超高壓乳鐵蛋白液增強(qiáng)免疫力功能研究

陳偉，陳云，劉宇，李志偉，史玉東，魏雪濤，母智深，*

（1.內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司，內(nèi)蒙古呼和浩特011500；2.北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，北京001500）

超高壓乳鐵蛋白液增強(qiáng)免疫力功能研究

陳偉1，陳云1，劉宇1，李志偉1，史玉東1，魏雪濤2，母智深1，*

（1.內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司，內(nèi)蒙古呼和浩特011500；2.北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，北京001500）

研究超高壓乳鐵蛋白液增強(qiáng)免疫力功能。將受試者按采用B1/FQ代加快雌性小鼠，設(shè)1.67、10、100mg/kg·bw 3個(gè)劑量組，另外設(shè)置0mg/kg·bw和10mg/kg·bw乳鐵蛋白（未經(jīng)超高壓）對(duì)照組，連續(xù)給樣1個(gè)月，檢測(cè)小鼠體重、胸、脾臟器官、Con A誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化、SRBC誘導(dǎo)的DTH、溶血空斑數(shù)、血清半數(shù)溶血值（HC50）、碳廓清能力、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞、NK細(xì)胞活性的影響。100mg組在體液免疫、細(xì)胞免疫功能、促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬功能與對(duì)照組有顯著性（P<0.05）均為陽性，可判斷100mg劑量對(duì)小鼠有增強(qiáng)免疫功能。超高壓乳鐵蛋白液仍具有增強(qiáng)免疫力功能。

乳鐵蛋白；超高壓；動(dòng)物試驗(yàn)；增強(qiáng)免疫力

乳鐵蛋白（Lactoferrin，Lf）是1939年由Sorensen等在動(dòng)物乳中發(fā)現(xiàn)的一種功能因子[1]。由于其有許多生理功能，引起了各個(gè)領(lǐng)域?qū)W者的關(guān)注。尤其是近年來，隨著乳鐵蛋白功能的不斷闡明，其開發(fā)利用更具實(shí)用價(jià)值。研究表明，乳鐵蛋白具有很多生理和生物學(xué)功能[2]，與免疫球蛋白和其他保護(hù)性因子相協(xié)調(diào)參與局部分泌免疫，減少損傷和損傷愈合作用[3-6]。乳鐵蛋白是目前公認(rèn)的具有多效免疫調(diào)節(jié)活性的蛋白質(zhì)，其對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用將會(huì)越來越受到重視，它可以影響多種免疫細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、朗罕氏細(xì)胞等[7]。有理由相信，乳鐵蛋白將會(huì)成為未來免疫調(diào)節(jié)治療的重要手段之一，但其調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的機(jī)制仍需進(jìn)一步深入探討。然而乳鐵蛋白在熱的條件下特別容易失活以及降解。早在1977年,RUEGG等就研究了牛乳超濾透過液中的牛乳鐵蛋白的熱穩(wěn)定性,在pH值為6.6、溫度為65℃～69℃時(shí)開始失活。此后，人乳鐵蛋白的熱穩(wěn)定性得到系統(tǒng)研究,結(jié)果表明對(duì)70℃加熱處理已使它完全降解[8]。

超高壓（UHP，ultrahigh pressure）是在室溫或溫和加熱條件下，利用100MPa～1 000MPa的壓力處理食品,以達(dá)到殺菌、鈍酶和加工食品的目的[9]。當(dāng)食品物料在液體介質(zhì)中體積被壓縮之后，形成高分子物質(zhì)立體結(jié)構(gòu)的氫鍵、離子鍵和疏水鍵等非共價(jià)鍵即發(fā)生變化，結(jié)果導(dǎo)致蛋白質(zhì)、淀粉等發(fā)生變性，酶失去活性，細(xì)菌等微生物被殺死[10]。為了驗(yàn)證超高壓條件下的乳鐵蛋白液是否失活，以及超高壓的乳鐵蛋白是否具有增強(qiáng)免疫力的功能開展本實(shí)驗(yàn)。本試驗(yàn)對(duì)超高壓進(jìn)行了動(dòng)物試驗(yàn)，依據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003年版）[11]有關(guān)規(guī)則評(píng)判對(duì)產(chǎn)品是否具有增強(qiáng)免疫力功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。為其在乳制品中應(yīng)用打下理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

