山東地區(qū)規(guī)?；?chǎng)三種常見(jiàn)疫病的流行病學(xué)研究

程子龍，劉 朋，劉思當(dāng)

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271000)

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山東地區(qū)規(guī)模化牛場(chǎng)三種常見(jiàn)疫病的流行病學(xué)研究

程子龍1，劉 朋1，劉思當(dāng)

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271000)

[目的]為弄清山東地區(qū)規(guī)?；?chǎng)三種常見(jiàn)疫病的流行病學(xué)特點(diǎn)。[方法]2015年1月到2015年6月從山東省部分地區(qū)20個(gè)規(guī)?；?chǎng)隨機(jī)采集420份血清樣品，包括種牛血清41份、奶牛血清278份、肉牛血清101份，利用ELISA方法檢測(cè)牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎及牛副結(jié)核病三種常見(jiàn)疫病抗體水平，20個(gè)牛場(chǎng)均未免疫上述三種傳染病疫苗。檢測(cè)[結(jié)果]表明，在山東地區(qū)牛場(chǎng)中，這三種傳染病普遍存在感染，其中病毒性腹瀉病毒抗體場(chǎng)陽(yáng)性率為65%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為52.62%；牛傳染性鼻氣管炎病毒gE抗體場(chǎng)陽(yáng)性率為55%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為23.33%；牛副結(jié)核分支桿菌抗體場(chǎng)陽(yáng)性率為10%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為2.14%。[結(jié)論]通過(guò)本次流行病學(xué)調(diào)查，進(jìn)一步了解三種常見(jiàn)傳染病在山東地區(qū)不同類型牛場(chǎng)的流行情況，對(duì)山東地區(qū)牛場(chǎng)疫情預(yù)測(cè)及疫病防控起到一定的指導(dǎo)作用。

山東；牛病毒性腹瀉；牛傳染性鼻氣管炎；牛副結(jié)核??；流行病學(xué)調(diào)查

牛病毒性腹瀉(Bovine viral diarrhea，BVD)，又稱黏膜病，是由牛病毒性腹瀉病毒引起的以發(fā)熱、黏膜糜爛、潰瘍、白細(xì)胞減少、腹瀉、持續(xù)感染、咳嗽、流產(chǎn)為主要特征的牛的急性、熱性、接觸性傳染病[1]。除侵害牛以外，BVDV還能感染羊、鹿、牦牛等反芻動(dòng)物以及豬[2]，宿主比較廣泛。目前該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行，BVDV是造成全球奶牛、肉牛養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的主要病原體[3]，也是牛源生物制品(如血清等)的重要污染物。在我國(guó)將BVD定為三類動(dòng)物疫病，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為須申報(bào)的動(dòng)物疫病及國(guó)際動(dòng)物胚胎交流病原名錄三類疫病。

牛傳染性鼻氣管炎(Infectious bovine rhinotracheitis, IBR)又稱“壞死性鼻炎”或“紅鼻病”，是由牛傳染性鼻氣管炎病毒引起牛的一種急性、熱性、接觸性傳染病[4]，主要表現(xiàn)為呼吸道黏膜發(fā)炎、呼吸困難、流鼻涕等癥狀，可引起膿皰性陰道炎、龜頭炎、結(jié)膜炎、幼牛腦膜腦炎、乳房炎、奶牛流產(chǎn)、產(chǎn)奶量下降等[5]。IBRV具有廣泛的組織嗜性，可引起牛的呼吸系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)疾病[6]，在臨床上常呈隱性感染，持續(xù)性排毒，同時(shí)也可削弱機(jī)體的抵抗力，世界衛(wèi)生組織(OIE)將該病列為B類動(dòng)物疫病，也是我國(guó)進(jìn)出口動(dòng)物必檢病之一。

牛副結(jié)核病(Bovine Paratuberculosis)是由副結(jié)核分支桿菌(Mycobacterium aviumsubspecies. Paratuberculosis, MAP)引起的以牛、羊等反芻動(dòng)物為主的慢性消耗性傳染病，以慢性增生性、卡他性腸炎為特征，病畜進(jìn)行性消瘦[7][8]，間歇性或持續(xù)性下痢，剖檢腸黏膜腦回樣增厚，腸黏膜固有層有大量淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞浸潤(rùn)[27]?？赏ㄟ^(guò)病畜傳染給人類或其他動(dòng)物。本病在全球范圍內(nèi)廣泛流行，嚴(yán)重影響著養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展和人類健康。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源與檢測(cè)試劑盒

采集的血清樣品來(lái)自山東地區(qū)20個(gè)規(guī)?；?chǎng)，其中包括2個(gè)種牛場(chǎng)的41份血清、12個(gè)奶牛場(chǎng)的278份血清、6個(gè)肉牛場(chǎng)的101份血清，共計(jì)420份血清樣品。采集的20個(gè)規(guī)模化牛場(chǎng)均未免疫牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎、牛副結(jié)核病等三種疫病疫苗。

