逍遙散治療首發(fā)抑郁癥的療效與5-羥色胺2A受體基因多態(tài)性的關聯(lián)研究

陳健華 葛鑫宇 黃俊東 伍遠菲 朱志敏

廣州市腦科醫(yī)院中醫(yī)科（廣州 510370）

逍遙散治療首發(fā)抑郁癥的療效與5-羥色胺2A受體基因多態(tài)性的關聯(lián)研究

陳健華 葛鑫宇 黃俊東 伍遠菲 朱志敏

廣州市腦科醫(yī)院中醫(yī)科（廣州 510370）

目的 探討逍遙散治療首發(fā)抑郁癥的療效與5-HT2A受體基因多態(tài)性的關聯(lián)。方法 采用病例對照研究方法，以120例首發(fā)抑郁癥患者（研究組）和120例正常人（對照組）為研究對象，研究組予逍遙散治療，療程8周。于治療前后采用漢密頓抑郁量表評定。采用高溫連接酶檢測反應法（LDR）檢測5-HT2A受體基因，分析其與抗抑郁藥物療效的關系。結果 5-HT2A受體基因（T102C）T/C基因型、C/C基因型頻率及等位基因頻率與對照組相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。不同基因型的療效無差異（P＞0.05）。結論 5-HT2A受體基因（T102C）多態(tài)性與逍遙散治療抑郁癥的療效無關聯(lián)。

5-HT2A受體 抑郁癥 逍遙散

抑郁癥具有高發(fā)病、高復發(fā)、高致殘和高自殺率等特點，抑郁癥的生物學基礎是中樞神經(jīng)系統(tǒng)突觸間隙單胺類神經(jīng)遞質水平或功能下降，這是抑郁癥研究中最經(jīng)典的假說。中醫(yī)認為抑郁癥多為情志不舒，氣機郁滯所致，故應以疏肝理氣，調節(jié)情志予以辨證施治。5-羥色胺2A（5-HT2A）受體基因多態(tài)性與抑郁癥發(fā)病及抗抑郁治療的關系是目前研究熱點之一，但均是針對西藥的研究［1-5］，國內(nèi)、外未見關于中藥與基因組學的研究。逍遙散是治療抑郁癥常見中藥治療方劑。本研究就逍遙散治療抑郁癥療效及與5-HT2A相關性進行研究，為抑郁癥的研究提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 患者主要來源于本院2013年10月—2014年10月門診及住院患者。所有受試者均被提前告知研究目的。并簽署知情同意書，該研究獲得本院倫理委員會的批準。均為漢族人群。

研究組:入組標準:①符合美國DSM-1V中抑郁癥的診斷標準，首次發(fā)作，既往沒有躁狂發(fā)作、混合發(fā)作或輕躁狂發(fā)作；②17項漢密爾頓抑郁量表（HAMD）評分≥18分；③首次發(fā)病年齡≥18歲；④入組前兩周無使用抗抑郁及抗精神病藥物。排除標準:①合并腦器質性及嚴重軀體疾病、精神障礙（如精神發(fā)育遲滯、物質依賴等）；②妊娠、哺乳期婦女。終止試驗標準:①不能堅持治療者；②有嚴重的自殺傾向者。對照組:120例，來源于本院職工、進修醫(yī)護人員及實習學生，與研究組無血緣關系。

1.2 方法

1.2.1 一般資料收集 采用一般情況問卷收集所有受試者的人口學資料和臨床資料。

1.2.2 DNA提取 入組當天抽取5mL靜脈血。采用EDTA抗凝，于-20℃冰箱保存。采用DNA提取試劑盒經(jīng)柱分離法提取DNA。

1.2.3 基因多態(tài)性檢測 采用PCR擴增5-HT2A受體基因片段，T102C多態(tài)性引物:上游為5′-TCTGCTACAAGTTCTGGCTT-3′，下游為5′-CTGCAGCTTTTTCTCTAGGG-3′。反應體積為50μl。其中兩個引物各為0.2μmol，1μ Taq酶和1 ×緩沖液，0.2mmol/L dNTPs，100 ng基因組DNA，PCR操作程序依次為94℃ 2min，（94℃ 60s，64℃ 60s，72℃30s）30個循環(huán)，72℃ 10min。

取PCR產(chǎn)物5μl，加入1μlMSPI內(nèi)切酶，37℃消化過夜，次日加0.5 mol/Ly乙二胺四乙酸鈉終止反應。采用2%瓊脂糖凝膠電泳分離酶切產(chǎn)物片段，采用銀染色法，用凝膠成像系統(tǒng)檢查并攝影。