RPMI1640、Hanks液、SA緩沖液、補(bǔ)體、LDH基質(zhì)液、MTT、熒光乳膠顆粒、Na2CO3等。

打孔器；BS2000S分析天平、BS200S-WE1電子天平：德國塞多利斯；UV2600分光光度計(jì)：日本島津；流式細(xì)胞儀：美國BD；Celculture二氧化碳培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)：新加坡Esco；Elx808酶標(biāo)儀：美國biotek；HPP HPP600MPa/30 L超高壓食品處理設(shè)備：包頭科發(fā)。

1.2 樣品制備

超高壓乳鐵蛋白液的制備：將攪拌均勻的乳鐵蛋白（新西蘭Tatua）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%灌裝于鋁箔袋中，經(jīng)600MPa 30min壓力處理后備用。

對(duì)比組：同一批次的乳鐵蛋白。

1.3 動(dòng)物及分組

選用ICR小鼠（SPF級(jí)）由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供（動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK（京）2011-0012），6周齡～8周齡，19 g～25 g，雌性300只。動(dòng)物飼料：由北京華阜康生物科技股份有限公司提供。飼料合格證號(hào)：SCXK（京）2014-0010。按體質(zhì)量隨機(jī)組，每組12只，各取5組分別進(jìn)行；SRBC誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）、小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)、小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、小鼠抗體生成細(xì)胞及半數(shù)溶血值（HC50）實(shí)驗(yàn)、ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化及NK細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)等5個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目[11]。

1.4 飼養(yǎng)條件

小鼠在溫度為20℃～25℃，相對(duì)濕度為40%～70%的實(shí)驗(yàn)室屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)。動(dòng)物飼養(yǎng)于屏障環(huán)境中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（京）2012-0011。

1.5 劑量

乳鐵蛋白（乳鐵蛋白牛奶4mg/100 g）的人體推薦劑量500mL/（人·日），折算成原料粉的人體推薦劑量為20mg/（人·日）（以60 kg體質(zhì)量計(jì)），設(shè)1.67、10、 100mg/kg 3個(gè)劑量組（分別相當(dāng)于人體推薦攝入量的5倍、30倍、300倍），另設(shè)0mg/kg組以及10mg/kg非超高壓對(duì)照組，經(jīng)口每日1次給予小鼠相應(yīng)質(zhì)量濃度的受試樣品，小鼠灌胃量為10mL/kg。連續(xù)灌胃1個(gè)月后測(cè)定各項(xiàng)增強(qiáng)免疫力功能指標(biāo)[11]。

1.6 方法

ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)（MTT法）；SRBC誘導(dǎo)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)（DTH）（足跖增厚法）；抗體生成細(xì)胞檢測(cè)（Jeren改良撥片法）；血清溶血素測(cè)定（半數(shù)溶血值）；小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)；小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞試驗(yàn)（半體內(nèi)法）；NK細(xì)胞活性測(cè)定（乳酸脫氫酶測(cè)定法）[11]。

1.7 數(shù)據(jù)分析

用SPSS10.0軟件對(duì)各實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊要求的數(shù)據(jù)資料，用單因素方差分析方法中多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理；對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)資料進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理[11]。

2 結(jié)果與分析

2.1 超高壓乳鐵蛋白對(duì)小鼠體重的影響

表1為乳鐵蛋白對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響。

表1 乳鐵蛋白對(duì)小鼠體重的影響Table1 Theeffectof lactoferrin on weightofm ice

由表1可以看出，小鼠的初始體質(zhì)量為1.67、10、100mg/kg組與0 g/kg組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明小鼠的初始體質(zhì)量在各組間較為均衡。經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白1個(gè)月后，各劑量組體重增長值經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊性要求，用單因素方差分析方法中多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。0.08、0.17、0.50 g/kg組與0 g/kg組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 對(duì)小鼠胸腺、脾臟器官的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，胸腺/體質(zhì)量、脾/體質(zhì)量經(jīng)方法齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊性要求，用單因素方差分析方法中多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，結(jié)果如表2所示。

