孟魯斯特對哮喘患者外周血Th1/Th2平衡以及外周血炎癥因子水平的影響

涂 峰李貴良蘇星烽

1 廣東省惠州仲愷高新區(qū)潼湖衛(wèi)生院（惠州 516232）2 廣東省惠州仲愷高新區(qū)人民醫(yī)院（惠州516232）

孟魯斯特對哮喘患者外周血Th1/Th2平衡以及外周血炎癥因子水平的影響

涂 峰1李貴良1蘇星烽2

1 廣東省惠州仲愷高新區(qū)潼湖衛(wèi)生院（惠州 516232）2 廣東省惠州仲愷高新區(qū)人民醫(yī)院（惠州516232）

目的 研究孟魯斯特治療哮喘的臨床療效及其對患者Th1/Th2細(xì)胞免疫平衡和相關(guān)炎癥因子水平的影響。方法 選取哮喘患者68例隨機(jī)分為對照組31例及觀察組37例，對照組予以常規(guī)糖皮質(zhì)激素吸入治療，觀察組在此基礎(chǔ)上加服孟魯斯特。用藥3個(gè)月后流式細(xì)胞儀檢測兩組患者外周血Th1、Th2數(shù)量變化，ELISA定量外周血IL-4及IFN-γ含量變化并作臨床效果評定。結(jié)果 兩組患者經(jīng)治療后，外周血Th1/Th2比例均升高，IL-4/IFN-γ細(xì)胞因子水平下降，但觀察組較對照組變化更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。療效方面，觀察組總有效率94.59%，高于對照組的74.19%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），同時(shí)兩組均未見明顯不良反應(yīng)。結(jié)論 哮喘患者加用孟魯斯特具有明顯免疫調(diào)節(jié)功能，使Th1/Th2水平趨于平衡，作為哮喘輔助治療藥物療效確切。

孟魯斯特 哮喘患者 Th1/Th2 IL-4 IFN-γ

支氣管哮喘簡稱哮喘，是一種以氣道高反應(yīng)性和炎癥性氣道阻塞為特征的，由嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等多種炎性細(xì)胞參與的慢性非特異性炎癥?，F(xiàn)已研究證明，輔助性T細(xì)胞的兩個(gè)功能性亞群Th1和Th2細(xì)胞的失衡及其炎癥介質(zhì)的釋放與哮喘的發(fā)病有著緊密聯(lián)系，目前免疫學(xué)上通過檢測外周血中Th1、Th2的特征性細(xì)胞因子干擾素-γ（IFN-γ）和白細(xì)胞介素4（IL-4）來了解該兩種細(xì)胞的功能狀態(tài)，并且研究通過糾正Th1/Th2細(xì)胞間的免疫失衡來治療哮喘［1］。孟魯斯特是半胱氨酰白三烯受體拮抗劑，而白三烯是引發(fā)哮喘的重要炎性介質(zhì)，阻斷白三烯可減少哮喘發(fā)作，因此孟魯斯特已被開發(fā)為抗哮喘藥物［2］。本研究通過觀察孟魯斯特對哮喘患者外周血炎癥因子水平的影響，探討其對外周血Th1/Th2細(xì)胞平衡的調(diào)節(jié)并觀察對哮喘的治療效果，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院于2014年6月—2015年6月收治的哮喘患者68例，就診時(shí)無感染性疾病病史，無合并其他重大疾病，無免疫抑制劑或白三烯受體拮抗劑用藥史，診斷標(biāo)準(zhǔn)參照中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會制定的哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)（2008年）［3］。患者年齡18～52歲，隨機(jī)分為對照組與觀察組。對照組31例，其中男19例，女12例，平均年齡（32.4±6.21）歲；病程3個(gè)月～18年，平均病程（10.7 ±7.2）年。觀察組37例，其中男23例，女15例，平均年齡（31.8±7.37）歲；病程2個(gè)月～20年，平均病程（9.5±6.9）年。兩組患者一般資料差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），所有患者對本研究知情同意并配合用藥。

1.2 治療方法 對照組給予常規(guī)糖皮質(zhì)激素吸入治療，觀察組在此基礎(chǔ)上加用孟魯司特鈉片（默沙東制藥有限公司），10mg/次，每日一次，睡前服用。治療期間不合并使用其他藥物，若治療期間病情反復(fù)發(fā)作可吸入短效β2-受體激動劑。本用藥方案持續(xù)3個(gè)月，用藥期間需定期隨訪確保準(zhǔn)確依時(shí)用藥，并記錄不良反應(yīng)。

