富硒飼料對仿刺參成參的飼喂效果研究

黨子喬+楊申+魯曉倩+張敏+周瑋

摘要：選用養(yǎng)殖規(guī)格仿刺參Apostichopus japonicus成參72頭（40.31±1.27g），分別按蛋氨酸硒添加量0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/kg進(jìn)行分組強(qiáng)化飼喂。試驗(yàn)進(jìn)行28天，平均水溫13 ℃，鹽度27‰，pH 8.1，試驗(yàn)結(jié)束時分別測定各組成參的特定生長率（SGR）、攝食率（IR）、排糞率（FPR）、飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）和表觀消化率（AD）。結(jié)果表明：特定生長率、攝食率和排糞率在硒添加量為0.6 mg/kg時分別達(dá)到最大值0.22%/d、0.0121 g/g·d、0.006 4 g/g·d，與對照組差異顯著（P<0.05）；飼料轉(zhuǎn)化率在硒添加量為0.4 mg/kg時達(dá)到最大值為18.37%，與對照組差異不顯著（P>0.05）；成參對飼料中干物質(zhì)、粗蛋白的表觀消化率在硒添加量為0.6 mg/kg時達(dá)到最大值42.25%，79.61%，與對照組差異顯著（P<0.05），飼料粗脂肪的表觀消化率在硒添加量為0.8 mg/kg時達(dá)到最大值95.52%，與對照組差異顯著（P<0.05）。綜合生長性能和飼料利用情況，飼料中添加0.6～0.8 mg/kg的硒較為適宜。

關(guān)鍵詞：仿刺參成參；富硒飼料；飼喂效果

硒（Se）是動物體必需的微量元素，在飼料中適量添加硒化合物，對動物生長、攝食、消化等方面具有良好的促進(jìn)作用[1]。近年來，有關(guān)水產(chǎn)動物硒強(qiáng)化飼喂的報道較多。胡先勤[2]等在對鯽魚Carassius aumtus的硒強(qiáng)化飼喂的研究中發(fā)現(xiàn)，投喂富硒飼料的4個試驗(yàn)組的個體增重率與對照組相比，提高幅度在1.32%～15.37%之間；梁萌青[3]等對鱸魚Lateolabrax japonicus進(jìn)行亞硒酸鈉強(qiáng)化投喂時發(fā)現(xiàn)，硒水平為0.4 mg/kg時，鱸魚的餌料系數(shù)較對照組降低了34%，魚體粗蛋白的含量提高了1.5倍。

硒不僅是動物體必需的微量元素，也是人體生理必需的微量元素。據(jù)報道，我國缺硒省份達(dá)22個，有82%的縣（市）為低硒或缺硒區(qū)，并且人類的40余種疾病與缺硒有關(guān)[4]。開發(fā)富硒水產(chǎn)品，是人類補(bǔ)硒的方法之一。仿刺參Apostichopus japonicus是我國海珍品養(yǎng)殖的主要種類之一。相關(guān)研究顯示，仿刺參富硒強(qiáng)化飼料研究，不僅有助于提高仿刺參生長速度和抗病能力，提高養(yǎng)殖生產(chǎn)效率，還可以通過仿刺參對硒的富集作用，開發(fā)富硒仿刺參產(chǎn)品，提高養(yǎng)殖仿刺參的營養(yǎng)價值和市場價值。

相關(guān)研究表明，特定生長率、餌料系數(shù)為評價飼料飼喂效果的主要指標(biāo)[5]。學(xué)者在研究富硒飼料對有關(guān)水產(chǎn)動物飼喂效果時已特定生長率為指標(biāo)，證明了投喂富硒飼料將鳡魚Elopichthys bambusa[6]、異育銀鯽[7]、鱸魚[3]的特定生長率分別提高了23.00%、15.37%、62%；其他學(xué)者在研究富硒飼料對草魚Ctenopharyngodon idella[8]、凡納濱對蝦Litopenaeus vanname[9]、方斑東風(fēng)螺Babylonia areolata[10]等水產(chǎn)動物飼喂效果時，以飼料系數(shù)為指標(biāo)，飼料系數(shù)分別降低了11.20%、18.00%、27.64%。除此之外，攝食率和排糞率以及表觀消化率也是評價飼料營養(yǎng)價值的重要內(nèi)容[11-13]。殷旭旺[14]等在研究不同海藻飼料對仿刺參幼參飼喂效果時，以攝食率和排糞率為指標(biāo)，證明了投喂鮮孔石莼磨碎液飼喂幼參效果最佳；王吉橋[15]等對仿刺參幼參投喂蛋氨酸硒發(fā)現(xiàn)，當(dāng)硒添加量為0.6 mg/kg時，幼參干物質(zhì)的表觀消化率提高了28.88%，粗蛋白的表觀消化率提高了18.79%，并且證明了蛋氨酸硒可以增強(qiáng)幼參的免疫力。

