紅樹莓不同溶劑提取物抗氧化活性

寧瑋鈺,馮建文,呂長山,王金玲,*,曠 慧,姚麗敏

(1.東北林業(yè)大學(xué) 林學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150040; (2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 應(yīng)用技術(shù)學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150030)

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紅樹莓不同溶劑提取物抗氧化活性

寧瑋鈺1,馮建文1,呂長山2,王金玲1,*,曠 慧1,姚麗敏1

(1.東北林業(yè)大學(xué) 林學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150040; (2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 應(yīng)用技術(shù)學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150030)

以紅樹莓鮮果為原料,采用體外抗氧化方法研究不同溶劑提取對紅樹莓抗氧化活性的影響。分別以水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、100%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇為提取溶劑,測定提取物中總酚、黃酮、原花青素和花色苷含量;研究提取物體外抗氧化活性的差異;對活性物質(zhì)含量與抗氧化能力進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果表明,50%乙醇粗提物的總酚、黃酮、原花青素和花色苷含量均最高,分別為257.19、10.48、406.45、22.47 mg/100 g;7種不同紅樹莓提取物中50%乙醇提取物的總還原力與VC相近,50%和75%乙醇提取物對DPPH·清除能力強(qiáng)于VC,7種溶劑提取物對羥基自由基清除能力均弱于VC;紅樹莓7種溶劑提取物中總酚與對DPPH·的清除率及總還原能力的相關(guān)性較大。比較發(fā)現(xiàn),50%～75%的乙醇水溶液能夠更好的溶出紅樹莓中的活性成分,而具有更強(qiáng)的抗氧化活性。

紅樹莓,不同溶劑,提取物,抗氧化活性

紅樹莓(RubusideausL.)屬薔薇科漿果,俗稱托盤、覆盆子、梅子等,它營養(yǎng)豐富,擁有“黃金水果”的美譽(yù)[1]。紅樹莓果實(shí)中具有多種生物活性。肖俊霞等[2]發(fā)現(xiàn)以鹽酸酸化的80%乙醇提取的紅樹莓花色苷提取物具有良好的抗氧化活性;李小萍[3]發(fā)現(xiàn)經(jīng)70%丙酮提取的紅樹莓鞣花酸提取物具有抗氧化活性及抑菌活性;韓加[4]研究發(fā)現(xiàn)90%乙醇提取經(jīng)石油醚脫脂,乙酸乙酯、正丁醇依次萃取的紅樹莓提取物對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)有降壓作用;Chen等[5]研究發(fā)現(xiàn)野生樹莓經(jīng)模擬胃液(豬胃蛋白酶與鹽酸混合,pH2)處理后能夠抑制誘導(dǎo)型丙烯酰胺對細(xì)胞的氧化作用。

對紅樹莓抗氧化活性成分的研究已有報(bào)道,主要針對某一種或幾種成分的抗氧化能力,而對總提取物抗氧化活性的研究鮮有報(bào)道[6]。本研究采用不同溶劑對紅樹莓進(jìn)行提取,分析比較不同溶劑粗提物的抗氧化活性,并研究抗氧化能力與其中所含活性成分的相關(guān)性,旨在探明溶劑對紅樹莓提取物抗氧化能力的影響,為紅樹莓作為天然抗氧化劑的開發(fā)與利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

紅樹莓(秋福,Autumn Bliss) 采自黑龍江省尚志市,速凍處理后運(yùn)回東北林業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程實(shí)驗(yàn)室凍藏;沒食子酸、蘆丁、兒茶素(分析純) 上海源葉生物科技有限公司;福林-酚試劑、DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical;1,1-二苯基-2-苦基肼自由基)(分析純) Sigma公司;無水乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、硫酸亞鐵、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、三氯化鐵、抗壞血酸、甲醇、硝酸鋁、鐵氰化鉀、三氯乙酸、香草醛等 均為分析純。

RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;DHG-9240型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有限公司;ALC-1104電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;TDL-5-W臺(tái)式低速離心機(jī) 湖南星科科學(xué)儀器有限公司;FA2004電子天平 上海天平儀器廠;722S可見分光光度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 紅樹莓不同溶劑提取物制備 稱取(10.0±0.16) g紅樹莓樣品,分別以水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、100%乙醇、乙酸乙酯和正丁醇做提取溶劑,按1∶10(w/v)的料液比提取。

具體提取流程如下:速凍紅樹莓→室溫避光解凍→研磨→不同提取溶劑恒溫水浴密封提取4 h(45 ℃)→離心去濾渣(3000 r/min,15 min)→真空旋轉(zhuǎn)濃縮(49 ℃,0.1 MPa)→蒸餾水定容→4 ℃下保藏。

1.2.2 紅樹莓提取物活性成分含量的測定

1.2.2.1 福林-酚法測定總酚的含量 參考Pantelidis等[7]方法測定。以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品。以沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),溶液吸光值為縱坐標(biāo),得到標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=8.3487x+0.0383(R2=0.9971)?？偡雍勘硎緸槊?00克紅樹莓果實(shí)(鮮重)中總酚的毫克數(shù)。

1.2.2.2 硝酸鋁比色法測定黃酮的含量 參考Zhang等[8]方法測定。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品。以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),溶液吸光值為縱坐標(biāo),得到標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=1.9551x+0.0118(R2=0.9952)。黃酮含量表示為每100克紅樹莓果實(shí)(鮮重)中黃酮的毫克數(shù)。

1.2.2.3 香草醛-濃硫酸法測定原花青素的含量 參考薄艷秋[9]方法測定。以兒茶素為標(biāo)準(zhǔn)品。以兒茶素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mg/mL)為橫坐標(biāo),溶液吸光值為縱坐標(biāo),得到標(biāo)準(zhǔn)曲線為:y=0.8953x+0.0011(R2=0.9964)。原花青素含量表示為每100克紅樹莓果實(shí)(鮮重)中原花青素的毫克數(shù)。

1.2.2.4 pH示差法測定花色苷的含量 參考Verma等[10]方法測定。按照下列公式計(jì)算提取液中花色苷含量(以每100克紅樹莓中矢車菊素-3-葡萄糖苷含量計(jì)):

X=ΔTVFM×1000×100/(εbm)

式中:X為紅樹莓花色苷含量,(mg/100 g);ΔT為吸光值(ApH1-ApH4.5)的差值;V為稀釋體積,L;F為稀釋倍數(shù);M為矢車菊素-3-葡萄糖苷的相對分子質(zhì)量(449 g/mol);ε為矢車菊素-3-葡萄糖苷的摩爾消光系數(shù)[29600 L/(mol·cm)];m為樣品質(zhì)量,g;b為比色皿厚度(1 cm)。

1.2.3 紅樹莓提取物清除DPPH·能力測定 參考Fagerlund等[11]方法,略有改動(dòng)。配制0.2 mmol/L DPPH乙醇溶液,放在棕色試劑瓶中于4 ℃保存,在試管中加入600 μL的DPPH乙醇溶液及300 μL不同濃度的樣品溶液,混合均勻,室溫避光放置30 min,于517 nm波長下用無水乙醇調(diào)零,并測定吸光值A(chǔ)1;將DPPH乙醇溶液用等體積的無水乙醇代替,其他操作相同,測定吸光值A(chǔ)2;將樣品溶液用等體積無水乙醇溶液代替,其他操作相同,測定吸光值A(chǔ)0。清除率用下式計(jì)算:

