乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶1在前列腺癌中的表達(dá)及臨床意義

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(1.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院泌尿外科，湖南 衡陽 421001；2.南華大學(xué)附屬第三醫(yī)院泌尿外科)

·臨床醫(yī)學(xué)·

乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶1在前列腺癌中的表達(dá)及臨床意義

吳磊1，羅志剛1*，徐兵2

(1.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院泌尿外科，湖南 衡陽 421001；2.南華大學(xué)附屬第三醫(yī)院泌尿外科)

目的探討乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶1(ACAT1)在前列腺癌中的表達(dá)情況及臨床意義。方法采用免疫組化染色，檢測(cè)63例前列腺癌組織及癌旁正常組織中ACAT1的表達(dá)情況。結(jié)果ACAT1在前列腺癌組織及正常前列腺組織中的表達(dá)陽性率分別81.0%和20.6%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且與前列腺癌患者年齡、前列腺特異性抗原(PSA)水平無關(guān)(P>0.05)，但與Gleason score(GS)及腫瘤病理分期有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論ACAT1的表達(dá)在前列腺癌組織中顯著高于癌旁正常組織，與前列腺癌GS評(píng)分和腫瘤病理分期有關(guān)。ACAT1可能是早期前列腺癌的標(biāo)志。

ACAT1； 前列腺癌； 標(biāo)志物

前列腺癌是北美男性死亡率居第二位的癌癥，西方國家發(fā)病率高，但近年來亞洲國家患者明顯增多，發(fā)病率迅速上升[1]。雖然大多數(shù)前列腺癌進(jìn)展緩慢，但少部分患者也會(huì)發(fā)展為侵襲性前列腺癌而導(dǎo)致死亡[2]。目前的檢測(cè)方法包括直腸指診和血清前列腺特異抗原(PSA)檢測(cè)。然而PSA缺乏特異性，因此無法準(zhǔn)確區(qū)分惰性和侵襲性前列腺癌。乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶1 (acetyl-coenzyme A acetyltransferase 1，ACAT1)是一種膽固醇催化酶，在細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇酯化為膽固醇酯的過程中發(fā)揮關(guān)鍵酶的作用，有研究表明，生酮途徑的關(guān)鍵酶對(duì)腫瘤的生長有重要作用，ACAT1在侵襲性前列腺癌中升高，然而其在前列腺癌病理生理學(xué)的作用機(jī)制尚未闡明。本文旨在應(yīng)用免疫組化技術(shù)探討前列腺癌中ACAT1的表達(dá)與前列腺癌的相關(guān)性，驗(yàn)證ACAT1作為前列腺癌進(jìn)展標(biāo)志物的可行性。

1 資料與方法

1.1臨床資料回顧性分析2013年4月～2015年6月來本院收治的診斷為局限性前列腺癌并行前列腺癌根治術(shù)的63例患者的臨床資料?；颊吣挲g60～70歲，平均64±1.3 歲，組織學(xué)類型全為腺癌；行DRE、CT、MRI、骨掃描及PSA等檢查后，依據(jù)2010版的AJCC的TNM分期[3]確定腫瘤的病理分期。

1.2免疫組化檢測(cè)手術(shù)切除腫瘤標(biāo)本及距腫瘤邊緣2 cm以上(鏡下未見癌)的癌旁組織，采用4%多聚甲醛固定，用石蠟包埋制成蠟塊，行免疫組化。將標(biāo)本切片，置于載玻片脫蠟、水化，加入ACAT1多克隆抗體(1∶500，Sigma)孵育過夜。PBS沖洗10 min后，試劑盒內(nèi)滴加二抗在室溫下孵育30 min,PBS再次沖洗10 min后，采用DAB使底物顯色，蘇木精作為復(fù)染劑，脫水，封片。

1.3結(jié)果判定根據(jù)雙盲原則進(jìn)行計(jì)數(shù)，陽性標(biāo)準(zhǔn):胞質(zhì)細(xì)胞漿及細(xì)胞膜中出現(xiàn)棕黃色或棕色顆粒。隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野進(jìn)行觀察，每個(gè)視野對(duì)100個(gè)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，按各個(gè)視野中陽性細(xì)胞數(shù)的比例進(jìn)行評(píng)分：≤5%計(jì)0分，5%～25%計(jì)1分，25%～50%計(jì)2分，>50%計(jì)3分；細(xì)胞染色強(qiáng)度按無、弱(淺黃色)、中等(棕黃色)和強(qiáng)(黃褐色)染色分別計(jì)0、1、2和3分。ACAT1表達(dá)以細(xì)胞陽性百分率及細(xì)胞染色強(qiáng)度得分之和進(jìn)行判定。相加后得到最終評(píng)分。0分、1～2分、3～4分和5～6分分別列為陰性(-)、弱陽性(+)、中度陽性(++)和強(qiáng)陽性(+++)。