1.3 測定方法 兩組患者在治療前后空腹抽取肘部靜脈血5mL，離心取血清，均分為兩份，-20℃低溫保存。檢測時(shí)取一份用于流式細(xì)胞術(shù)對Th1、Th2細(xì)胞計(jì)數(shù)，另一份用于雙夾心ELISA法檢測IL-4及IFN-γ。臨床療效評價(jià)方法參照中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會制定的支氣管哮喘臨床控制療效標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)咳嗽、喘息、哮鳴音等情況的改善或消失情況，分別評定為無效、有效及顯效，總有效率為有效與顯效占總?cè)藬?shù)比例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 治療效果及不良反應(yīng)檢測 對照組用藥后總有效率為73.8%，觀察組用藥后總有效率為94.6%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。經(jīng)過治療過程中的定期隨訪及患者反饋統(tǒng)計(jì)顯示，兩組患者均未出現(xiàn)較明顯不良反應(yīng)，僅觀察組一名患者用藥初期有失眠癥狀。

表1 兩組患者治療效果比較 例（%）

2.2 Th1/Th2細(xì)胞比例 治療前，兩組患者Th1/Th2細(xì)胞比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），經(jīng)過 3個(gè)月治療之后，兩組患者Th1細(xì)胞含量均明顯升高而Th2細(xì)胞含量下降，Th1/Th2細(xì)胞比例相應(yīng)升高，但觀察組較對照組升高程度大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見表2。

表2 兩組患者治療前后Th1/Th2細(xì)胞比例變化情況比較（±s）

表2 兩組患者治療前后Th1/Th2細(xì)胞比例變化情況比較（±s）

n Th1治療前 治療后Th2治療前 治療后Th1/Th2治療前 治療后對照組 31 0.57±0.14 0.73±0.17 0.89±0.15 0.81±0.12 0.71±0.08 0.94±0.06觀察組 37 0.59±0.18 0.95±0.21 0.90±0.16 0.66±0.10 0.72±0.03 1.38±0.11 t值 0.504 4.685 0.264 5.624 0.704 19.912 P值0.616 0.000 0.793 0.000 0.484 0.000

2.3 IL-4、IFN-γ水平變化 治療前兩組患者外周血中 IL-4、IFN-γ表達(dá)水平比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），治療后兩組 IL-4水平均下降，IFN-γ水平均升高，但觀察組變化情況較對照組明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），見表3。

表3 兩組患者治療前后IL-4、IFN-γ表達(dá)水平變化情況比較

3 討 論

哮喘是一種多發(fā)病、常見病，表現(xiàn)為多種炎癥細(xì)胞在支氣管的浸潤和聚集，這些炎癥細(xì)胞相互作用分泌出多種炎癥介質(zhì)和細(xì)胞因子，使支氣管反應(yīng)性增高，氣道收縮、血管滲出增多、黏液分泌增加，進(jìn)而引起呼吸困難、氣喘、咳嗽等臨床癥狀［4］。T淋巴細(xì)胞是參與哮喘發(fā)病的重要炎癥細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞功能可分為輔助性T細(xì)胞（Th細(xì)胞）、細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc細(xì)胞）、抑制性T細(xì)胞（Ts細(xì)胞）、遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)T細(xì)胞（Td）及效應(yīng)T細(xì)胞（Te）等。其中，Th細(xì)胞按其產(chǎn)生的細(xì)胞因子可分為Th1及Th2兩大功能亞群，均由Th0分化而來［5］。Th1細(xì)胞分泌IL-2、TNF、IFN-γ等炎癥細(xì)胞因子介導(dǎo)細(xì)胞免疫；Th2細(xì)胞通過分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-8等細(xì)胞因子介導(dǎo)體液免疫，兩種免疫應(yīng)答之間密切聯(lián)系，共同維持免疫系統(tǒng)平衡［6］。目前普遍認(rèn)為Th1/Th2細(xì)胞比例失衡與哮喘的發(fā)病密切相關(guān)，尤其是Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子IFN-γ及Th2細(xì)胞分泌的IL-4之間比例的失調(diào)與哮喘的發(fā)展密不可分，故常以IL-4/IFN-γ比例來間接反映Th1/Th2的比例［7］。因此，利用某些藥物調(diào)整炎癥細(xì)胞因子IL-4/IFN-γ之間的平衡，或調(diào)解Th1/Th2細(xì)胞之間的穩(wěn)態(tài)，是目前治療哮喘最有效的途徑之一。