本文選用蛋氨酸硒對仿刺參成參強(qiáng)化投喂，從個體生長和飼料利用角度探討富硒飼料對仿刺參成參的飼喂效果。擬為富硒海參飼料的研究與開發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

仿刺參：選取仿刺參成參72頭，平均體重為40.31±1.27 g，試驗(yàn)環(huán)境下馴養(yǎng)10 d。

基礎(chǔ)飼料：市售仿刺參配合飼料（含粗蛋白15.00%，粗脂肪3.21%，粗灰分47.33%，硒含量為0.298 1 mg/kg），在烤箱中以60 ℃烘干至恒重備用。

試驗(yàn)設(shè)備：18個40 L水槽（47 cm×35 cm×25 cm），電烤箱（廣東美的微波電器制造有限公司，MG25AF-PRR），絞肉機(jī)（廣東韶關(guān)市大金食品機(jī)械廠，MM22B），天平（1 200 g/0.01），300目篩絹網(wǎng)，集糞工具，索氏脂肪抽提器，凱氏定氮儀，凱氏燒瓶，虹吸管，干燥器，蛋白消煮裝置，分光光度計，電磁爐，容量瓶，滴定管，玻璃珠，YSI ProuPlus型手持式野外/實(shí)驗(yàn)室兩用測量儀等。

試驗(yàn)藥品：濃硫酸、鹽酸、硝酸、乙醚、高氯酸、硼酸、氫氧化鈉、三氧化二鉻、可溶性淀粉、鉬酸鈉、蔗糖、硫酸銨、無水硫酸鈉、石油醚、丙酮（以上均為分析純）、蛋氨酸硒（成都格雷西亞化學(xué)技術(shù)有限公司，98%）。

1.2方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計

制備試驗(yàn)飼料：準(zhǔn)確稱取硒含量為0、0.1、02、0.3、0.4、0.5 mg的蛋氨酸硒，分別倒入375 mL的水中，各加入15 g淀粉，加熱至80 ℃使其糊化；準(zhǔn)確稱取500 g基礎(chǔ)飼料6份分別與6份糊化淀粉混合均勻，用絞肉機(jī)將混合后的原料分別制成6種顆粒狀飼料，在烤箱中以60 ℃烘干至恒重備用。

分組：將72頭仿刺參成參隨機(jī)平均分成6組，分別按照對照組、A、B、C、D、E均勻分組（硒添加量分別為0、0.2 mg/kg、0.4 mg/kg、0.6 mg/kg、0.8 mg/kg、1.0 mg/kg），每組設(shè)3個重復(fù)，每個水槽中放4頭仿刺參成參。

投喂：各組每天17：00按體重3%～5%投喂對應(yīng)的飼料，并根據(jù)攝食、附著及生長情況適當(dāng)增減，試驗(yàn)進(jìn)行28 d（試驗(yàn)海水溫度13 ℃；pH 8.1；鹽度27‰）。

樣品收集：每天14：30采用虹吸法分別收集殘餌和糞便，然后換水1/2。殘餌和糞便的收集采用300目篩絹網(wǎng)過濾，70 ℃條件下烘干至恒重，干燥保存，備測。

1.2.2生化指標(biāo)的測定在試驗(yàn)開始和結(jié)束階段，分別記錄各組仿刺參成參的質(zhì)量和個數(shù)。以下列方法測定其生化指標(biāo)，每個樣品指標(biāo)重復(fù)3次。

消化率：指示劑法，三氧化二鉻為標(biāo)記物

粗蛋白：凱氏定氮法

粗脂肪：索氏抽提法，乙醚為抽提劑

粗灰分：550 ℃高溫爐灼燒法

以下列公式計算：

特定生長率（specific growth rate，SGR）：

SGR（%/d）=[（lnWt-lnW0）/T]×100%；

攝食率（ingestion rate，IR）：

IR（g/g·d）=C/[T×（Wt+W0）/2]；

排糞率（feces production rate，F(xiàn)PR）；

FPR（g/g·d）=F /[T×（Wt+W0）/2]；

飼料轉(zhuǎn)化率（feed conversion ratio，F(xiàn)CR）；

FCR（%）=[（Wt-W0）/C]×100%；

表觀消化率（apparent digestibility，AD）：

總表觀消化率=（1-飼料中Cr2O3含量/糞便中Cr2O3含量）×100%

其中，Wt和W0分別為每一水槽中仿刺參成參的初始和終末濕重；T為試驗(yàn)時間（d）；C為攝食的飼料干重（g）；F為排出的糞便干重（g）。

1.3數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SE）表示，應(yīng)用SPSS16.0軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，并進(jìn)行LSD多重比較，P<0.05為差異顯著。