由表2可以看出：1.67、10、100mg/kg組與0 g/kg組及10mg/kg乳鐵蛋白液比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠免疫器官重量的影響（x±s）Table2 Theeffectof lactoferrin（UHP）on theweightof immune organsofm ice（x±s）

2.3 對(duì)溶血空斑數(shù)的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，結(jié)果如表3所示。

表3 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠IgM-PFC/脾的影響（x±s）Table3 Theeffectof lactoferrin（UHP）onm icespleen IgM-PFC（x±s）

由表3可以看出，100mg/kg對(duì)小鼠IgM-PFC/脾顯著高于其它組。10mg/kg乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠IgM-PFC/脾顯著高于對(duì)照組，而10mg/kg乳鐵蛋白液對(duì)小鼠IgM-PFC/脾與對(duì)照組無差異。

2.4 對(duì)小鼠血清溶血素的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，結(jié)果如表4所示。

表4 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠血清溶血素的影響（x±s）Table4 Theeffectof lactoferrin on Serum hemolysin inmouse（x±s）

由表4可以看出，各劑量組與10mg/kg乳鐵蛋白液（超高壓）組與對(duì)照組相比相比對(duì)小鼠血清溶血素的影響有著現(xiàn)在差異，而10mg/kg乳鐵蛋白液對(duì)照組以及100mg/kg乳鐵蛋白液（超高壓）組與對(duì)照組相比存在極顯著差異（P＜0.01）。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)10mg/kg超高壓乳鐵蛋白液與蛋白對(duì)照組比較，存在顯著差異。

2.5 對(duì)DNFB誘導(dǎo)的小鼠DTH的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，結(jié)果如表5所示。

表5 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠DTH的影響（x±s）Table5 Theeffectof lactoferrin on DTH inm ouse（x±s）

由表5可以看出，100mg/kg組足跖增重顯著高于0 g/kg組。同時(shí)發(fā)現(xiàn)同劑量（10mg/kg）的超高壓乳鐵蛋白液較未超高壓的足跖增加厚度要大，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.6 對(duì)ConA刺激的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，結(jié)果如表6所示。

由表6可以看出，100mg/kg組對(duì)ConA刺激的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能顯著高于0 g/kg對(duì)照組。

2.7 對(duì)小鼠碳廓清能力的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，結(jié)果如表7所示。

由表7可以看出：1.67mg/kg～100mg/kg的乳鐵蛋白液（超高壓）和10mg/kg乳鐵蛋白液（未處理）均具有升高小鼠廓清指數(shù)的能力，表現(xiàn)為對(duì)吞噬功能的促進(jìn)效應(yīng)。與溶劑對(duì)照相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。10mg/kg高壓與未高壓劑量組均有極顯著差異，高壓與未高壓乳鐵蛋白對(duì)小鼠碳廓清能力的影響無差異。

表6 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)ConA刺激的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能的影響（x±s）Table6 Theeffectof lactoferrin（UHP）on ConA-induced spleen lymphocyte proliferation ability ofmouse（x±s）

表7 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠碳粒廓清功能的影響（x±s）Table7 Theeffectof lactoferrin（UHP）on carbon clearance ability inm ouse（x±s）

2.8 對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬熒光膠珠功能的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，結(jié)果如表8所示。

表8 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬熒光膠珠功能的影響（x±s）Table8 Theeffectof lactoferrin（UHP）on the function of phagocytosisof fluorescentbeadsofmousem acrophages（x±s）

由表8可見，100mg/kg乳鐵蛋白液（超高壓）具有促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬熒光膠珠的能力，無論是細(xì)胞吞噬率還是平均熒光強(qiáng)度均較溶劑對(duì)照組升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.9 對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響

經(jīng)口給予小鼠不同劑量組的乳鐵蛋白液（超高壓）1個(gè)月后，NK細(xì)胞活性經(jīng)sin-1P1/2（P為NK細(xì)胞活性，用小數(shù)表示）轉(zhuǎn)化后經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊性要求，用單因素方差分析方法中多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，結(jié)果如表9所示。

表9 乳鐵蛋白液（超高壓）對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響（x±s）Table9 Theeffectof lactoferrin（UHP）on theactivity of NK cells inm ice（x±s）

由表9可以看出，各劑量組與0 g/kg組相比對(duì)小鼠NK細(xì)胞活性的影響上無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 結(jié)果與討論