孟魯司特是一種半胱氨酰白三烯（Cys LTs）受體拮抗劑，能夠競爭性結(jié)合半胱氨酸受體而抑制白三烯的活性［8］。白三烯是花生四烯酸的代謝產(chǎn)物，能夠誘發(fā)哮喘患者氣管及其他組織產(chǎn)生大量的前炎癥反應(yīng)，即平滑肌痙攣、血漿滲出、黏液分泌和炎性細(xì)胞激活從而誘發(fā)哮喘的急性發(fā)作［9］。孟魯司特通過阻斷白三烯與受體的結(jié)合而降低其致炎作用、抑制氣道炎癥、舒張支氣管平滑肌而緩解氣道痙攣，預(yù)防和減輕黏膜炎癥細(xì)胞浸潤，有效控制哮喘癥狀［10］。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，孟魯斯特治療哮喘效果確切，總有效率達(dá)94.59%，遠(yuǎn)高于對照組的總要效率74.19%。Henderson等人研究便發(fā)現(xiàn)［11］，孟魯司特能抑制哮喘小鼠的氣道反應(yīng)，抑制其氣道內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞的浸潤等現(xiàn)象，并顯著降低IL-5 mRNA的表達(dá)。近年也有動物研究發(fā)現(xiàn)，孟魯斯特治療哮喘的作用機(jī)制可能與糾正Th2的過度極化有關(guān)［12］。本研究結(jié)果也顯示，魯斯特能夠提升Th1細(xì)胞含量而降低Th2細(xì)胞含量而是Th1/Th2細(xì)胞比例趨于平衡，與對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。此外，對外周血炎癥因子IL-4、IFN-γ的定量檢測結(jié)果也驗(yàn)證了這一點(diǎn)，患者在孟魯斯特用藥3個(gè)月后IL-4水平明顯降低而IFN-γ水平升高，與對照組比較有差異（P＜0.01）。

結(jié)果表明通過孟魯斯特能糾正Th1細(xì)胞向Th2細(xì)胞“克隆漂移”，使Th2細(xì)胞向Th1細(xì)胞逆轉(zhuǎn)而恢復(fù)兩者之間的平衡［13］，最終達(dá)到治療哮喘的效果。尤其與糖皮質(zhì)激素聯(lián)合使用療效顯著而無明顯副作用，能夠改善患者的呼吸功能。

［1］姚金晶，陳宜濤.Th1/Th2平衡調(diào)節(jié)與疾病發(fā)生的研究進(jìn)展［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2009（13）:2597-2600.

［2］冼樂武，梁宗安，劉春濤.支氣管哮喘大鼠單個(gè)核細(xì)胞Th1/Th2的變化及孟魯司特的干預(yù)作用［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2003，26（5），312-313.

［3］中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南［J］.中華結(jié)核和呼吸雜志，2008，31（3）: 177-185.

［4］DESAI D，GUPTA S，SIDDIQUI S，et al.Sputum mediator profiling and relationship to airway wall geometry imaging in severe asthma［J］.Respir Res，2013，14（1）:17.

［5］DILEK F，OZKAYA E，KOCYIGIT AS，et al.Effect of Montelukast Monotherapy on Oxidative Stress Parameters and DNA Damage in Children with Asthma［J］.Int Arch Allergy Immunol，2015，167（2）:119-26.doi: 10.1159/000436967.Epub 2015 Aug 18.

［6］王艷軍.沙美特羅替卡松聯(lián)合孟魯斯特對哮喘患兒IL-4 INF-γ IgE EOS影響研究［J］.河北醫(yī)學(xué)，2015（6）:881-884.

［7］趙軍.白三烯拮抗劑孟魯斯特鈉與舒利迭聯(lián)合治療在老年哮喘患者中的應(yīng)用效果［J］.中國醫(yī)學(xué)工程，2013（11）:53.

［8］STELMACH I，OZAREK-HANC A，ZACZENIUK M，et al.Do children with stable asthma benefit from addition of montelukast to inhaled corticosteroids:randomized，placebo controlled trial.Pulm Pharmacol Ther.2015 Apr；31:42-8.doi:10.1016/j.pupt.2015.01.004.Epub 2015 Jan 30.

［9］陽永珍.孟魯司特鈉口服加舒利迭吸入治療重度哮喘的療效觀察［J］.大家健康（學(xué)術(shù)版），2015，01:143-144.

［10］EKALADZE E，PKHAKADZE I，ALAVIDZE N，et al. K.Role of Montelukast in treatment of mild and severe forms of asthma.Georgian Med News.2014 Jul-Aug；（232-233）:56-60.

［11］HEENDERSON WR，TANG LO，CHU SJ，et al.A role for cysteinyl leukotrienes in airway remodeling in a mouse asthma model［J］.Am J Respir Crit Care Med，2002，165（1）:108-116.

［12］楊昭慧.哮喘患兒應(yīng)用孟魯司特鈉治療的臨床效果［J］.中國醫(yī)藥指南，2013，31:94-95.

［13］陽艷麗，潘玉琴，何幫順，等.哮喘患兒外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和Th1/Th2的變化及其與哮喘病情的關(guān)系［J］.中國當(dāng)代兒科雜志，2011，6:482-486.

10.3969/j.issn.1000-8535.2016.01.028

2015-10-11）