2結(jié)果

2.1仿刺參成參的特定生長率

在試驗(yàn)所設(shè)條件下，成參的特定生長率隨飼料中硒添加量的升高呈“低—高—低”拋物線型的變化趨勢（如圖1所示）。對照組（0 mg/kg）的特定生長率最低，為0.13%/d，A組（0.2 mg/kg）的特定生長率為0.18%/d，B組（0.4 mg/kg）的特定生長率為0.21%/d，C組（0.6 mg/kg）的特定生長率升至最高，為0.22%/d。此后，隨著硒添加量的逐漸升高，特定生長率逐漸降低，D組（0.8 mg/kg）的特定生長率為0.20%/d，E組（1.0 mg/kg）的特定生長率為0.19%/d。

其中標(biāo)有相同字母組間差異均不顯著（P>0.05）。標(biāo)有不同字母組間差異均顯著（P<005）。

2.2仿刺參成參的攝食率和排糞率

如圖2、3所示，成參的攝食率和排糞率隨飼料中硒添加量的逐漸升高均呈現(xiàn)“低—高—低”拋物線型的變化趨勢。

攝食率方面，對照組（0 mg/kg）攝食率最低為0.009 7 g/g·d，A組（0.2 mg/kg）攝食率為0.01 g/g·d，B組（0.4 mg/kg）攝食率為0.011 5 g/g·d，C組（0.6 mg/kg）攝食率達(dá)到最大，為0012 1 g/g·d。此后，隨著硒添加量的逐漸升高，成參的攝食率逐漸降低，D組（0.8 mg/kg）攝食率為0.011 4 g/g·d，E組（1.0 mg/kg）攝食率為0.011 3 g/g·d。

排糞率方面，對照組（0 mg/kg）排糞率為0005 8 g/g·d，A組（0.2 mg/kg）排糞率為0005 9 g/g·d，B組（0.4 mg/kg）排糞率為0006 2 g/g·d，C組（0.6 mg/kg）排糞率最高，為0.006 4 g/g·d，此后隨著硒添加量的升高，成參的排糞率降低。D組（0.8 mg/kg）排糞率為0006 g/g·d，E組（1.0 mg/kg）排糞率最低為0.005 6 g/g·d。

其中標(biāo)有相同字母組間差異均不顯著（P>0.05）。標(biāo)有不同字母組間差異均顯著（P<005）。

2.3成參的飼料轉(zhuǎn)化率

本試驗(yàn)所設(shè)條件下，成參的飼料轉(zhuǎn)化率隨硒添加量的增加呈“低—高—低”拋物線型的變化趨勢（如圖4）。對照組（0 mg/kg）飼料轉(zhuǎn)化率最低為13.34%，A組（0.2 mg/kg）飼料轉(zhuǎn)化率為1685%，B組（0.4 mg/kg）飼料轉(zhuǎn)化率達(dá)到最高為18.37%。此后隨著硒添加量的升高，成參的飼料轉(zhuǎn)化率逐漸降低，C組（0.6 mg/kg）飼料轉(zhuǎn)化率為18.36%，D組（0.8 mg/kg）飼料轉(zhuǎn)化率為17.83%，E組（1.0 mg/kg）飼料轉(zhuǎn)化率為16.86%。

其中各組之間差異均不顯著（P>0.05）。

2.4成參的表觀消化率

在本試驗(yàn)所設(shè)條件下，隨著硒添加量的升高，各試驗(yàn)組成參的干物質(zhì)和粗蛋白表觀消化率呈先升高后降低的變化趨勢（表1）。對照組（0 mg/kg）干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率最低，分別為38.98%和74.63%，A組（0.2 mg/kg）的干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率為39.71%、74.67%，B組（0.4 mg/kg）的干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率為41.82%、79.54%，在C組（0.6 mg/kg）的干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率達(dá)到最大值分別為4225%、79.61%。此后隨著硒添加量的升高，干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率逐漸降低，D組（0.8 mg/kg）的干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率為4161%，79.57%，E組（1.0 mg/kg）的干物質(zhì)和粗蛋白的表觀消化率為40.59%、76.51%。