清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100

式中:A0為空白的吸光值;A1為試樣的吸光值;A2為樣品吸光值。

1.2.4 紅樹莓提取物清除羥基自由基能力測定 參考涂宗財(cái)?shù)萚12]和姚興存等[13]方法,略有改動(dòng)。將1.0 mL的6 mmo1/L FeSO4溶液,1.0 mL的8 mmol/L H2O2溶液,l.0 mL不同濃度的樣品溶液,l.0 mL的6 mmol/L水楊酸溶液依次加入試管,反應(yīng)混合物體系共4.0 mL?；靹蚝箪o置30 min,于510 nm波長下用蒸餾水調(diào)零,并測定吸光值A(chǔ)1;將水楊酸溶液用等體積的蒸餾水代替,其他操作相同,測定吸光值A(chǔ)2;將樣品溶液用等體積蒸餾水代替,其他操作相同,測定吸光值A(chǔ)0。清除率用下式計(jì)算:

清除率(%)=[l-(A1-A2)/A0]×100

式中:A0為空白的吸光值;A1為試樣的吸光值;A2為樣品的吸光值。

1.2.5 紅樹莓提取物總還原力測定 參考周波等[14]方法,略有改動(dòng)。在1.0 mL pH6.6的磷酸鹽緩沖液中加入1.0 mL不同濃度的樣品液,再加入1.0 mL質(zhì)量濃度為1%的鐵氰化鉀溶液,混合均勻后,于50 ℃恒溫水浴20 min,再加入1.0 mL體積分?jǐn)?shù)10%的三氯乙酸溶液,離心10 min(3000 r/min),取2 mL上層清液加入2 mL蒸餾水和0.4 mL質(zhì)量濃度為0.1% FeCl3溶液,于700 nm波長下用蒸餾水調(diào)零并測定吸光值;吸光值越高,還原能力越強(qiáng)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溶劑對紅樹莓活性成分提取效果的影響

2.1.1 不同溶劑對總酚提取效果的影響 紅樹莓不同溶劑提取物中總酚含量的測定結(jié)果見圖1。

紅樹莓7種不同溶劑提取物中總酚含量在77.01～257.19 mg/100 g之間。紅樹莓7種不同溶劑提取物中總酚含量均存在極顯著差異(p<0.01),其中50%乙醇提取物總酚含量最高,為257.19±0.84 mg/100 g,是正丁醇提取物多酚含量的3.33倍。對比紅樹莓不同溶劑提取物中總酚含量發(fā)現(xiàn),根據(jù)相似相溶原理,在相同提取條件下乙醇水溶液能夠更好的溶解樣品中的酚類化合物[15]。由于多酚類化合物種類較多,不同極性溶劑對不同酚類化合物的溶解性不同,因此可能會(huì)得到成分和含量均存在差異的提取物。

2.1.2 不同溶劑對黃酮提取效果的影響 紅樹莓不同溶劑提取物黃酮含量的測定結(jié)果見圖2。

圖2 紅樹莓不同溶劑提取物的黃酮含量Fig.2 The contents of flavonoids in red raspberry extracts with various solvents

紅樹莓7種不同溶劑提取物中黃酮含量在3.45～10.48 mg/100 g之間。不同溶劑對黃酮的提取效果具有不同程度的影響。50%乙醇提取物中黃酮含量最高,為(10.48±0.32) mg/100 g,25%乙醇提取物中黃酮含量次之,為(8.09±0.03) mg/100 g。水提物、75%乙醇提取物、100%乙醇提取物和乙酸乙酯提取物中黃酮含量無顯著差異(p>0.05)。正丁醇提取物中黃酮含量最低,只有(3.44±0.07) mg/100 g,與50%乙醇提取物中黃酮含量差異極顯著(p<0.01),這種差異可能在于黃酮的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),使其更易溶于極性較大溶劑,因此影響了不同樣品中黃酮的溶出。

2.1.3 不同溶劑對原花青素提取效果的影響 紅樹莓不同溶劑提取物原花青素含量的測定結(jié)果見圖3。

圖3 紅樹莓不同溶劑提取物的原花青素含量Fig.3 The contents of proanthocyanidins in red raspberry extracts with various solvents

