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    伊犁河谷不同時(shí)期小麥高分子量谷蛋白亞基組成分析

    2016-12-20 14:52張喜琴李衛(wèi)華簡大為蘇甫熱木
    現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技 2016年20期
    關(guān)鍵詞:伊犁河谷小麥

    張喜琴++李衛(wèi)華++簡大為++蘇甫熱木+張燕++祁軍

    摘要 為了了解伊犁河谷小麥的品質(zhì)狀況,采用SDS-PAGE電泳技術(shù)對伊犁河谷50多年來不同歷史時(shí)期主要推廣的小麥品種(系)高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)組成、變異及出現(xiàn)頻率進(jìn)行了分析。結(jié)果表明:在這些品種中Glu-A1、Glu-B1、Glu-D1位點(diǎn)上的等位變異分別為4、6、7種,各自位點(diǎn)的優(yōu)勢亞基分別是null、7+8、2+12,其頻率分別是49.1%、43.9%、64.9%。在Glu-1位點(diǎn)共檢測出28種亞基組合,其中組合(null,7+8,2+12)的頻率最高,為19.2%,其次是組合(1,7+8,2+12)和(1,7+9,2+12),其頻率分別為12.3%、10.5%,其他亞基組合的頻率均低于10%。另外,在Glu-A1位點(diǎn)上還檢測到了1個(gè)新的亞基1*,Glu-D1位點(diǎn)上檢測到了單亞基5、12。從供試材料中篩選出在2個(gè)基因位點(diǎn)上有優(yōu)質(zhì)亞基的小麥品種15份,在3個(gè)基因位點(diǎn)上均有優(yōu)質(zhì)亞基的小麥品種7份,可供優(yōu)質(zhì)小麥育種利用。

    關(guān)鍵詞 小麥;高分子量谷蛋白亞基;伊犁河谷

    中圖分類號 TS213 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739(2016)20-0257-03

    小麥高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)的組成與小麥面粉的理化谷蛋白僅占胚乳儲藏蛋白的10%,但其數(shù)目和組成與小麥的烘烤品質(zhì)關(guān)系密切[1-2]。

    伊犁河谷是新疆小麥主要種植區(qū)之一,小麥栽培歷史悠久,種質(zhì)資源豐富,蘊(yùn)含了大量的優(yōu)良基因,有待開發(fā)利用。本研究旨在通過對伊犁河谷50多年來小麥品種3次更新推廣的本地育成與引進(jìn)的57個(gè)主栽小麥品種(系)高分子量谷蛋白亞基組成進(jìn)行分析,了解伊犁河谷小麥高分子量谷蛋白亞基構(gòu)成及優(yōu)質(zhì)亞基存在形式和分布規(guī)律,從而為這些材料的進(jìn)一步利用和伊犁小麥乃至新疆小麥品質(zhì)的改良提供依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    供試材料為伊犁河谷50多年來不同歷史時(shí)期主要育成(引進(jìn))推廣的57個(gè)小麥品種(系)。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 HMW-GS的提取。每份樣品取1粒小麥種子研磨后放入15 mL離心管加入0.5 mL 50%異丙醇,60 ℃水浴30 min,其間攪動2次,10 000 r/min離心3 min,棄上清液;重復(fù)步驟2次;在殘留物中加75 μL提取液B1混勻,60 ℃水浴30 min;加入75 μL提取液B2混勻,60 ℃水浴烷化處理1 h,10 000 r/min離心10 min;取100 μL上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中,加入0.4 mL丙酮搖勻,靜置1.5~2.0 h,10 000 r/min離心10 min,棄上清液,在沉淀中加70 μL,樣品提取液2 h以上。

    1.2.2 HMW-GS的電泳。SDS-PAGE凝膠電泳采用不連續(xù)分離系統(tǒng)。制膠:采用10%分離膠(pH值8.8)和3.7%濃縮膠(pH值6.8)。電泳:上、下泳槽內(nèi)分別倒入適量的電極緩沖液,用穩(wěn)流進(jìn)行電泳。指示劑進(jìn)入分離膠后用15 mA電流進(jìn)行電泳,指示劑出帶后繼續(xù)電泳1 h。染色和脫色:考馬斯亮藍(lán)染色2 d,蒸餾水脫色直至背景淺淡,帶型清晰照相。谷蛋白亞基編碼和命名根據(jù)Payne and Lawrence的方法命名亞基。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 亞基分布與分析

    以中國春小麥(N,7+8,2+12)為對照材料,對57份小麥的高分子量谷蛋白亞基進(jìn)行鑒定分析,結(jié)果分別見表1、2,部分材料的高分子谷蛋白亞基電泳圖譜見圖1。

