ER、PR和HER2免疫組化檢測(cè)在乳腺癌穿刺活檢中的應(yīng)用

潘超　夏想厚

1.浙江省腫瘤醫(yī)院病理科，浙江杭州310022；2.浙江省腫瘤醫(yī)院乳腺科，浙江杭州310022

ER、PR和HER2免疫組化檢測(cè)在乳腺癌穿刺活檢中的應(yīng)用

潘超1夏想厚2

1.浙江省腫瘤醫(yī)院病理科，浙江杭州310022；2.浙江省腫瘤醫(yī)院乳腺科，浙江杭州310022

目的研究乳腺癌手術(shù)標(biāo)本與穿刺活檢組織中人類表皮生長(zhǎng)因子受體-2（HER2）、孕激素受體（PR）、雌激素受體（ER）免疫組化檢測(cè)的準(zhǔn)確性。方法選取2014年8月～2015年8月間在本院實(shí)施乳腺癌根治術(shù)患者30例為研究對(duì)象，比較手術(shù)中切除標(biāo)本和術(shù)前穿刺活檢HER2、ER、PR免疫組化檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果手術(shù)前與手術(shù)中ER陽(yáng)性分別為24例（80.0%）、26例（86.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中PR陽(yáng)性分別為21例（70.0%）、23例（76.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中的HER2陽(yáng)性分別為18例（60.0%）、20例（66.7%）。組織學(xué)一致性、HER2為83.3%，PR為90.0%，ER為93.3%。PR與ER檢測(cè)的一致性較高，HER2的一致性則相對(duì)較低。結(jié)論P(yáng)R、ER穿刺活檢與術(shù)中標(biāo)本的一致性較高，HER2較低，因此，需綜合考慮各方面因素再進(jìn)行手術(shù)方案確定。

孕激素受體；雌激素受體；人類表皮生長(zhǎng)因子受體-2（HER2）；免疫組化；乳腺癌

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，目前已居于女性惡性腫瘤的第二位，每年全世界有100多萬(wàn)新增乳腺癌病例，其中有40多萬(wàn)死亡[1]。在絕經(jīng)期前后、40～60歲女性中發(fā)病率較高，常發(fā)病于乳腺上皮組織[2]。乳腺腫瘤一般先采用影像學(xué)方法診斷，然后以病理活檢確診，手術(shù)后對(duì)切除的組織進(jìn)行切片活檢為金標(biāo)準(zhǔn)，但是術(shù)前穿刺活檢也有重要價(jià)值。乳腺粗針穿刺活檢是取得乳腺腫瘤標(biāo)本的首選方法，可以通過此標(biāo)本檢測(cè)雌孕激素及HER2的表達(dá)情況而制定出針對(duì)性的治療方案[3]。病理活檢可采用細(xì)胞學(xué)方法和免疫組織化學(xué)法（免疫組化法），但是臨床實(shí)踐表明，細(xì)胞學(xué)方法不方便進(jìn)行定量和定位，借鑒性較差[4，5]。而免疫組化法通過抗原抗體反應(yīng)對(duì)組織切片或標(biāo)本中的特定化學(xué)成分進(jìn)行標(biāo)記，不僅能定性，還能定位、定量[6，7]。選擇合適的腫瘤標(biāo)志物對(duì)確定乳腺癌的病情進(jìn)展和病理分型十分重要[8-10]。本文主要探討穿刺活檢時(shí)人類表皮生長(zhǎng)因子受體-2（HER2）、孕激素受體（PR）、雌激素受體（ER）免疫組化檢測(cè)的準(zhǔn)確程度，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

以2014年8月～2015年8月間在本院實(shí)施乳腺癌根治術(shù)患者30例為研究對(duì)象，術(shù)前檢測(cè)凝血時(shí)間、血常規(guī)均正常，均未實(shí)施放化療，穿刺活檢在手術(shù)前進(jìn)行，均呈浸潤(rùn)性癌?；颊呔鶠榕?，年齡36～63歲，平均（50.1±2.7）歲；右乳14例（46.7%），左乳16例（53.3%）；病灶大小8～22 mm，平均（13.3±1.5）mm；病理分期：T1期2例（6.7%），T2期19例（63.3%），T3期9例（30.0%）。