牛病毒性腹瀉病毒抗體檢測(cè)試劑盒、牛傳染性鼻氣管炎病毒gE抗體檢測(cè)試劑盒、牛副結(jié)核病分枝桿菌抗體檢測(cè)試劑盒均購(gòu)于美國(guó)IDEXX公司。

1.2 方法

牛病毒性腹瀉-黏膜病、牛傳染性鼻氣管炎、牛副結(jié)核病分支桿菌的抗體檢測(cè)均按照IDEXX ELISA試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

對(duì)采集的41份種牛血清、278份奶牛血清、101份肉牛血清樣品，利用上述方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果表明，牛病毒性腹瀉病毒抗體場(chǎng)陽(yáng)性率為65%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為52.62%，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1；牛傳染性鼻氣管炎病毒gE抗體場(chǎng)陽(yáng)性率為55%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為23.33%，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2；牛副結(jié)核分支桿菌抗體場(chǎng)陽(yáng)性率為10%，個(gè)體平均陽(yáng)性率為2.14%，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。雖然在不同牛場(chǎng)都能檢出這三種傳染病，但是這三種傳染病抗體陽(yáng)性率存在差別，牛病毒性腹瀉病毒抗體陽(yáng)性率普遍較高，而牛副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性率最低。

表1 牛病毒性腹瀉抗體檢測(cè)結(jié)果

表2 牛傳染性鼻氣管炎gE抗體檢測(cè)結(jié)果

表3 牛副結(jié)核分支桿菌抗體檢測(cè)結(jié)果

圖1 不同牛場(chǎng)三種常見(jiàn)疫病抗體陽(yáng)性率對(duì)比

2.1 牛病毒性腹瀉抗體陽(yáng)性率分析

從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，不同牛群牛病毒性腹瀉抗體場(chǎng)陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率都很高，種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)場(chǎng)陽(yáng)性率分別達(dá)到100%、75%、33.33%，個(gè)體陽(yáng)性率為73.17%、56.12%、34.65%，說(shuō)明種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)普遍存在BVDV感染現(xiàn)象，這可能與BVDV持續(xù)性感染(PI)的特點(diǎn)有關(guān)。BVDV可以在PI牛體內(nèi)存活數(shù)月甚至終身，不表現(xiàn)臨床癥狀或出現(xiàn)與免疫病理有關(guān)的癥狀，PI牛自身不產(chǎn)生中和抗體，可持續(xù)、反復(fù)不定地向外界排毒[9]，導(dǎo)致BVDV在牛群內(nèi)散播，從而導(dǎo)致牛群高感染狀態(tài)。

從三種牛群類型來(lái)看，種牛場(chǎng)陽(yáng)性率最高，而肉牛場(chǎng)陽(yáng)性率相對(duì)較低。這可能與肉牛飼喂周期相對(duì)較短、種牛飼喂周期較長(zhǎng)有關(guān)，較長(zhǎng)的飼喂周期可導(dǎo)致種牛群感染的機(jī)率顯著增加，因此種牛群抗體陽(yáng)性率較高。

從1980年我國(guó)首次報(bào)道分離到BVDV以來(lái)，陸續(xù)多個(gè)省份檢出BVD陽(yáng)性抗體，并且陽(yáng)性率很高。邱昌慶等1998年報(bào)道山東省肉牛場(chǎng)BVD抗體陽(yáng)性率為59.6%[10]；楊得勝等2008年報(bào)道福建省2006、2007、2008三年規(guī)?；?chǎng)BVD抗體平均陽(yáng)性率在80%以上[11]；陳備娟、王煒、菅復(fù)春、李樹(shù)博、鄧明亮、王淑娟、童欽等人在2010～2012年做的流行病學(xué)調(diào)查顯示，BVD血清抗體奶牛陽(yáng)性率最低為58.6%、最高為69.1%，肉牛陽(yáng)性率最低為31.39%、最高為56.5%，牦牛陽(yáng)性率為30.08%[9][12-17]。李智勇等2014年對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)奶牛場(chǎng)調(diào)查結(jié)果顯示，BVD血清抗體陽(yáng)性率為88.9%[18]；2014年岳瑞超等報(bào)道山東省濟(jì)南市、濟(jì)寧市及萊西市牛BVD血清抗體平均陽(yáng)性率為38.3%[19]。而此次我們的調(diào)查結(jié)果顯示種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)個(gè)體陽(yáng)性率分別為73.17%、56.12%、34.65%，平均陽(yáng)性率為52.62%，低于內(nèi)蒙古地區(qū)，與其他省份基本一致。以上數(shù)據(jù)說(shuō)明BVD在我國(guó)已經(jīng)廣泛流行，多呈亞臨床型或隱性感染，雖然沒(méi)有引起明顯的臨床癥狀，但是會(huì)造成產(chǎn)奶量降低、肢蹄病發(fā)病率升高，能增加其他疾病的易感性[20]，從而造成巨大的間接損失，應(yīng)引起足夠重視。