紅樹莓7種不同溶劑提取物中原花青素含量,在202.79～406.45 mg/100 g之間。不同溶劑對原花青素的提取效果具有不同程度的影響。其中,50%乙醇提取物中原花青素含量最高為406.45±16.71 mg/100 g,與25%乙醇提取物中原花青素含量無顯著差異(p>0.05)。水提物中原花青素含量相對較高。乙酸乙酯提取物中原花青素含量最低,與其他6種提取物中原花青素含量差異極顯著(p<0.01)。對比紅樹莓7種提取物中原花青素的含量發(fā)現(xiàn),極性較大的溶劑(50%乙醇、25%乙醇、水)中的原花青素含量高于極性較小的溶劑(100%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯)。涂宗財(cái)?shù)萚16]研究不同溶劑紅薯葉提取物中的花青素含量發(fā)現(xiàn),丙酮比乙醇對花青素有更好提取效率,而乙酸乙酯提取物中未檢測到。

2.1.4 不同溶劑對花色苷提取效果的影響 紅樹莓不同溶劑提取物花色苷含量的測定結(jié)果見圖4。

圖4 紅樹莓不同溶劑提取物的花色苷含量Fig.4 The contents of anthocyanins in red raspberry extracts with various solvents

紅樹莓7種不同溶劑提取物中花色苷含量在10.15～22.47 mg/100 g之間。不同溶劑對花色苷的提取效果具有不同程度的影響。乙酸乙酯提取物中花色苷含量最低,50%乙醇提取物中花色苷含量最高,是乙酸乙酯提取物的2.21倍,差異極顯著(p<0.01)。100%、75%乙醇提取物與水提物的花色苷含量無顯著差異(p>0.05)。李立[17]研究表明60%乙醇是黑莓果渣活性物質(zhì)的最佳提取溶劑;李穎暢等[18]研究發(fā)現(xiàn)60%乙醇是提取藍(lán)莓中花色苷的最佳溶劑。由此可以看出溶劑極性大小,影響了提取物中花色苷的含量,而50%乙醇水溶液能夠更好的溶出紅樹莓中花色苷。

2.2 提取物抗氧化活性研究

2.2.1 對DPPH·清除能力分析 紅樹莓不同溶劑提取物對DPPH·清除率測定結(jié)果見圖5。

表1 紅樹莓不同溶劑提取物清除DPPH·的IC50值

Table 1 The IC50values of scavenging DPPH· of red raspberry extracts with various solvents

樣品IC50(mg/mL)樣品IC50(mg/mL)水提物0529±0072100%乙醇提取物0818±003525%乙醇提取物0320±0021乙酸乙酯提取物0976±001050%乙醇提取物0237±0007正丁醇提取物0858±000875%乙醇提取物0277±0007VC0292±0050

表2 紅樹莓不同溶劑提取物清除羥基自由基的IC50值

Table 2 The IC50values of scavenging OH· radicals of red raspberry extracts with various solvents

樣品IC50(mg/mL)樣品IC50(mg/mL)水提物1404±0119100%乙醇提取物4079±024825%乙醇提取物2108±0023乙酸乙酯提取物1560±003850%乙醇提取物1668±0091正丁醇提取物1657±067975%乙醇提取物1329±0318VC0606±0050

圖5 紅樹莓不同溶劑提取物對DPPH·清除率Fig.5 The scavenging capacities of red raspberry extracts with various solvents against DPPH·

由圖5可知,當(dāng)樣品濃度在0.1～1 mg/mL之間時(shí),紅樹莓不同溶劑提取物清除DPPH·的能力隨著濃度的增大而增強(qiáng);當(dāng)濃度大于1 mg/mL時(shí),變化趨勢平緩。在濃度為0.3 mg/mL時(shí),50%乙醇提取物和75%乙醇提取物對DPPH·的清除率分別為69.89%和63.86%,顯著高于其他濃度乙醇提取物和VC,并在濃度大于1 mg/mL時(shí)對DPPH·清除率與VC相近。紅樹莓不同溶劑提取物清除DPPH·的IC50值見表1。