1.2方法

1.2.1穿刺取樣[11，12]超聲檢查患側(cè)乳房，確定病變大小與部位，在體表做穿刺點(diǎn)標(biāo)記。仰臥位，對(duì)皮膚做常規(guī)消毒，探頭涂抹少量耦合劑，2%利多卡因在穿刺點(diǎn)逐層浸潤(rùn)麻醉，以破皮針在皮膚上刺一小口，超聲引導(dǎo)下將活檢針尖送達(dá)目的病灶，在活檢槍發(fā)出后，將針快速拔出，在10%福爾馬林液體中放置取下的組織條芯，行組織病理檢查，完成后對(duì)活檢部位壓迫止血，包扎消毒。

1.2.2免疫組化檢測(cè)[13，14]穿刺標(biāo)本以常規(guī)辣根過氧化物酶法（HRP）檢測(cè)HER2、ER、PR（試劑盒選用上海美軒生物科技有限公司產(chǎn)品）（檢測(cè)方法選用SP法）。細(xì)胞膜是HER2表達(dá)部位，＞30%為陽(yáng)性；細(xì)胞核是PR、ER陽(yáng)性表達(dá)部位，＞1%的表達(dá)數(shù)量為陽(yáng)性。對(duì)確診患者實(shí)施手術(shù)，切除的病灶進(jìn)行石蠟切片，以滴加新鮮配制的DAB工作液100μL（以覆蓋組織為宜）染色。若DAB顯色呈黃色，則判定結(jié)果為陽(yáng)性。三種標(biāo)志物以三個(gè)切片進(jìn)行檢測(cè)。

1.3觀察指標(biāo)

對(duì)比穿刺前、術(shù)中數(shù)值。術(shù)中標(biāo)本檢測(cè)與穿刺免疫組化一致則同屬陰性，同為陽(yáng)性時(shí)程度差異不明顯的情況下等同于一致。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理研究中的數(shù)據(jù)與資料，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1術(shù)中標(biāo)本和術(shù)前穿刺活檢的HER2、PR、ER表達(dá)情況分析

手術(shù)前與手術(shù)中ER陽(yáng)性分別為24例（80.0%）、26例（86.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中PR陽(yáng)性分別為21例（70.0%）、23例（76.7%）；手術(shù)前與手術(shù)中的HER2陽(yáng)性分別為18例（60.0%）、20例（66.7%）。見表1。

表1　手術(shù)中標(biāo)本和術(shù)前穿刺活檢的HER2、PR、ER表達(dá)情況[n（%）]

2.2手術(shù)標(biāo)本和穿刺活檢組織學(xué)一致性情況分析

分析其組織學(xué)一致性，HER2為83.3%，PR為90.0%，ER為93.3%。PR與ER檢測(cè)的一致性較高，HER2的一致性則相對(duì)較低（ER與PR一致性比較，χ2=0.00，P＞0.05；ER與HER2一致性比較，χ2=0.65，P＞0.05；HER2與PR一致性比較，χ2=0.14，P＞0.05）。見表2。

表2　手術(shù)標(biāo)本和穿刺活檢組織學(xué)一致性情況

3　討論

乳腺由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成，原位乳腺癌并不致命，但癌細(xì)胞之間連接松散，容易脫落[15]，游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉(zhuǎn)移，危及生命。組織穿刺活檢的方法是診療癌腫技術(shù)進(jìn)步的結(jié)果，在臨床中的應(yīng)用較為廣泛[16]，但需要選擇合適的腫瘤標(biāo)志物。目前對(duì)于標(biāo)志物的要求主要有靈敏度、特異度高，可反映腫瘤的動(dòng)態(tài)變化，有器官特異性，可為臨床選擇化療藥提供依據(jù)等。

目前免疫組化技術(shù)在乳腺癌患者中的應(yīng)用越來(lái)越成熟，被廣泛應(yīng)用在乳腺癌中的ER、PR、HER2等檢測(cè)技術(shù)，不僅作出病變性質(zhì)診斷，還對(duì)其病變性質(zhì)在臨床預(yù)后關(guān)系選擇個(gè)性化治療提供依據(jù)[17]。腫瘤標(biāo)志物的種類很多，可分為癌胚抗原、糖類、酶類、蛋白質(zhì)類、激素類、基因類等。