    由表1和表2可以看出,伊犁河谷近50年來小麥品種3次更新推廣的本地育成與引進(jìn)的主栽品種具有較豐富的HMW-GS類型和亞基組合類型。在57份材料中共有16種亞基類型,Glu-A1位點(diǎn)4種(null、1*、2*、1),分別占49.1%、33.3%、17.5%、1.75%;Glu-B1位點(diǎn)6種(7+8、7+9、17+18、13+19、13+16、14+15),分別占43.9%、35.1%、8.8%、7%、3.5%、1.7%;Glu-D1位點(diǎn)7種(2+12、5+10、5+12、2+10、2.2+12、5、2),分別占64.9%、13.8%、14%、7%、1.75%、1.75%、1.75%,同時(shí)存在2和5這2種單亞基;各自位點(diǎn)的優(yōu)勢亞基分別是null(49.1%)、7+8(43.9%)、2+12(64.9%),優(yōu)質(zhì)亞基5+10的頻率是13.6%。

    由表2可看出,伊犁河谷1960—1980年引進(jìn)推廣的小麥品種在Glu-A1位點(diǎn)除了無芒冬麥存在1*和2*這2種亞基,其他均為null亞基;Glu-B1位點(diǎn)基本以7+8、7+9亞基為主,稀有亞基13+16出現(xiàn)頻率較高,占到同期品種頻率的21.4%,還有13+19亞基存在;Glu-D1位點(diǎn)以2+12亞基為主,只有波蘭麥存在優(yōu)質(zhì)亞基5+10。1980—2000年以本地育成伊農(nóng)系列品種為主栽品種,這些品種經(jīng)過多代選育,多數(shù)在2個(gè)基因位點(diǎn)上有優(yōu)質(zhì)亞基,Glu-A1位點(diǎn)以1亞基為主,Glu-B1位點(diǎn)以7+8亞基為主。2000年以后,育種及引進(jìn)推廣的品種(系)在各個(gè)位點(diǎn)上的亞基組合類型也更為豐富,優(yōu)質(zhì)亞基出現(xiàn)頻率較高。

    2.2 不同亞基組合在供試材料中的分布

    由表3可知,57份材料中,Glu-1位點(diǎn)共檢測出28種亞基組合類型,類型較多[3-4]。國內(nèi)外多數(shù)研究表明,Glu-A1位點(diǎn)1和2*亞基,Glu-B1位點(diǎn)7+8、17+18、13+16、14+15亞基,Glu-D1位點(diǎn)6種5+10、5+12亞基為優(yōu)質(zhì)亞基[5]。據(jù)此,從供試材料中篩選出在2個(gè)基因位點(diǎn)上有優(yōu)質(zhì)亞基的小麥品種15份,在3個(gè)基因位點(diǎn)上均有優(yōu)質(zhì)亞基的小麥品種7份。

    3 結(jié)論與討論

    在57份材料中發(fā)現(xiàn)了較多的普通小麥罕見的Glu-1編碼,如Glu-A1編碼中的HMW-GS亞基1*、2*,Glu-B1編碼中的亞基17+18、13+16、14+15、2.2+12、13+19,Glu-D1編碼中的單亞基5、12。

    在Glu-1位點(diǎn)共發(fā)現(xiàn)16種HMW-GS和28種不同亞基組合形式,HMW-GS變異較豐富,亞基組合類型多。其中,在Glu-A1位點(diǎn)優(yōu)質(zhì)亞基(1*、1、2*)的頻率為51.7%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國內(nèi)育成品種(30.6%~42.6%)和新疆小麥品種(30.7%)中的頻率,在Glu-B1位點(diǎn)優(yōu)質(zhì)亞基(7+8、17+18、13+16、14+15)的頻率為61.4%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國內(nèi)育成品種(42.00%~56.36%)和新疆小麥品種(39.77%)中的頻率,在Glu-D1位點(diǎn)優(yōu)質(zhì)亞基(5+10、5+12)的頻率為26.9%,高于國內(nèi)育成品種(15.7%~18.6%),低于新疆小麥品種(36.36%)中的頻率[6-7]。

    總之,近30多年來,自育和引進(jìn)品種(系)中優(yōu)質(zhì)亞基1、2*和7+8的頻率大幅增長,但5+10和5+12亞基頻率還有待提高[8-10]。

    4 參考文獻(xiàn)

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    [9] 李玉冰,裴玉賀,王海娟,等.快速蛋白液相色譜分離小麥高分子量谷蛋白亞基方法的研究[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(5):98-101.

    [10] 祝長青,李艷紅,覃建兵.新疆主栽小麥品種高分子量麥谷蛋白亞基組成分析[J].華中師范大學(xué)學(xué)報(bào),2008,4(3):431-434.

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