2.2 牛傳染性鼻氣管炎gE抗體陽(yáng)性率分析

種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)和肉牛場(chǎng)IBRVgE抗體場(chǎng)陽(yáng)性率分別為50%、50%、66.67%，個(gè)體陽(yáng)性率分別為26.83%、17.63%、37.62%，雖然場(chǎng)陽(yáng)性率較高，但是個(gè)體陽(yáng)性率相對(duì)較低，說(shuō)明本病波及的牛場(chǎng)范圍較大，陽(yáng)性牛群中個(gè)體陽(yáng)性率并不是很高。

2007年～2013年張鵬飛、顏邦芬、賀曉龍、徐曉琴、王煒、李樹(shù)博、王單晶等人采用ELISA或者血清中和試驗(yàn)方法分別對(duì)全國(guó)各地區(qū)牛血清進(jìn)行IBRV抗體檢測(cè)，陽(yáng)性率最低為31.3%、陽(yáng)性率最高為50.67%[9,15,21-25]；而2014年李智勇等報(bào)道內(nèi)蒙古地區(qū)奶牛血清IBRV抗體平均陽(yáng)性率高達(dá)75.7%[26]；2014年岳瑞超等報(bào)道的山東省濟(jì)南市、濟(jì)寧市及萊西市牛血清IBRV抗體平均陽(yáng)性率為27%[19]；我們此次的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示山東地區(qū)牛血清IBRV抗體個(gè)體平均陽(yáng)性率為23.33%，略低于岳瑞超等人2014年報(bào)道的結(jié)果，從上面數(shù)據(jù)來(lái)看，山東地區(qū)總體陽(yáng)性率低于我國(guó)其它地區(qū)，但是波及的牛場(chǎng)范圍較廣，存在普遍感染現(xiàn)象。

2.3 牛副結(jié)核病分支桿菌抗體陽(yáng)性率分析

種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)副結(jié)核病分支桿菌抗體場(chǎng)陽(yáng)性率分別為50%、8.33%、0，個(gè)體陽(yáng)性率分別為9.76%、1.8%、0，不同牛場(chǎng)陽(yáng)性率差別較大，種牛場(chǎng)陽(yáng)性率高于奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)，并且在抽檢的的肉牛場(chǎng)里，沒(méi)有檢測(cè)出副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性牛，僅在抽檢的12個(gè)奶牛場(chǎng)中1個(gè)檢出5份牛副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性牛。由于副結(jié)核病感染前期主要以細(xì)胞免疫為主，后期則出現(xiàn)體液免疫，因此使用ELISA方法很難檢出感染副結(jié)核分支桿菌前期的牛，根據(jù)有關(guān)研究報(bào)道，兩歲以前的牛很難利用ELISA方法檢出是否感染副結(jié)核分支桿菌。奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)牛的年齡相對(duì)較小，抽檢的牛場(chǎng)本身陽(yáng)性率不高，因此在肉牛場(chǎng)未檢出副結(jié)核分支桿菌抗體，在奶牛場(chǎng)副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性率很低。2005～2015年十年間，全國(guó)各地區(qū)牛血清副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性率在2.8%～18%[26-33]，我們調(diào)查的平均陽(yáng)性率為2.14%，與之前調(diào)查的結(jié)果基本相符。雖然在山東地區(qū)肉牛場(chǎng)沒(méi)有檢出副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性牛，但是周邊地區(qū)副結(jié)核陽(yáng)性率相對(duì)較高，因此山東地區(qū)感染副結(jié)核病的壓力比較大，山東地區(qū)牛場(chǎng)應(yīng)做好生物安全措施，防止疫病傳入。

2.4 三種疫病在不同牛場(chǎng)中陽(yáng)性率對(duì)比分析

從圖一可以看出，在三種牛場(chǎng)中BVDV抗體陽(yáng)性率都在較高水平，副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性率普遍較低；種牛場(chǎng)三種疫病抗體陽(yáng)性率普遍較高，屬于高感染率牛群；肉牛IBRV抗體陽(yáng)性率較高，與肉牛呼吸道疾病高發(fā)相吻合，可能與流動(dòng)性較大有一定關(guān)系；這三種疫病在奶牛場(chǎng)普遍存在感染，奶牛場(chǎng)應(yīng)盡早采取凈化措施。