對照組（0 mg/kg）的粗脂肪的表觀消化率為90.16%，A組（0.2 mg/kg）粗脂肪的表觀消化率下降至最低為90.11%，此后隨著硒添加量的升高，成參粗脂肪的表觀消化率呈先升后降的趨勢。B組（0.4 mg/kg）粗脂肪的表觀消化率為9051%，C組（0.6 mg/kg）粗脂肪的表觀消化率為95.51%，D組（0.8 mg/kg）粗脂肪的表觀消化率最高為95.52%，此后隨著硒添加量的升高，粗脂肪的表觀消化率下降，E組（1.0 mg/kg）粗脂肪的表觀消化率下降至90.21%。

3.1富硒飼料對成參的飼喂效果

硒對動物生長有促進(jìn)作用。超過該范圍會引起硒缺乏癥或急、慢性中毒，該關(guān)系是硒的Weinberg原理，即硒的劑量-效應(yīng)關(guān)系曲線[16-17]。BELL[18]、HICKS[19]等發(fā)現(xiàn)，缺硒飼料飼喂虹鱒Oncorhynchus mykiss，發(fā)現(xiàn)部分虹鱒表現(xiàn)失調(diào)；硒含量過高時，虹鱒死亡率升高，體質(zhì)量降低；梁萌青[3]等在硒強(qiáng)化投喂鱸魚過程中發(fā)現(xiàn)，硒添加量在0.4 mg/kg時，鱸魚的成活率、特定增長率、飼料效率均達(dá)到最大值，硒缺乏或過量均對鱸魚生長和成活產(chǎn)生不利影響。蘇傳福[8]等報道，在飼料中添加0.6 mg/kg時，草魚的特定生長率、增重率和飼料轉(zhuǎn)化率均達(dá)到最大值，硒添加量高于或低于0.6 mg/kg草魚的生長受到抑制。譚燕華[10]等報道，硒對方斑東風(fēng)螺的適宜添加量為0.8 mg/kg，此時，螺的增重率和殼增長率分別提高了17.8%和14.6%，且肌肉的灰分和蛋白質(zhì)含量最高。本試驗(yàn)中，C組（0.6 mg/kg）成參的特定生長率、攝食率、排糞率以及干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪的表觀消化率均達(dá)到最高，硒的添加量缺乏或過量，均導(dǎo)致成參生長、攝食、消化受到抑制。本試驗(yàn)結(jié)果符合Weinberg原理描述的曲線型變化趨勢。

蛋氨酸硒是硒取代蛋氨酸中硫所得產(chǎn)物，具有化學(xué)穩(wěn)定性，適口性好等特點(diǎn)[15]。本試驗(yàn)證明了添加蛋氨酸硒，促進(jìn)了成參的生長。成參生長速度加快、攝食量增大，導(dǎo)致排糞率提高。干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪是飼料中主要的營養(yǎng)物質(zhì)，從能量流動角度而言，成參的生長與三種營養(yǎng)物質(zhì)的含量之間存在著平行的關(guān)系，相互印證。B組（0.4 mg/kg）成參飼料轉(zhuǎn)化率最高，說明飼料中添加硒，可以提高飼料效率，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化利用。綜上所述，富硒飼料對成參有非常好的飼喂效果，各指標(biāo)之間產(chǎn)生一定的協(xié)同作用，使成參的生長、攝食、消化、代謝均達(dá)到最佳狀態(tài)。

3.2富硒飼料對成參飼喂效果的最適添加量

特定生長率、飼料轉(zhuǎn)化率、消化率的測定是評價飼料營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)[20]。本試驗(yàn)中，特定生長率的最高值出現(xiàn)在0.6 mg/kg。飼料轉(zhuǎn)化率的變化較對照組比較，差異均不顯著。說明在基礎(chǔ)飼料中添加硒，對成參的飼料轉(zhuǎn)化率的影響并不大。其次，成參對干物質(zhì)、粗蛋白、粗脂肪的表觀消化率在硒的不同添加量達(dá)到了最大值。王吉橋[15]等報道，硒在仿刺參不同器官中的富集效果不同，因此成參對粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的表觀消化率的最佳添加量也有所差異。綜合分析評價飼料飼喂效果的指標(biāo)，在本試驗(yàn)條件下，0.6～0.8 mg/kg為富硒飼料強(qiáng)化成參的最佳添加量。

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