小鼠經(jīng)口給予乳鐵蛋白液（超高壓）30天后，100 mg/kg受試物可以增強(qiáng)小鼠脾臟產(chǎn)生抗體的細(xì)胞數(shù)目，同時(shí)10mg/kg和100mg/kg受試物還增加了血清中特異性抗體的滴度，因此判斷該受試物具有增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能的能力。但是處理與未處理的乳鐵蛋白在相同劑量下的作用，不完全一致，故認(rèn)為二者差異不明顯。100mg/kg受試物能夠增強(qiáng)小鼠的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)和T淋巴細(xì)胞增殖能力，故判斷該受試物具有增強(qiáng)體液免疫功能的作用。1.67、10mg/kg和100mg/kg的受試物增強(qiáng)小鼠的碳粒廓清指數(shù)，同時(shí)100mg/kg受試物能促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬熒光膠珠的能力，因此判斷該受試物具有促進(jìn)巨噬細(xì)胞吞噬的能力。各個(gè)劑量組小鼠的NK細(xì)胞活性與溶劑對(duì)照組相比未見明顯增強(qiáng)。

近些年對(duì)于乳鐵蛋白輔助增強(qiáng)免疫力的研究也特別多，有動(dòng)物和人體的研究。如2010年胡志和研究團(tuán)隊(duì)，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)2、20、200mg/kg·d增強(qiáng)免疫力的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為陽性，且20mg/kg·d最為顯著[12]。王艷萍[13]對(duì)乳鐵蛋白牛奶進(jìn)行了人體試食研究，對(duì)上海和北京倆地志愿者食用含有不同劑量（5mg/100mL和10mg/100mL）乳鐵蛋白牛奶產(chǎn)品，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)食用兩種不同劑量乳鐵蛋白牛奶產(chǎn)品的志愿者，在流感癥狀發(fā)生率、發(fā)生次數(shù)、癥狀持續(xù)天數(shù)、癥狀嚴(yán)重度、藥物治療天數(shù)和病假天數(shù)上均顯著低于安慰劑組志愿者，表明加入乳鐵蛋白的牛奶產(chǎn)品對(duì)提高志愿者免疫力水平有明顯作用。Petra Hellwega[14]用18只比格獵犬進(jìn)行免疫評(píng)價(jià)，通過口服分別設(shè)置0、120、1 800mg/kg乳鐵蛋白喂養(yǎng)四個(gè)星期，結(jié)果發(fā)現(xiàn)口服牛奶乳鐵蛋白明顯的影響狗的細(xì)胞免疫功能并能夠降低糞便中大腸菌及產(chǎn)氣莢膜菌的數(shù)量。本研究結(jié)果與胡志和研究結(jié)果在低劑量組有差異，其研究發(fā)現(xiàn)劑量為2 mg/kg·d即有免疫增強(qiáng)作用，而本研究10mg/kg·d仍未發(fā)現(xiàn)免疫增強(qiáng)作用，本研究與Pope研究結(jié)果相似，Pope[15]研究發(fā)現(xiàn)60、120mg/d乳鐵蛋白進(jìn)行狗的喂養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，未發(fā)現(xiàn)減少大腸菌群以及影響免疫功能。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，超高壓對(duì)功能有一定的影響，但無顯著差異。乳鐵蛋白增強(qiáng)免疫的原理及功效量仍需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，本研究證明在一定劑量下超高壓處理乳鐵蛋白具有提高免疫力的功效，同時(shí)研究對(duì)比發(fā)現(xiàn)含量較低的乳鐵蛋白不能達(dá)到增強(qiáng)免疫力的功能，超高壓對(duì)乳鐵蛋白的功能有一些影響，超高壓后的乳鐵蛋白結(jié)構(gòu)的變化與功能的變化仍待進(jìn)一步研究。

[1]朱玉英,王存芳.乳中乳鐵蛋白的研究進(jìn)展[J].中國乳品工業(yè),2015, 43(10):34-36

[2]PUDDU P,VALENTIP,GESSANIS.Immunomodulatory effects of lactoferrinonantigen presenting cells[J].Biochimie,2009,91(1):11-18