3 討論

3.1 山東地區(qū)種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)、肉牛場(chǎng)均存在牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎、牛副結(jié)核病三種牛常見(jiàn)傳染病的感染。并且種牛場(chǎng)、奶牛場(chǎng)陽(yáng)性率相對(duì)較高，山東周邊地區(qū)這三種疫病的感染率較高。因此各牛場(chǎng)應(yīng)嚴(yán)格做好生物安全措施，不從疫區(qū)引牛，在引牛時(shí)應(yīng)嚴(yán)格檢疫這三種疫病，防止引進(jìn)陽(yáng)性牛、持續(xù)性感染牛、隱性感染牛。另外牛場(chǎng)應(yīng)定期對(duì)三種疫病進(jìn)行檢疫、監(jiān)測(cè)，及時(shí)隔離或淘汰陽(yáng)性牛、持續(xù)性感染牛。

3.2 BVD在三種疾病中陽(yáng)性率最高，提示在山東地區(qū)的牛場(chǎng)中BVDV感染較重。感染BVDV的牛雖然很少表現(xiàn)典型的臨床癥狀，或臨床癥狀較輕，直接引起的死亡率不高，但BVD有持續(xù)感染、免疫耐受和免疫抑制等特點(diǎn)，可使乳房炎、肢蹄病、生殖道疾病的發(fā)病率大大提高，由此帶來(lái)的產(chǎn)奶量下降、牛奶質(zhì)量降低、淘汰牛數(shù)量增加等間接損失巨大。病毒性腹瀉持續(xù)性感染的特點(diǎn)是造成BVD廣泛傳播的主要原因，因此檢出和消除PI牛是控制BVD的中心環(huán)節(jié)[9]。牛場(chǎng)應(yīng)制定有效的BVD清除計(jì)劃，做好牛病毒性腹瀉病的監(jiān)測(cè)工作，逐步實(shí)現(xiàn)BVD的凈化。

3.3 牛副結(jié)核分支桿菌抗體陽(yáng)性率較低，但由于牛副結(jié)核病ELISA檢測(cè)方法的缺陷，ELISA只適用于兩歲以上牛的檢測(cè)，牛副結(jié)核分支桿菌感染的青年牛不易檢出，因此并不代表牛場(chǎng)未存在牛副結(jié)核分支桿菌的感染，不能掉以輕心。

3.4 牛場(chǎng)應(yīng)該提高飼養(yǎng)管理水平，飼喂優(yōu)質(zhì)的飼草飼料，改善牛舍環(huán)境，保證牛群健康，增強(qiáng)牛的體質(zhì)，提高牛的抵抗力。定期對(duì)牛舍、飼養(yǎng)工具進(jìn)行消毒，及時(shí)清除牛舍內(nèi)的糞尿，并做無(wú)害化處理，禁止非本場(chǎng)人員及車(chē)輛進(jìn)入牛場(chǎng)，尤其是養(yǎng)殖區(qū)，切實(shí)做好生物安全措施，防止三種疫病的發(fā)生。

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Epidemiological Investigation of Three Common Diseases in Large Scale Cow Farms in Shandong Province

CHENG Zi-long1, LIU Peng1, LIU Si-dang1*

(CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShandongAgricultureUniversity,Tai'an,Shandong, 271000)

420 serum samples were randomly collected from 20 scale cow farms from some regions of Shandong province during January to June in 2015, which included 41 breeding cattle serum samples, 278 dairy cattle serum samples and 101 beef cattle serum samples. The antibody level of bovine viral diarrhea, infectious bovine rhinotracheitis and bovine paratuberculosis, which are three common diseases, were detected by ELISA and none of the 20 scale cow farms had been vaccinated with the three types of vaccines which are mentioned above. The results showed that the three types of infectious diseases above were widespread in cow farms in Shandong province. The positive rate of bovine viral diarrhea virus (BVDV) antibody was 65%, and the individual average positive rate was 52.62%.The positive rate of infectious bovine rhinotracheitis (IBR) antibody was 55%, and the individual average positive rate was 23.33%. The positive rate of MAP antibody was 10%, and the individual average positive rate was 2.14%. Through the epidemiological investigation, we could further understand the epidemic situation about the three types of common infectious diseases in large scale cow farms in Shandong province. It also played a guiding role in forecasting epidemic, preventing and controlling diseases of the cow farms in Shandong province.

Shandong; bovine viral diarrhea; infectious bovine rhinotracheitis; bovine paratuberculosis; epidemiological investigation

2015-07-20修改日期:2015-07-25

山東省牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助(SDAIT-12-011-04)

程子龍(1991-)，男，山東聊城市人，在讀碩士，主要從事動(dòng)物臨床病理學(xué)研究，E-mail：chengzilong2014@126.com

劉思當(dāng)，教授，博士，博士生導(dǎo)師， E-mail：liusid@sdau.edu.cn

S823.2

A

1001-9111(2016)01-0044-05