脂血標(biāo)本對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響及對(duì)策

李海英，馮小娟，朱占蘭

(連云港市東方醫(yī)院，江蘇連云港222042)

脂血標(biāo)本對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響及對(duì)策

李海英，馮小娟，朱占蘭

(連云港市東方醫(yī)院，江蘇連云港222042)

目的探討脂血標(biāo)本對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果的影響及處理辦法。方法分別檢測(cè)不同濃度模擬脂血標(biāo)本（分成A、B、C、D、E5組）聚乙二醇(PEG)處理前、后生化結(jié)果，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果與A組血清處理前結(jié)果比較，C組GLU結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，D組除K+、Na+、Cl-外均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；E組所有結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；⑵經(jīng)10%PEG處理后結(jié)果與A組血清處理前比較，除K+、Na+、Cl-無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其他指標(biāo)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01)；經(jīng)5%、40%PEG處理后檢測(cè)結(jié)果與A組血清處理前比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；20%PEG處理后檢測(cè)結(jié)果與A組血清處理前比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；⑶C組GLU指標(biāo)、D組、E組所有指標(biāo)經(jīng)20%PEG處理前后結(jié)果比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，B組指標(biāo)、C組除GLU外其他指標(biāo)經(jīng)20%PEG處理前后結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；各組血清經(jīng)20%PEG處理后結(jié)果與A組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論當(dāng)脂血濃度等于1%時(shí)，即對(duì)GLU的檢測(cè)造成影響，當(dāng)脂血濃度等于2%時(shí)，除對(duì)K+、Na+、Cl-的影響較少外，對(duì)其他指標(biāo)均造成顯著性影響；當(dāng)脂血濃度達(dá)到5%時(shí)，對(duì)所有指標(biāo)均有影響。20%PEG能消除脂血標(biāo)本的影響，簡便易行，便與推廣。

脂血；聚乙二醇；生化檢測(cè)

脂血是臨床實(shí)驗(yàn)室最常見的干擾因素，患者由于進(jìn)食高脂飲食或者本身的高脂血癥，血漿或血清常呈渾濁狀，若乳糜微粒過多可呈乳白色，也稱“乳糜血”，大量的乳糜微粒對(duì)入射光產(chǎn)生散射，嚴(yán)重干擾生化結(jié)果[1-3]。如不處理，生化指標(biāo)的測(cè)定將會(huì)受到干擾，如何處理脂血標(biāo)本并得到正確的檢驗(yàn)結(jié)果，很多人想出很多辦法，如用高速離心法、氯仿和乙醚以及其他處理方法等[4，5]，但是目前還沒有一個(gè)比較成熟的解決方案。本文通過模擬脂血標(biāo)本并采用不同濃度PEG進(jìn)行處理，力求解決高脂血影響臨床生化測(cè)定的問題?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源隨機(jī)收集新鮮健康體檢者血清200份，要求無溶血、無黃疸、無脂血，標(biāo)本總量至少300ml，充分混勻后備用。

1.2 標(biāo)本分組將收集到的血清分成5組：⑴A組（原始血清組）；⑵B組（0．5%模擬脂血組）：原始血清49.75ml+脂肪乳0.25ml；⑶C組（1%模擬脂血組）：原始血清49.50ml+脂肪乳0.50ml；⑷D組(2%模擬脂血組)：原始血清49.00ml+脂肪乳1.00ml；⑸E組(5%模擬脂血組)：原始血清95.00ml+脂肪乳5.00ml。

1.3 模擬血清的聚乙二醇(PEG)處理方法分別配置5%、10%、20%、40%PEG溶液。按實(shí)驗(yàn)要求將模擬血清和不同濃度的PEG溶液按2：1比例混合，室溫靜置10min，4000r/min離心5min，小心吸取上清液部分檢測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

1.4 儀器和試劑儀器為美國西門子公司生產(chǎn)RL Max全自動(dòng)生化分析儀，試劑均為儀器原裝配套試劑。30%脂肪乳為四川科倫藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品批號(hào)：F15080810-1。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)前對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)和定標(biāo)，然后分別測(cè)定各組血清生化指標(biāo)、不同濃度PEG處理5%模擬脂血組標(biāo)本及最佳PEG濃度處理后各組血清生化指標(biāo)，重復(fù)10次，并記錄TBIL、TP、ALB、ALT、AST、GGT、GLU、K+、Na+、Cl-檢測(cè)結(jié)果。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 17.0軟件處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度模擬脂血處理前測(cè)定結(jié)果各組處理前結(jié)果與A組血清處理前結(jié)果比較，B組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；C組除GLU有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，其余結(jié)果均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；D組除K、NA、CL結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其余結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；E組所有結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。見表1。

2.2 不同濃度PEG處理5%模擬脂血后結(jié)果10%PEG處理后結(jié)果與A組血清處理前比較，除K+、Na+、Cl-無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，其他指標(biāo)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01)；經(jīng)5%、40%PEG處理后檢測(cè)結(jié)果與A組血清處理前比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；20%PEG處理后檢測(cè)結(jié)果與A組血清處理前比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。見表2。

表1 不同濃度模擬脂血標(biāo)本經(jīng)20%PEG處理前后結(jié)果（x±s）

2.3 20%PEG處理各組模擬脂血檢測(cè)結(jié)果C組GLU指標(biāo)和D組、E組所有指標(biāo)經(jīng)20%PEG處理前后結(jié)果比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，B組指標(biāo)和C組除GLU外其他指標(biāo)經(jīng)20%PEG處理前后結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；各組血清經(jīng)20%PEG處理后結(jié)果與A組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