由表1可知,紅樹莓50%乙醇提取物和75%乙醇提取物對DPPH·清除率的IC50值均小于VC,25%乙醇提取物IC50值與VC接近,表明紅樹莓不同溶劑提取物都具有較強(qiáng)的清除DPPH·能力。紅樹莓不同溶劑提取物對DPPH·的清除能力由大到小順序?yàn)?50%乙醇提取物>75%乙醇提取物>25%乙醇提取物>水提取>100%乙醇提取物>正丁醇提取物>乙酸乙酯提取物。

表明紅樹莓不同溶劑提取物對DPPH·清除能力與提取溶劑的極性相關(guān),不同極性溶劑得到的紅樹莓提取物的有效成分的含量之間存在差異,溶劑的極性越小,得到的紅樹莓提取物對DPPH·清除率越低。綜合比較發(fā)現(xiàn):乙醇水溶液提取物>水提取>正丁醇提取物>乙酸乙酯提取物。本研究中不同濃度的乙醇水溶液對DPPH·的清除能力不同,但乙醇水溶液提取物對DPPH·的清除能力優(yōu)于純有機(jī)溶劑提取物。

2.2.2 對羥基自由基清除能力分析 紅樹莓不同溶劑提取物對羥基自由基清除率測定結(jié)果見圖6。

圖6 紅樹莓不同溶劑提取物對羥基自由基的清除率Fig.6 The scavenging capacities of red raspberry extracts with various solvents against OH· radicals

由圖6可知,當(dāng)樣品濃度在0.3～3 mg/mL之間時(shí),紅樹莓不同溶劑提取物清除羥基自由基的能力隨著濃度的增大而增強(qiáng);當(dāng)濃度為0.3 mg/mL時(shí),25%乙醇提取物、75%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物和水提物均已達(dá)到較高清除率,但隨著濃度增加,清除率增長幅度減弱。韓加等[19]研究發(fā)現(xiàn)新疆紅樹莓果實(shí)對羥基自由基在較低濃度時(shí)便具有很好的清除率,但濃度過高時(shí)清除率不增高,與本研究結(jié)果一致。當(dāng)濃度為3 mg/mL時(shí),除100%乙醇提取物外其他溶劑提取物對羥基自由基的清除率均大于50%,但清除效果弱于VC。當(dāng)濃度大于3 mg/mL時(shí),清除率變化趨于平緩。紅樹莓不同溶劑提取物的對羥基自由基的清除能力與其質(zhì)量濃度呈量效關(guān)系。

紅樹莓不同溶劑提取物清除羥基自由基的IC50值見表2。

由表2可知,紅樹莓不同溶劑提取物清除羥基自由基的IC50值均大于VC,表明它們清除羥基自由基能力較VC弱。紅樹莓不同溶劑提取物對羥基自由基的清除能力由大到小順序?yàn)?5%乙醇提取物>水提取物>乙酸乙酯提取物>50%乙醇提取物>正丁醇提取物>25%乙醇提取物>100%乙醇提取物。韓加等[19]研究新疆紅樹莓果實(shí)對羥基自由基清除率由大到小的順序?yàn)?乙酸乙酯部位>正丁醇部位>水部位,與本研究結(jié)果存在差異?？赡苡捎诒狙芯恐幸宜嵋阴ゲ皇亲鳛檩腿∪軇?shí)驗(yàn)中的粗提物進(jìn)行萃取。

2.2.3 總還原能力分析 紅樹莓不同溶劑提取物總還原力測定結(jié)果見圖7。

圖7 紅樹莓不同溶劑提取物的總還原能力Fig.7 The total reducing capacities of red raspberry extracts with various solvents

由圖7可知,紅樹莓不同溶劑提取物的總還原能力與樣品濃度呈良好的效量關(guān)系。當(dāng)濃度為0.3～2 mg/mL時(shí),75%乙醇提取物總還原能力強(qiáng)于VC,其他6種提取物總還原能力弱于VC。李麗華[20]研究發(fā)現(xiàn)蘋果皮的60%乙醇提取物還原能力優(yōu)于水提取物、無水乙醇提取物、乙酸乙酯提取物,與本研究結(jié)果相近?？赡苡捎谳^高濃度的乙醇水溶液更好地溶出的活性成分,具有更好的還原能力。