HER2是一種膜蛋白，30%的乳腺癌患者中存在HER2基因過表達(dá)，HER2陽(yáng)性的乳腺癌患者對(duì)內(nèi)分泌治療的反應(yīng)較差，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)可提示患者的預(yù)后情況。其表達(dá)狀況屬于乳腺癌曲妥珠單抗靶向治療的選擇依據(jù)，也是判斷乳腺癌預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)[18]。雌激素受體（ER）是一種蛋白質(zhì)分子，它們較多地存在于靶器官的細(xì)胞內(nèi)，可與激素發(fā)生特異性結(jié)合而形成激素-受體復(fù)合物，使激素發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。ER是個(gè)核受體，其主要配體是17-β-雌二醇，作為配體依賴性轉(zhuǎn)錄因子來(lái)調(diào)節(jié)涉及乳腺癌細(xì)胞增殖、存活、侵襲和腫瘤新生血管形成的下游基因，這種作用能夠通過封閉受體或剝奪循環(huán)配體而減弱[19]。孕激素受體（PR）作為配體激活的轉(zhuǎn)錄因子，是類固醇激素受體家族的一員。PR有兩個(gè)異構(gòu)體PR-A（94kDa）和PR-B（114kDa）。雖然它們的轉(zhuǎn)錄活性相反，但它們的DNA和配體結(jié)合親和力相似。PR-B是孕激素敏感基因的激活劑，而PR-A則抑制PR-B功能。研究發(fā)現(xiàn)HER2、PR、ER均可以作為檢測(cè)乳腺癌的重要指標(biāo)[20]，ER、PR的表達(dá)決定了治療方案的選擇。

在本次研究中，PR與ER的術(shù)前術(shù)中檢測(cè)一致性較高，HER2則較低，提示通過穿刺活檢檢測(cè)雌孕激素受體可為臨床提供較好的內(nèi)分泌治療的依據(jù)。但HER2的一致性為83.3%，而且在穿刺活檢中的陽(yáng)性表達(dá)率偏低，說(shuō)明在靶向治療的選擇中，穿刺活檢的HER2免疫組化結(jié)果指導(dǎo)意義有限，應(yīng)根據(jù)手術(shù)標(biāo)本的免疫組化檢測(cè)等較為成熟的方法來(lái)指導(dǎo)采用靶向治療。

綜上所述，在診治乳腺癌的過程中，術(shù)前免疫組化檢測(cè)有其使用價(jià)值，應(yīng)綜合考慮各項(xiàng)因素后決定手術(shù)方法的選用。

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Application of ER,PR and HER2 immunohistochemical tests in breast cancer biopsy

PAN Chao1XIA Xianghou2
1.Department of Pathology,Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China；2.Department of Galactophore,Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China

Objective To study the accuracy of HER2,PR and ER immunohistochemical tests in the surgical sample and biopsy tissue of breast cancer.Methods A tiotal of 30 patients,treated with radical mastectomy in our hospital from August 2014 to August 2015,were selected as research subjects,and the results of HER2,ER and PR immunohistochemical test in the surgical resection samples and preoperative biopsy were compared.Results The number of positive cases of ER before the surgery and during the surgery were 24(80.0%)and 26(86.7%)respectively；the number of positive cases of PR before the surgery and during the surgery were 21(70.0%)and 23(76.7%)respectively；the num ber of positive cases of HER2 before the surgery and during the surgery were 18(60.0%)and 20(66.7%)respectively. The histological consistency rates of HER2,PR and ER were 83.3%,90.0%and 93.3%respectively.The consistency rates of PR and ER were higher,while the consistency rate of HER2 was relatively lower.Conclusion The consistency rate of PR and ER in biopsy and surgical sample is higher,while that of HER2 is lower.Hence,various factors should be put into consideration before the surgical protocol is determined.

Progesterone receptor；Estrogen receptor；HER-2；Immunohistochemistry；Breast cancer

R730.4

A

1673-9701（2016）29-0026-03

浙江省自然科學(xué)基金（LY12H16030）

（2016-07-12）