of the amplicon is 236bp； The CXCR4 genotype distributions were 25 CC (40.3%),37CT (59.7%) and 0 TT (0.0%)；Most clinicopathologic results failed to show a significant relationship with polymorphism except tumor grade.；The association CXCR4 gene polymorphism and response to chemotherapy:A statistically significant association was not found and favorable treatment with platinum based chemotherapy；The influence of CXCR4 gene polymorphism on survival:CXCR4 polymorphisms were not related to DFS or OS(P>0.05).ConclusionThere are associations with CXCR4 polymorphisms and the prognosis of cervical cancer patients;.CXCR4 polymorphism has no significant association with the chemotherapeutic response of cervical cancer patients who received with platinum based neoadjuvant chemotherapy.

CXCR-4 gene; Neoadjuvant chemotherapy; Cervical cancer; Prognosis; Response to chemotherapy

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.001

專題欄目——主持人田春芳主任

2016-04-18；

2016-05-15

*通訊作者，E-mail:13823647291@139.com.

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