對紅樹莓不同溶劑提取物的總還原力曲線進(jìn)行線性模擬回歸處理,得出線性模擬方程及相關(guān)系數(shù)見表3。

表3 紅樹莓不同溶劑提取物的總還原能力分析

Table 3 The analysis of the total reducing capacity of red raspberry extracts with various solvents

項(xiàng)目線性方程SigR2水提物y=0219x+02800000099625%乙醇提取物y=0297x+01240000098950%乙醇提取物y=0290x+01330001098675%乙醇提取物y=0287x+035900370813100%乙醇提取物y=0241x-009100060942乙酸乙酯提取物y=0188x-002400010983正丁醇提取物y=0143x+002000010986VCy=1705x+038600000988

注:y:吸光值,x:樣液濃度(mg/mL)。Sig.:回歸關(guān)系的顯著性系數(shù),Sig.≤0.05,說明回歸關(guān)系具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表4 紅樹莓不同溶劑提取物的抗氧化活性與活性成分含量的相關(guān)性分析

Table 4 The correlation analysis between the antioxidant activities and the contents of active ingredients in red raspberry extracts with various solvents

項(xiàng)目總酚黃酮原花青素花色苷總還原力對羥基自由基IC50值對DPPH·IC50值總酚-0804??0761??0865??0831??0187-0889??黃酮--0813??0462?0549??0190-0508?原花青素---0879??0605??0054-0740??花色苷----0476?0184-0831??總還原力------0414?-0305對羥基自由基IC50值------0247對DPPH·IC50值-------

注:**表示在0.01水平上極顯著相關(guān),*表示在0.05水平上顯著相關(guān)。

由表3可知,除75%乙醇提取物外,其他提取物樣液的質(zhì)量濃度與總還原能力呈較好線性關(guān)系,水提物樣液的質(zhì)量濃度與總還原能力的線性關(guān)系最好。

2.3 活性成分含量與抗氧化能力的相關(guān)性分析

對提取物抗氧化活性與活性成分含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果見表4。

由表4可知,本研究中紅樹莓不同溶劑提取物中總酚與黃酮、原花青素和花色苷呈極顯著相關(guān)(r=0.804,p<0.01;r=0.761,p<0.01;r=0.865,p<0.01)。黃酮與原花青素呈極顯著相關(guān),與花色苷呈顯著相關(guān)。原花青素與花色苷相關(guān)性最大,呈極顯著相關(guān)(r=0.879,p<0.01)。

紅樹莓不同溶劑提取物的總還原能力與總酚、黃酮和原花青素極顯著相關(guān),這與劉文旭等[21]研究結(jié)果一致,與花色苷顯著相關(guān);DPPH·的清除能力與總酚、原花青素和花色苷呈極顯著相關(guān)(r=-0.889,p<0.01,r=-0.740,p<0.01,r=-0.831,p<0.01),與黃酮顯著相關(guān)(r=-0.508,p<0.05)。王睿婷等[22]和王友升等[23]研究發(fā)現(xiàn),紅樹莓果對DPPH·的清除率與多酚和黃酮顯著相關(guān),與花色苷的相關(guān)性較小,這與本研究結(jié)果不完全一致;Golmohamadi等[24]研究發(fā)現(xiàn)紅樹莓果中花色苷含量越高,其對DPPH·的清除率越高,兩者相關(guān)性顯著,與本研究結(jié)果一致。由表4還可發(fā)現(xiàn),紅樹莓不同溶劑提取物中總酚與黃酮、原花青素和花色苷與對羥基自由基清除能力不相關(guān)。但總還原力與對羥基自由基清除能力呈顯著相關(guān)(r=-0.414,p<0.05)。比較分析發(fā)現(xiàn),紅樹莓不同溶劑提取物中活性成分含量與總還原能力、對DPPH·清除能力均具有相關(guān)性,與對羥基自由基清除率不相關(guān)。這可能是由于不同溶劑提取物中各活性成分的含量也存在差異,而復(fù)雜的活性成分之間的相互協(xié)同或拮抗作用影響了提取物不同的抗氧化能力,或者不同的提取溶劑對活性成分溶出情況的不同,間接影響了提取物的抗氧化能力。