[3] BOCKMAN R,GUIDON P.Methods of enhancing wound healing and tissue repair:US,6287606[P].2001-09-11

[4]GIFFORDA JL,HURTERH N,VOGELH J.Lactoferricin:a lactoferrin derived peptide with antimicrobial,antiviral,antitumor and immunologicalproperties[J].CellMol Life Sci,2005,62(22):2588-2598

[5] LEGRAND D,ELASS E,CARPENTIER M,et al.Lactoferrin:a modulator of immune and infl ammatory responses[J].CellMol Life Sci,2005,62(22):2549-2559

[6]TOMITAM,WAKABAYASHIH,SHIN K,etal.Twenty-five years of research on bovine lactoferrin applications[J].Biochimie,2009, 91(1):52-57

[7]Brock JH．The physiology of lactoferrin[J]．Biochem Cell Biol，2002, 80(1):1－6

[8] Ruegg M.A calorimetric study of the thermal denaturation of whey proteins in simulatedmilk ultrafilatrate[J].Jdairy Res,1977,44(44): 1082-1085

[9]董新紅,趙謀明,蔣躍明.超高壓技術(shù)在蛋白質(zhì)食品加工中的應(yīng)用[J].食品工業(yè)科技,2012,37(2):451-454

[10]李仁杰,廖小軍,胡小松,等.超高壓對(duì)蛋白質(zhì)的影響[J].高壓物理學(xué)報(bào),2014,28(4):498-506

[11]中華人民共和國衛(wèi)生部.保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003版)[S].北京:中國衛(wèi)生部,2003:2-35

[12]胡志和,李娜,劉傳國,等.乳鐵蛋白免疫增強(qiáng)作用評(píng)價(jià)[J].食品科學(xué),2010,31(11):244-247

[13]王艷萍.乳鐵蛋白型牛奶改善人體免疫功能的研究[J].飲料工業(yè),2015,18(1):32-37

[14]Hellweg P,Krammerlukas S,Strasser A,et al.Effects of bovine lactoferrin on the immune system and the intestinalmicroflora of adultdogs[J].ArchivesofAnimalNutrition,2008,62(2):152-161

[15]Pope LL,Flickinger EA,Karr-Lilienthal LK,etal.Effectsof lactoferrin supplementation on ileal and total tract nutrient digestibility, gastrointestinalmicrobial populations,and immune characteristics of ileal cannulated,healthy,adult dogs[J].Arch Anim Nutr,2006,60 (1):10-22

Study on the Enhancing Immunity Function of Lactoferrin by Ultre High Pressure Processing

CHENWei1，CHENYun1，LIUYu1，LIZhi-wei1，SHIYu-dong1，WEIXue-tao2，MUZhi-shen1，*
（1.InnerMongoliaMeng Niu Dairy Industry（Group）Co.，LTD，Hohhot011500，InnerMongolia，China；2.SchoolofPublic Health，PekingUniversity，Beijing100191，China）

To study the function ofenhancing immune of lactoferrin by ultra high pressure proceed.Methods：Healthy femalemice ofB1/Fqwasas the research subjects，setting five doesgroupswith 1.67，10，100mg/kg·bw（lactoferrinwasproceed by ultrahigh pressure），and 0，10mg/kg·bw（lactoferrinwithoutultrahigh pressure）. themicewere given once a day bymonthwith the appropriate concentration of tested samples.Then theweight，thymus，spleen organ，ConA-induced spleen lymphocyte proliferation，RBC-induced DTH，the number of hemolytic plaque，halfofhemolytic serum（HC50），carbon clearance ability，macrophage phagocytosisof chicken erythrocytes，NK cellactivitywere detected onemonth with the tested samples.100mg group were significantly higher than control group（P<0.05） in humoral immunity，cellular immunity function，promote macrophage phagocytic function，socan judge the 100mg dose group can be judgeenhanced immune function in mice.The resultsshowed that lactoferrin（UHP）stillhad enhancing immune function.

lactoferrin；ultrahigh pressure（UHP）；animal clinical trial；enhancing immune

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.24.039

2016-08-31

內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目（201502056）

陳偉（1980—），男（漢），工程師，碩士研究生，從事乳制品及其功能研究工作。

*通信作者：母智深，從事于乳制品研究及管理工作。