1.2.4 療效評定 ①對符合條件的抑郁癥患者給予逍遙散湯劑治療。給藥方法:病例組應用逍遙散治療，方劑:柴胡25 g、當歸10 g、白芍20 g、茯苓20 g、白術15 g、酸棗仁20 g、遠志20 g、郁金15 g、香附15 g、炙甘草10 g。每日1付，早晚分服，觀察2個月。②治療前和治療8周后均給予HAMD17項版評定。③療效判定標準為:無效（HAMD減分率＜50%）和有效（HAMD減分率≥50%）。減分率=（基線總分—治療8周末總分）/基線總分×100%。④由兩名具有精神科主治醫(yī)師以上職稱者進行診斷入組與量表評定。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行方差分析及卡方檢驗。兩組基因型、等位基因頻率檢驗采用卡方檢驗。成組計量資料采用方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。按照Hardy-Weinberg平衡定律分別計算各組等位基因頻率，并作吻合度檢驗。

2 結 果

2.1 一般資料 收集研究組和對照組各120例，其中研究組男56例，女64例，年齡18～54歲，平均年齡（30.50 +9.82）歲。對照組男58例，女62例；年齡18～59歲，平均年齡（29.65+11.18）歲。兩組年齡（F=0.82）、性別（χ2=0.067）差異無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。

2.2 兩組基因型分布 兩組的期望值與觀察值比較，研究組P＞0.05，對照組P＞0.05。見表1。兩組基因型分布均符合Hardy-Weinberg定律。說明本研究所選取的研究組來自大的群體，無人口遷移等干擾群體特征因素，樣本具有群體代表性。

2.3 研究組不同基因型之間療效差異 有效組與無效組比較，不同基因型的療效無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表1 研究組和對照組基因型及等位基因頻率的比較

表2 研究組不同基因型之間療效差異

3 討 論

5-HT2A受體基因和抑郁癥關系是近年的研究熱點之一，但是各研究結果顯示的并不一致。正電子發(fā)射斷層掃描術顯示，抗抑郁藥可降低抑郁癥患者腦內(nèi)5-HT2A受體的密度［6］，說明5-HT2A受體與抑郁癥密切相關。研究認為5-HT2A受體基因T102C多態(tài)性中C等位基因能夠降低信使核糖核酸（mRNA）以及蛋白的表達，并與5-HT2A受體結合位點數(shù)目降低［7］、與抑郁癥發(fā)病有關。Jokela等［8］的研究也表明5-HT2A受體基因T102C多態(tài)性影響重性抑郁癥的發(fā)展。也有研究顯示5-HT2A受體基因T102C多態(tài)性與抑郁癥無明顯關聯(lián)［9］。本研究通過對首發(fā)抑郁癥患者進行研究，結果表明5-HT2A受體基因（T102C）T/C基因型、C/C基因型頻率及等位基因頻率與正常對照組相比無統(tǒng)計學意義，提示T102C多態(tài)性中胞嘧啶C基因型可能并不是抑郁癥發(fā)病的易感基因，與抑郁癥發(fā)病無顯著關系。

抗抑郁藥物主要作用于5-HT2A神經(jīng)遞質系統(tǒng)，抑郁癥患者對藥物治療的反應表現(xiàn)出遺傳異質性。有研究顯示，5-HT2A T102C的C等位基因是SSRI類抗抑郁藥物治療的優(yōu)勢基因，T102C的C/C基因型抑郁癥患者具有較好的治療效果［10-11］。逍遙散是治療抑郁癥的常見方劑［12］，既補肝體，又助肝用，是氣血兼顧、調和肝脾的名方，具有疏肝理氣，健脾養(yǎng)血清熱之功能，對抑郁癥有良好的療效。較多的研究顯示逍遙散的抗抑郁作用機制可能與影響腦內(nèi)5-HT能神經(jīng)系統(tǒng)有關，如趙威等［13］研究發(fā)現(xiàn)逍遙散可顯著增高利血平致抑郁癥小鼠腦內(nèi)的5-HT含量。熊靜悅等［14］的研究提示逍遙散的抗抑郁作用可能與5-TH2A受體有關，且隨后的驗證研究進一步證實5-TH2A受體是逍遙散發(fā)揮作用的靶點。本研究表明逍遙散治療抑郁癥的療效與5-HT2A受體基因（T102C）多態(tài)性無關聯(lián)。

該結果可能受到相對較少研究樣本量的影響，還可能在一定程度上受到抑郁癥表型異質性的影響。同時研究結果只涉及單個基因多態(tài)性與抑郁癥的關系，而未深入考慮到多個基因之間和基因—環(huán)境因素的交互作用。因此，為得到較全面、合理的結論，仍需開展大量的多中心及大樣本的病例對照研究。

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10.3969/j.issn.1000-8535.2016.01.029

2015-06-10）

廣州市中醫(yī)藥科技項目（20132A011019）