2 結(jié) 果

2.1 ACAT1在不同組織中的陽性表達(dá)ACAT1在前列腺癌組織的陽性表達(dá)率為81.0%(51/63)，癌旁正常組織的陽性表達(dá)率為20.6% (13/63)，兩組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=45.85，P<0.01)。癌組織及癌旁組織中ACAT1表達(dá)見表1和圖1。

表1ACAT1在前列腺癌組織和正常前列腺組織的表達(dá)

組別nACAT1的表達(dá)-++++++χ2P前列腺癌組織631214191845.85<0.01正常前列腺組織6350544

2.2 ACAT1與前列腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系如表2所示，ACAT1表達(dá)與前列腺癌患者年齡以及外周血PSA水平無關(guān)(P>0.05)；與不同的病理分級(jí)和腫瘤病理分期存在相關(guān)性(P<0.05，表2)。

圖1 ACAT1在前列腺癌組織和正常前列腺組織的表達(dá)圖(400×)

Gleason評(píng)分顯示，63例前列腺癌組織不同病理分級(jí)中，ACAT1的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，隨著病理分化程度的降低，ACAT1表達(dá)增高。在不同的病理分期中，pT2中ACAT1陽性率明顯低于pT3(65.0% vs 95.5%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表2ACAT1與前列腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

因素例數(shù)ACAT1的表達(dá)-+～+++χ2P年齡(歲) ≤65234190.06>0.05 >6540832PSA濃度(ng/mL) <10203170.02>0.05 ≥1043736Gleason評(píng)分 2～49189.87<0.01 5～615312 7～10392217病理分期 pT24114276.92<0.01 pT322121

3 討 論

ACAT是位于細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的一種膜蛋白，是膽固醇和長鏈脂酰CoA合成的限速酶，它也能影響脂蛋白組裝及飲食膽固醇吸收。ACAT1作為其亞型，是酮體合成的限速酶，在腫瘤研究中鮮有報(bào)道。近年來，有國外學(xué)者使用體外定量蛋白組學(xué)方法，發(fā)現(xiàn)在侵襲性前列腺癌中，ACAT濃度顯著升高[4]。小樣本臨床隊(duì)列研究發(fā)現(xiàn)ACAT1作為這個(gè)通路的限速酶，與低分化(GS≥8)和雄激素去勢(shì)抵抗型前列腺癌密切相關(guān)。

目前國內(nèi)外尚缺乏ACAT1與前列腺癌病人臨床病理關(guān)系的詳細(xì)資料，本文采用免疫組化技術(shù)對(duì)前列腺癌組織及癌旁正常前列腺組織中的ACAT1表達(dá)進(jìn)行分析，對(duì)其能否作為前列腺癌進(jìn)展的潛在標(biāo)志物進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果顯示相比正常前列腺組織，ACAT1顯著高表達(dá)于前列腺癌組織中。這一研究與ACAT1 在乳腺癌組織中的表達(dá)水平明顯高于其正常組織的結(jié)果一致[5-6]。臨床因素分析顯示，ACAT1的表達(dá)水平與Gleason score 分級(jí)和腫瘤病理分期有關(guān)，而與前列腺癌患者年齡、外周血PSA 水平無關(guān)。相比中/高分化腫瘤，ACAT1在低分化(GS≥7)前列腺癌中表達(dá)升高。同樣，與器官局限性pT2腫瘤比，ACAT1在晚期pT3腫瘤中表達(dá)明顯升高，而這些通常與不良預(yù)后是聯(lián)系在一起的[7]。但是，ACAT1在前列腺癌中的具體作用及作用機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。在后續(xù)的研究中，本文作者將進(jìn)一步驗(yàn)證ACAT1的功能，揭示ACAT1在前列腺癌中的作用及其作用機(jī)制。

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ClinicalSignificanceofAcetyl-CoAAcetyltransferase1inProstateCancer

WU Lei,LUO Zhigang,XU Bing

(Dept.UrinarySurgery,theSecondHospital,UniversityofSouthChina，Hengyang,Hunan421001，China)

ObjectiveTo investigate the expression of ACAT1 in prostate cancer tissue and its clinical significance．

MethodsImmunohistochemistry was used to detect ACAT1 expression in 63 cases of prostate cancer and normal tissues.

ResultsACAT1 expressed in prostate cancer tissue and normal prostate tissues were 81.0%,20.6%,respectively,the difference was statistically significant (P<0.05).The expression of ACAT1 was not correlated with age and PSA (P>0.05)，but it was correlated with Gleason score and pathological stage (P<0.05).ConclusionExpression of ACAT1 elevated significantly in prostate cancer tissues than that in normal tissues,and it was significantly correlated with Gleason score and pathological stage.ACAT1 expression could serve as an earlier potential marker of prostate cancer.

ACAT1；prostate cancer；marker

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.014

2016-01-28；

2016-04-20

衡陽市科學(xué)技術(shù)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目基金資助項(xiàng)目(ACAT1作為前列腺癌進(jìn)展中的診斷及預(yù)后因子的前瞻性研究，編號(hào)：2014KJ51).

*通訊作者，E-mail:luo6398@sina.com.

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