3 討論

高脂血對(duì)臨床生化指標(biāo)測(cè)定的主要干擾機(jī)制包括光散射、血液標(biāo)本中物質(zhì)極性或非極性增加等，同時(shí)大量不可溶物質(zhì)不斷增加，也可使血漿標(biāo)本出現(xiàn)混濁。通常情況下，密度較大的脂血不會(huì)對(duì)臨床生化測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生較大影響，但中度和較高密度脂血可對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重影響[6]。目前全自動(dòng)生化分析儀多采用雙試劑、雙波長來避免或減少來自試劑空白和樣品空白對(duì)測(cè)定光吸收的干擾，提高測(cè)定的特異度與靈敏度[7]。這樣雖然可以消除輕、中度脂血對(duì)大部分生化指標(biāo)的檢測(cè)干擾，但嚴(yán)重脂血時(shí)，大部分生化指標(biāo)的測(cè)定仍會(huì)受到脂質(zhì)顆粒的嚴(yán)重干擾，甚至無法測(cè)定[8]。本文發(fā)現(xiàn)當(dāng)脂血濃度等于1%時(shí)，即對(duì)GLU的檢測(cè)造成影響，當(dāng)脂血濃度等于2%時(shí)，除對(duì)K+、Na+、Cl-的影響較少外，對(duì)TBIL、TP、GLU的檢測(cè)造成正干擾，對(duì)ALB、ALT、AST、GGT的結(jié)果造成負(fù)干擾；當(dāng)脂血濃度達(dá)到5%時(shí)，對(duì)所有指標(biāo)均有嚴(yán)重影響，尤其是ALT、AST的檢測(cè)出現(xiàn)負(fù)值，造成檢測(cè)失敗。這與一些研究是一致的[9]。分析原因可能與TBIL、TP、ALB、GLU采用終點(diǎn)法有關(guān)，TP、ALB由于采用單試劑，抗干擾能力減弱，影響顯著，研究認(rèn)為脂血對(duì)TP的影響是正干擾，對(duì)ALB的影響說法不一，可能與ALB采用方法有關(guān)。脂血對(duì)TBIL的干擾可能與其影響重氮化進(jìn)程有關(guān)，但具體機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。ALT、AST雖然采用速率法檢測(cè)，但在嚴(yán)重脂血時(shí)出現(xiàn)負(fù)值可能與波長（主波長340nm、副波長700nm）的選擇有關(guān)。中度脂血雖然對(duì)K+、Na+、Cl-的檢測(cè)未造成影響，但由于脂類物質(zhì)沉積于電極表面，將影響檢測(cè)準(zhǔn)確性和壽命，因此對(duì)脂血標(biāo)本進(jìn)行處理具有一定意義。

表2 不同濃度PEG處理5%模擬脂血結(jié)果（x±s）

PEG屬于高分子化合物，具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，且無毒性和刺激性，被廣泛應(yīng)用在醫(yī)學(xué)臨床實(shí)際工作中。將PEG配制成5%、10%、20%和40%不同濃度，分別處理5%模擬脂血標(biāo)本后發(fā)現(xiàn)，5% PEG和10%PEG處理5%高脂血清不夠徹底，效果不好，40%PEG處理高脂血清雖然徹底，但對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響較大。只有20%PEG處理的高脂血清結(jié)果與原始血清結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，為首選的PEG濃度。這與一些研究也是一致的[11，12]。脂血標(biāo)本能夠?qū)εR床生化測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重不良影響，但通過實(shí)驗(yàn)筆者認(rèn)為使用20%PEG溶液處理標(biāo)本，簡便易行，能消除脂血對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，值得推廣。

[1]林景濤，翟錟，代艷杰，等.高脂血對(duì)血清酶類活性測(cè)定影響及處理方法[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7(15)：1542-1546.

[2]張正云，何清.高脂血標(biāo)本對(duì)血紅蛋白的干擾及校正方法[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2014，32(5)：64-645.

[3]高杰.檢驗(yàn)科應(yīng)重視分析前標(biāo)本因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(5)：461-462.

[4]黃琨波.消除脂血對(duì)生化測(cè)定干擾的對(duì)比實(shí)驗(yàn)研究[J].海峽藥學(xué)，2014，26(12)：193-194.

[5]甄廣懷，周玉萍，陳達(dá)富.不同方案消除血脂對(duì)生化測(cè)定干擾的研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，12(16)：2406-2407.

[6]錢建平，熊懷民，蔣廷旺.消除脂血對(duì)臨床生化檢驗(yàn)常用指標(biāo)干擾的方法比較[J].北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2013，14(5)：576-577.

[7]朱征，丁顯平，楊敏，等.高脂血對(duì)臨床生化測(cè)定影響及處理方法的臨床研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(20)：2533-2560.

[8]胥華猛.3種方法消除脂血對(duì)生化測(cè)定干擾的對(duì)比研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34(14)：1813-1817.

[9]隆維東，黃冬悅，李堅(jiān)，等.脂質(zhì)清除劑Lipolear消除脂血對(duì)常規(guī)生化項(xiàng)目檢測(cè)干擾的效果評(píng)價(jià)[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35 (1)：72-74.

[10]董立杰.標(biāo)本脂血對(duì)臨床生化檢測(cè)結(jié)果的評(píng)估及其對(duì)策[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2010，17(4)：344-346．

[11]劉萬彬，隆維東.聚乙二醇4000處理脂血后對(duì)生化結(jié)果的影響[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，，33(4)：504-506.

[12]靳四海.高脂血對(duì)臨床生化測(cè)定的影響探討[J].中國實(shí)用醫(yī)藥，2015，10(23)：57-59.

R446.11+2

A

1674-1129(2016)06-0781-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.06.030

2016-05-25；

2016-11-26)