綜合分析,紅樹莓不同溶劑提取物抗氧化活性與總酚、原花青素含量相關(guān)性較大,Maksimovic等[25]發(fā)現(xiàn),秋福果實(shí)的抗氧化活性與總酚含量相關(guān)性極顯著(R2=0.9999,p<0.01),與原花青素含量的相關(guān)性也極顯著(R2=0.9939,p<0.01)。

3 結(jié)論

7種提取溶劑對紅樹莓提取物中各活性成分含量均有差異,50%乙醇提取物中各活性成分含量均為最高。而乙酸乙酯和正丁醇提取物中活性成分含量相對較低。說明乙醇水溶液能夠更好的溶出紅樹莓中的活性成分。

紅樹莓7種不同溶劑提取物均具有一定抗氧化能力,且與質(zhì)量濃度在一定范圍內(nèi)呈量效關(guān)系。75%乙醇提取物和50%乙醇提取物的抗氧化活性較強(qiáng),而100%乙醇提取物和乙酸乙酯提取物的抗氧化活性相對較弱。相關(guān)性分析結(jié)果表明,紅樹莓提取物的抗氧化活性與總酚、原花青素具有較大相關(guān)性。由此推斷,50%～75%的乙醇水溶液能夠更好的溶出紅樹莓中的活性成分,提高活性成分含量,從而影響提取物的抗氧化活性,紅樹莓提取物的抗氧化活性與酚類活性物質(zhì)有較大相關(guān)性,但不同溶劑提取物中活性成分的具體組成還需要進(jìn)一步研究。

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Antioxidant activity of different solvents extracts from red raspberry

NING Wei-yu1,FENG Jian-wen1,LV Chang-shan2,WANG Jin-ling1,*,KUANG Hui1,YAO Li-min1

(1.School of Forestry,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China; 2.Applied Technique College,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China)

Theantioxidantcapacitiesofsevendifferentextractionsofredraspberry,whichwereextractedwithdistilledwater,25%ethanol,50%ethanol,75%ethanol,100%ethanol,ethylacetateandn-butylalcohol,respectively,werecomparedusingantioxidantdeterminingmethodsin vitro.Resultsshowedthatthehighestcontentsoftotalphenols,flavonoids,proanthocyanidinsandanthocyaninsweredeterminedin50%ethanolextracts,whichwererespectivelyupto257.19,10.48,406.45mg/100gand22.47mg/100g.Thetotalreducingcapacitiesof50%ethanolextractsapproachedtoVc’s.Exceptfor50%and75%ethanolextracts,theothersheldweakercapacityofscavengingDPPH·thanthatofVc’sandnoneheldstrongercapacityofscavengingOH·thanthatofVc’s.Theanalysispointedthatinextractionsfromredraspberry,therewererelativelysignificantcorrelationsbetweenthetotalphenolsandthecapacitiesofscavengingDPPH·andthetotalreducingcapacities,respectively.Conclusively,50%～75%ethanol-aqueoussolventofredraspberryextractsheldstrongerantioxidantactivity.

redraspberry;varioussolvents;extracts;antioxidantactivities

2016-04-05

寧瑋鈺(1988-),女,碩士研究生,研究方向:植物源活性物質(zhì)研究，E-mail:ningweiyu2010@163.com。

*通訊作者:王金玲(1975-),女,博士，副教授,研究方向:植物源活性物質(zhì)研究，E-mail:wangjinling08@163.com。

中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目(2572014CA14)。

TS255.1

A

1002-0306(2016)19-0117-06

10.13386/j.issn1002-0306.2016.19.014